空气微生物采样研究的方法～

微生物的采样方法（详细点！）~

常用的空气微生物采样方法有四种：沉降法、固体撞击法、液体撞击法、滤过法。

最常用的是平板沉降法，其采集步骤是：在采样前先用紫外线对所要采样的房间照30分钟，使室内处于相对清洁、静止状态，然后将及时领取的新鲜营养琼脂平板，置室内四角及中央各一个，将平板盖打开扣于无菌巾上，暴露20分钟，加盖及时送检，以防污染。




1.2 采样方法
在0.33hm2左右的采样区域内，按15m×15m的面积划分为12个样方。1998年6月在每个样方中分别确定生长水平中等的Ⅰ度(1年生)、Ⅱ度（3年生）、Ⅲ度（5年生）竹各3株，分别在毛竹基部挖开，顺竹蔸取连在根上粒径小于1cm土壤作为根区土壤，并分别将Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度各3株竹的根区土样混合成一个样品，作为该样方Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度竹的根区土样。同时在每个样方的竹林中多点采集和根区土深度一致的林间土样1个，采集时尽量避开竹鞭，各点均离竹鞭5厘米以上。
1.3 分析方法
土样带回室内后分成两份，1份鲜样分析土壤微生物三大类；另1份风干、去杂、过筛后测定土壤各类酶活性。土壤微生物计数采用平板法[12]，细菌采用牛肉蛋白胨培养基；真菌采用马丁氏琼脂培养基；放线菌采用高泽1号琼脂培养基。土壤过氧化氢酶采用容量法；蔗糖酶采用二硝基水杨酸比色法；脲酶采用苯酚——次氯酸比色法；蛋白酶采用茚三酮比色法；磷酸酶采用磷酸苯二钠比色法。〔13〕

　　每种微生物都有其最适pH值和一定的pH范围。在最适范围内酶活性最高，如果其他条件适合，微生物的生长速率也最高。大多数细菌、藻类和原生动物的最适pH为6.5-7.5，在pH 4-10之间也可以生长；放线菌一般在微碱性即pH7.5-8最适合；酵母菌、霉菌则适合于pH5-6的酸性环境，但生存范围在pH1.5-10之间。有些细菌甚至可在强酸性或强碱性环境中生活。
　　微生物在基质中生长，代谢作用改变了基质中氢离子浓度。随着环境pH值的不断变化，微生物生长受阻，当超过最低或最高pH值时，将引起微生物的死亡。为了维持微生物生长过程中pH值的稳定，配制培养基时要注意调节pH值，而且往往还要加入缓冲物以保证pH在微生物生长繁殖过程中的相对稳定。
　　强酸和强碱具有杀菌力。无机酸杀菌力虽强，但腐蚀性大。某些有机酸如苯甲酸可用做防腐剂。强碱可用作杀菌剂，但由于它们的毒性大，其用途局限于对排泄物及仓库、棚舍等环境的消毒。强碱对革兰氏阴性细菌与病毒比对革兰氏阳性细菌作用强。
a、布点方法
室内面积≤30m2,对角线内、中、外设3点，内、外点布点部位距墙壁1m处。
室内面积>30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处。
b、采样方法
将营养琼脂平板（9cm）放在室内各采样点处，采样高度为距地面0.8-1.5m。采样时，将平板盖打开，暴露5min或10min，盖好平板，将平板置于36±1℃恒温箱培养48h，计数菌落数，并分离致病菌。
2、检测方法
结果计算公式：细菌总数（cfu/≤m3）=45000N/A*T
式中，A为平板面积（m3）。T为平板暴露时间（miu）.N为平板菌落数（cfu)
结果判定
参见《医院消毒卫生标准》GB15982-1995
Ⅰ类区域：细菌总数≤100cfu/m3,并且未检出致病菌为消毒合格。
Ⅱ类区域：细菌总数≤200cfu/m3,并且未检出致病菌为消毒合格。
Ⅲ类区域：细菌总数≤500cfu/m3,并且未检出致病菌为消毒合格。
注意事项：采样前，关好门窗，在无人走动的情况下，静止10min进行采样

空气浮游微生物采样器是根据颗粒撞击原理和等速采样理论设计。被采样的带有微生物的空气在抽气泵作用下，高速喷射并撞击到装有培养基的培养皿上，经培养后形成菌落予以计数。

对固体撞击式采样法与平板沉降法进行初步实验。结果表明，使用固体撞击式采样法测定空气微生物的含量总数与平板沉降法采获的总数结果差异有显著性,平板沉降法只能收集到较大颗粒的微生物，不能作精确的定量计数，它可作为一般卫生学的检验手段。固体撞击式采样法对悬浮于空气中小颗粒微生物捕获率高于沉降法，并能较准确地表达出空气中细菌的实际含量，是一种较理想的的采样方法。

