平板菌落计数法说明
平板菌落计数法的详细步骤如下:
1.1 样品处理与稀释
- 取25g(或25ml)无菌检样,加入225mL灭菌生理盐水,置入预置玻璃珠的玻璃瓶或乳钵中,充分振荡制成1:10稀释液。固体样品需经均质器处理1分钟。然后,用1ml吸管取1:10稀释液,加入9ml生理盐水,振摇混合成1:100稀释液,按此顺序制作10倍递增稀释液。
- 确保操作过程遵循无菌原则,使用灭菌器皿和消毒工具,样品取样处需擦拭消毒。
- 采样时需均匀分布,固体样品需多部位取样。
- 为减少误差,稀释时应充分振荡,每次换用新吸管,且注意吸管操作方法。
- SN标准推荐取10ml稀释液注入90ml缓冲液。
1.2 倾注培养
- 选择2-3个适宜稀释度,分别取样1ml注入灭菌平皿,每种稀释度做两个平板,加入琼脂培养基并混匀,制作空白对照。
- 倾注培养基需在46℃保温,注入量15ml为宜,注意温度和混合均匀。
- 培养后菌落应在平板上均匀分布,且在20min内完成倾注。
- 培养条件通常为36±1℃,48±2h,必要时可设对照平板。
1.3 计数与报告
- 培养后计数每个平板菌落数,选取30~300菌落的平板,按稀释倍数计算样品中菌落总数。
- 计数应在规定时间内完成,超过需冷藏保存,但不超过24h。
- 根据菌落数区间和稀释倍数,采取适当计算方法,如平均数、估算值等。
- 特殊情况如链状和片状菌落,需特殊处理计数。
- 若菌落数过多,可取部分平板计数。
扩展资料
平板菌落计数法,是种统计物品含菌数的有效方法。方法如下:将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液涂布到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞;统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
平板菌落计数法的菌落总数介绍
当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克(每毫升)检样所生长出来的细菌菌落总数。按国家标准方法规定,即在需氧情况下,37℃培养48h,能...
平板菌落计数适用于哪些微生物
平板计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个微生物繁殖而形成的现象进行的,也就是一个菌落可代表一种微生物,并不绝对,通常用来测定样品中所含细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物的数量。
菌落总数平板计数原则是什么
所以平板上形成的菌落数比实际菌落数低。采用的培养基或培养条件有选择性,难以平等地区分所有的微生物,而且稀释液可能会抑制某类(种)微生物。为了更准确地阐述平板菌落计数的结果,现倾向于用菌落形成单位表示样品中的微生物数量。以上内容参考:百度百科-平板菌落计数法、百度百科-平板计数法 ...
如何根据平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数
4、考虑实验误差:需要注意的是,实验结果会受到多种因素的影响,如样品处理、培养基质量、培养条件等。为了验证结果的准确性,可以进行一些验证实验,如重复实验、对比不同稀释度等。检测菌落数的方法:1、平板计数法:将待测样品经适当稀释后,取一定量的稀释液均匀涂布在平板上,培养后计数菌落数目,...
黑曲霉涂板怎么看菌落数
黑曲霉涂板看菌落数方法如下:1、取出已经培养好的涂板,检查是否有任何污染或者缺陷。2、使用放大镜观察涂板上的菌落,通常黑曲霉菌落呈黑色或者灰色,大小和形状不一。3、使用菌落计数器或者计数器进行计数,将涂板上的所有黑曲霉菌落逐一计数。4、记录计数结果,通常以单位面积上的菌落数来表示。例...
平板活菌计数法的实验结果如何正确表述
平板活菌计数法的实验结果表述如下。若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜技术范围内,计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每g(ml)样品中菌落总数结果。
菌落总数计算公式
4、孔上接种后,将培养皿倒置于培养箱中,按照菌落生长的需要的不同环境条件,放置一定时间,直至菌落生长足够明显,数目不会再增加。5、计算计数板上的菌落数量N,然后计算菌落总数,公式为:N×(1\/d)×V。其中,1\/d即是取的菌落数量与总样品量的比率,因此乘上V就可以计算出菌落总数。举例说明:...
