如果细胞铺板比较多 怎么防止污染
防止细胞培养出现污染的方法如下：
1、从培养箱取放细胞前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。培养瓶放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。
2、操作的时候防护服、口罩、手套缺一不可。操作前，准备好所有实验所需物品，以减少走动，物品需有序摆放在超净台触手可及的地方，同时空留足够操作空间。
3、操作时，试剂不用尽量及时盖上盖子，移至操作区外围，尽量不要从开口容器上经过。
4、使用移液枪时，将容器倾斜以便于移液，切勿将枪杆碰触瓶口及内壁。一旦发生倒吸情况，要及时用酒精棉球擦拭，以免液体残留导致细菌滋生。
5、冻存细胞时冻存管盖子需拧紧。复苏细胞时，从液氮罐取出冻存管，轻拧盖子，以确认盖子是否拧紧。
扩展资料：
1、细菌污染培养基的处理方法。可在培养液中加相应的抗生素处理。可以用四环素，庆大霉素，或者链霉素，前两者的工作浓度是50 μg/mL；链霉素的工作浓度是100 μg/mL。
2、霉菌污染培养基的处理方法。细胞一旦被霉菌污染，很难挽救，两性霉素B或制霉菌素都于事无补，建议果断舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒。
参考资料：中国知网-防止细胞培养污染的技术措施
细胞培养最关键的还是操作，如果操作规范的话，污染几率是很小的，如果在培养的时候总是有黑色点状物质，可以考虑是不是细胞碎片或者血清里的蛋白质沉淀。
细胞污染可能原因：
1.天气太热，实验者在培养和接种或者换液时出汗（有空调稍好，但是手也出汗）。
2.培养间里可能暗藏污染原。
3.注意培养箱（这点最重要），仔细检查培养箱里的隔板的下面，有可能有霉菌斑。（我以前遇到过）
4.培养基污染多数是配置过程中造成的，仔细检查配置过程用到的器具。
5.血清过期一个月，如果保存的好应该没有问题，但是保存不好，新来的血清，用一次就可能污染。血清过期和污染是否有必然的联系不好说，我们觉得联系不大。
解决办法：
1.彻底清洁培养间，显微镜室。然后，紫外灯多照射一端时间消毒空气。
2.彻底清洁培养箱：（1）每个隔板仔细清洗，火烤。（2）培养箱大换水，换成新鲜干净的蒸馏水。（3）培养箱内壁用酒精棉球或者稀过氧乙酸认真擦洗。（4）紫外灯长时间照射（一天）。
3.实验用器械消毒：注意消毒时间和压力，有必要检查压力锅和校正压力表是否准确。
4.一次性手套在打开使用前一天放入无菌间照射消毒。
5.如果用双抗，应该现用现配。
6.注意过滤器的消毒灭菌。
7.经验告诉我们过期1年内的血清，只要保存妥当，其实血清的效价是不会降低的；还有刚购买的大规格的血清收到后，避免反复冻融，血清分装的时候要无菌分装，转入无菌间，在超净台内将血清分装入50-100ml血清瓶中封口，并于-20℃保存备用。分装时注意：① 预先要将血清轻轻摇动数周、混匀；② 用吸液管吹出血清时要注意：③ 不要吹出气泡，血清很粘稠，很容易产生气泡。如果产生气泡，则在酒精灯火焰上过一下。
8.检查培养间和超净台的通风过滤网，如果脏了，需要更换。
6孔板12孔板或24孔板，均采用将第一个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔一次类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底，加细胞悬液的时候可以避免加在中间中间细胞多，而加在周边晃匀后周边细胞多中间少的现象，细胞分散较均匀，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢，但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式，但力度没有96孔板好掌握，效果没有96孔板好，所以我放弃改用浸润孔底的方法。