气溶胶是指悬浮在空气中的微粒形成的胶体体系。以粒径为0.1~20.0μm的气溶胶颗粒与人类健康关系密切。空气中微生物主要来源于土壤、水体表面,动植物、人体及生产活动、污水污物处理等 ，其组成浓度不稳定，种类多样，有细菌、真菌、病毒、噬菌体等。空气中微生物以气溶胶形式存在，气溶胶即固态或液态微粒悬浮在气体介质中的分散体系。空气中悬浮的带有微生物的尘埃、颗粒物或液体小滴，就是微生物气溶胶。空气中微生物的多少是空气质量的重要标准之一。要了解空气中微生物的含量、种类、成分就必须将稀疏地散布的微生物气溶胶粒子采集到局限性的表面和小体积的介质中，以便观察和分析，这就需要特殊设计的空气微生物采样器。
碧水精仪系列气溶胶采样器
大流量生物气溶胶采样器EA-500
体积:390*140*220
重量:2.8kg
流量:500L/min
切割点:0.36um
电压:12V
功率:90W
工作温度:0-60℃
工作湿度:0-95%
采样管:40ml采集瓶
采样液:3-10ml
噪声:80分贝
电池运行时间:3小时
采样液挥发速度:约200ul/min(环境湿度20%)
仪器特点:流量大，采集效率高，一键启动，操作简单。符合人体工程学便携设计，一次性采集模块，防止交叉污染。

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东光县13784443832： 空气微生物采样研究的方法~ - ？
镇咳元胡： 空气浮游微生物采样器是根据颗粒撞击原理和等速采样理论设计.被采样的带有微生物的空气在抽气泵作用下,高速喷射并撞击到装有培养基的培养皿上,经培养后形成菌落予以计数. 对固体撞击式采样法与平板沉降法进行初步实验.结果表明,使用固体撞击式采样法测定空气微生物的含量总数与平板沉降法采获的总数结果差异有显著性,平板沉降法只能收集到较大颗粒的微生物,不能作精确的定量计数,它可作为一般卫生学的检验手段.固体撞击式采样法对悬浮于空气中小颗粒微生物捕获率高于沉降法,并能较准确地表达出空气中细菌的实际含量,是一种较理想的的采样方法.

东光县13784443832： 如何测收集空气中的菌数 - ？
镇咳元胡： 测定空气中微生物的方法很多,有滤过法、沉降法等,这里主要介绍沉降法.沉降法是利用带微生物的尘粒或液滴因重力自然落在培养基表面来测定的.实验证明,在空气中暴露 10min 后,每 100cm2 培养基表面生长的菌落数相当于 20L 空气...

东光县13784443832： 空气微生物采样一般过程 - ？
镇咳元胡： 每种微生物都有其最适pH值和一定的pH范围.在最适范围内酶活性最高,如果其他条件适合,微生物的生长速率也最高.大多数细菌、藻类和原生动物的最适pH为6.5-7.5,在pH 4-10之间也可以生长;放线菌一般在微碱性即pH7.5-8最适合;酵...

东光县13784443832： 微生物实验.自然沉降法检测空气中微生物数量的原理是什么? 此方法测出的是不是空气中微生物的全部数量? - ？
镇咳元胡： 通过自然沉降之后,在培养箱内进行培养,计数沉降在空气采样平皿内形成的菌落数,用于反应空气中的微生物数量. 并不能测出全部数量,测得值为菌落数而不是细菌个数,菌落数与细菌个数是有区别的.此外,如果在营养琼脂上不能生长的细菌,也不能通过常规的方法反应在菌落数上.

东光县13784443832： 空气细菌培养数是如何计算出来的 - ？
镇咳元胡： 1 空气细菌培养的采样方法 检测空气细菌总数的细菌培养法平板暴露法.此法简便,目前大部分医疗单位采用.在消毒处理后,操作前进行,室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点,内外点布位距墙壁1m处,室内面积>30m2设4角及中央5点...

东光县13784443832： 怎样的取样阀用怎样的微生物取样方法 - ？
镇咳元胡： 微生物取样方法 举例一:一、 空气采样及检验方法1培养基:普通营养琼脂平板,按GB4789.28中3.7条配制2采样(空气沉降法)2.1布点:面积小于30平方米的车间,设一对角线,在线上取3点,即中心一点,两端在距墙1米处各取一点;面积...

东光县13784443832： 如何做空气细菌培养科室每月都要做一次细菌培养,今 - ？
镇咳元胡： 1 对象与方法 1.1 对象 选择本院儿科输液室为研究对象.输液室面积约30 m2. 1.2 方法 1.2.1 采样时间 连续5 d内于每天8:00、10:00、12:00对儿科门诊输液室进行空气采样,中午休息时间进行消毒后效果监测. 1.2.2 采样方法 采用平板暴露法,输...

东光县13784443832： 空气中的微生物可通过哪些方法进行监测 - ？
镇咳元胡： 这个还得看你的微生物实验室的用途. 假如是做微生物限度检测的微生物实验室,应该是按洁净度级别来要求的,主要需要监测沉降菌和悬浮粒子两个指标.沉降菌用平板,悬浮粒子有专门的检测仪. 如果是发酵企业的微生物实验室,则还需要监测空气中的微生物种类,甚至还要看有没有噬菌体.

东光县13784443832： 手术室内空气微生物监测采样时应如何布点? ？
镇咳元胡： 进行手术室内空气微生物监测时应根据室内空间面积选择布点方法,若面积30m2时,应在中央及四角距墙lm处共取5点.布点高度应为垂直地面100~150cm.