求帮助:平板菌落计数法特点及结果分析
一般过程就是十倍倍比稀释以后倾注平板,规定条件培养。这是最常用的,只是容易混淆食物残渣。如果涂布平板的话好处就是全部长在表面,是不是残渣很清楚菌落形态也看得清楚但是只滴了一滴取样代表性差一点。另外还有点滴平板。这种菌落计数的方式只能找出能在一般培养基生长的需氧或兼性厌氧的菌。0的是没...
微生物计数方法有哪些?
测定微生物细胞数目的方法有很多,介绍几种 1.血细胞计数法 将稀释的菌液样品滴在血细胞计数板上,在显微镜下计算4~5个中格的细菌数,并求出每个小格所含细菌的平均数,再以此为依据,估算总菌数。①此法的缺点是不能区分死菌和活菌。②对压在小方格界线上的细菌,应当取平均值计数。③此法可...
大肠菌群第二法(平板计数法)与菌落总数测定对照,有何区别?
1、平板计数法优点。1、能测出样品中的活菌数,直观,能够直接读数2、平板菌落计数法通常做梯度稀释,所以计数的线性范围大。3、由于是菌悬液倾注或涂布,所以比较均匀,能较好的反应菌落的疏密程度。4、灵敏,平行性较好。2、平板计数法缺点:1、手续较繁,而且测定值常受各种因素的影响。2、厌氧或微...
诺咳龙牡: 菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成.当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落....
泸县17376155959: 平板菌落计数法的特点 - ?
诺咳龙牡: 1. 操作比较繁琐 2. 只能检测活菌 3. 由于待测样品往往不宜完全分散成单个细胞,所以,长成的一个单菌落也可能来自样品中的2~3或更多个细胞.因此平板菌落计数的结果往往偏低.
泸县17376155959: 平板菌落计数法下分几种类型,每种类型的操作步骤分别是什么,优缺点分别是什么? - ?
诺咳龙牡:[答案] 1、平板倾注法\x05\x05 1)、以无菌操作,将检样25g(或25ml)剪碎放于含有225ml灭菌生理盐水的广口瓶内(瓶内置有适量玻璃珠)或灭菌研钵内,经充分振摇或研磨用成1:10的均匀稀释液. 2)、用1.0ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1.0ml,沿管壁徐徐注...
泸县17376155959: 关于平板菌落计数法的问题 一直没有思考的很明白 求解 - ?
诺咳龙牡: 这应该考虑到误差可以接受的程度问题.两个菌落数在可以接受的范围内相当于取均值;太大的比值意味着菌落数大的那个样本稀释程度不够,倾向于取小的那个数值.
泸县17376155959: 食品微生物平板计数长了霉菌怎么计数 - ?
诺咳龙牡: 平板菌落计数法,是种统计物品含菌数的有效方法.方法如下:将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液涂布到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞;统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数. 但是,由于待测样品往往不宜完全分散成单个细胞,所以,长成的一个单菌落也可能来自样品中的2~3或更多个细胞.因此平板菌落计数的结果往往偏低.为了清楚地阐述平板菌落计数的结果,现在已倾向使用菌落形成单位(cfu:colony-forming units),而不以绝对菌落数来表示样品的活菌含量.
泸县17376155959: 怎样用平板菌落计数法测定微生物活菌数? - ?
诺咳龙牡:[答案] 1.先将微生物制成菌悬液 2.梯度稀释 3.涂平板 4.培养,计算菌落数,然后算出菌悬液单位体积的活菌数
泸县17376155959: 试比较平板菌落计数法和显微镜下直接计数法的优缺点 - ?
诺咳龙牡:[答案] 微生物显微镜直接计数法随机性大,所以对菌体数量不能做出较为宏观,全面的反应.显微镜直接计数法一般与血球计数板配套使用.但显微镜直接计数法的优点是快速,观察到马上可以计数. 平板菌落计数法最大的缺点是速度慢,需要平板上长出菌落...
泸县17376155959: 平板涂布菌落计数法和倾倒平面培养基菌落计数法的区别 - ?
诺咳龙牡: 涂布法是先加培养基,待培养基冷却后再加一定体积的菌液(可做适当的稀释),用涂布棒涂布均匀.倾倒法就是先加一定体积的菌液然后加培养基一起混匀,待冷却后倒置培养,这种方法也叫混菌法.一般来说,用涂布的方法多一点~