2、细胞悬液加完后，将细胞培养板抬高，对着灯光，从底部往上看，看细胞有没有抱团。然后从底部敲击，使之分散。
3、如果实验室有平板振荡器的话，我建议用这个仪器稍振荡一下，效果不错，就是振幅小，频率高的那种。
4、细胞要尽量打散，大部分呈单个状态。离心后，要充分悬浮！还有转移到六孔板后，是要晃得！晃的时候最好不要让那个细胞液转圈，不然细胞就全被带到中间去了，就会不均匀！
5、一瓶细胞长满后，正常处理，在培养瓶里吹匀，然后铺6孔板，每孔2毫升，铺完之后不用观察直接用酒精棉擦拭，然后放到培养箱里，轻微的左三圈 右三圈 前三圈 后三圈。基本上24小时之后观察 每孔的细胞都会很均匀。
6、计算好所需要的全部液体量和细胞量，混匀后，加到六孔板里，六孔板按横8字型晃，显微镜下观察，如果不均匀，按上述方法再晃。如果细胞未计数直接种的话，在种六孔板的过程中，随时晃一下混匀用的瓶子，瓶子我通常是顺时针或逆时针转圈。
7、放在水平板面上先上下移动，再左右移动，每个方向5到6次，但关键的是摇完后最好直接放入培养箱中，不要再做过多的运动，例如放到镜下去看，否则很容易就又聚到中间去了。
池姜楼莲： 首先是操作前的洗手,很多人直接酒精喷一下就去实验了,其实最好的是用肥皂/香皂仔仔细细的洗手,一直到手腕,指甲缝都要洗.洗两遍是一个不错的选择.然后手上喷酒精.其次是操作者的穿着,不要因为现在是夏季,就穿短袖的白大褂...
新北区18327559924： 细胞培养中如何减少污染 - ？
池姜楼莲： 污染是细胞培养技术中面临的主要问题.某些污染的发生往往难以察觉检测,而且污染源能长期共存于培养体系中,这类染事实上大部分被人们忽视了. 培养的细胞作为个生物体,会对培养环境以及环境中的污染物作相应的反应,造成培养细胞...
新北区18327559924： 如何防止细胞培养出现污染? - ？
池姜楼莲： 是细胞状态不好死了还是污染导致的死亡 把培养箱灭菌一次 培养基重新配 细胞间多照照紫外 进去穿鞋套 反正都是自己操作注意点啦
新北区18327559924： 细胞铺板后老是聚堆,有好的方法可以处理吗? - ？
池姜楼莲： 细胞普板后老是聚堆,说明你在细胞铺板前,细胞没有摇匀,可以在桌上十字推匀,静置二十分钟.
新北区18327559924： 24孔板培养细胞的问题,很困扰,请高手指点! - ？
池姜楼莲： 博凌科为解答:吹细胞时注意不要把枪头打空,不要吸进空气,一般就不会有泡沫了,少量泡沫也不会影响很大.中间细胞多可能是由于你摇匀细胞时,板子是圆周运动的,这样细胞就会聚集到中间.最好用十字运动摇匀,注意用力均匀.
新北区18327559924： 如何把细胞铺的更均匀 - ？
池姜楼莲： 做细胞生物学实验,细胞铺板大概是最常见的一个实验了.但是有很多人不是很得要领,铺得不是均匀: 要么中间密周围稀,要么周围密中间秃顶.现分享我的实验技巧.一般 96 孔板我每孔是加 100 微升细胞悬液,从孔的左边靠近底部加入...
新北区18327559924： 植物组织培养在酒精灯火焰旁接种就能防止细胞污染吗? - ？
池姜楼莲： 不能,植物组织培养在酒精灯火焰旁不能防止细胞污染. 第一,空气中到处都有细菌,组织培养的用的器具也有细菌.,双手也没消毒.可污染的环节步骤太多了. 第二,还是要在超净工作台上操作组织培养,严格紫外线灭菌,严格过滤通风,才能完成组织培养.
新北区18327559924： 我养的细胞是不是被污染了 - ？
池姜楼莲： 不一定是,有的培养皿底部是有划痕的,所以你可能看到的是划痕..有一方法可以判断是不是污染,你继续培养两天,如果发现丝状物越来越多就说明是真菌污染.注意和其他的细胞分开培养..若不是,说明不是污染.
新北区18327559924： 细胞培养中如何避免霉菌污染? - ？
池姜楼莲： 1、实验前对培养皿(干热灭菌)、培养基消毒(高压蒸汽灭菌) 2、保证实验室的无菌环境
