放射标记物是怎样制备的

如何制备放射性核素标记抗原抗体~

脱方法是根据用合适的配体处理抗原抗体柱引起变构,这种方法仅适用于某些蛋白.这些变构改变包括用ATP或小的辅助因子处理抗原而引起的构象改变.识别这些构象改变的抗体,或能与构象改变而解离的蛋白—蛋白复合物相结合的抗体可以用于制备各种纯的蛋白.由于这类洗脱方法因抗原不同而异,在此不作详细介绍.但可以提供一种有效的和独特的洗脱方法

核酸标记物几类
1．核素标记物
放射性核素目前应用类探针标记物.放射性核素灵敏度极高,检测10-14～10-18克物质,适条件测品少于1000核酸含量.用标记核酸探针核素32P、3H、35S,Southern印迹杂交P用.应根据标记同选择相应标记位核素,般情况,数标记需要a—32P,5,末端标记必须r-32P.
　　　　2．非放射性标记物
,科家致力于寻找些安全、靠、灵敏度高物质代替放射性核素用于核酸杂交,并取定进展,部非放射性标记物已内外逐步推广使用.其优点放射性污染,较间存放,更便于临床诊断等面应用.类非放射性标记物缺点灵敏度及特异性都太高.根据其检测,非核素标记物4类.
　　(1)半抗原：物素(biotin)高辛(DIG)都半抗原,利用些半抗原抗体进行免疫检测,根据显色反应检测杂交信号.两种物质目前使用较普遍非核素标记物.
　　(2)配体：物素仅半抗原,故用物素与亲素反应进行杂交信号检测.
　　(3)荧光素：FITC、罗丹明类等,发紫荧光进行观察,主要适用于细胞原位杂交.
　　(4)化发光探针：些标记物与某种物质反应产化发光现象,通化发光像核素直接使X线胶片乳胶颗粒光.化发光探针能今非核素标记物研究主要向.

放射性测量
放射性同位素发出的射线与物质相互作用，会直接或间接地产生电离和激发等效应，利用这些效应，可以探测放射性的存在、放射性同位素的性质和强度。用来记录各种射线的数目，测量射线强度，分析射线能量的仪器统称为探测器（probe）。测量射线有各种不同的仪器和方法，正如麦凯在1953年所说：“每当物理学家观察到一种由原子粒子引起的新效应，他都试图利用这种新效应制成一种探测器”。一般将探测器分为两大类，一是“径迹型”探测器，如照像乳胶、云室、气泡室、火花室、电介质粒子探测器和光色探测器等，它们主要用于高能粒子物理研究领域。二是“信号型”探测器，包括电离计数器，正比计数器，盖革计数管，闪烁计数器，半导体计数器和契伦科夫计数器等，这些信号型探测器在低能核物理、辐射化学、生物学、生物化学和分子生物学以及地质学等领域越来越得到广泛地应用，尤其是闪烁计数器是生物化学和分子生物学研究中的必备仪器之一。

一、闪烁型探测器

1.探测原理
闪烁型探测器由闪烁体，光电倍增管，电源和放大器－分析器－定标器系统组成，现代闪烁探测器往往配备有计算机系统来处理测量结果。当射线通过闪烁体时，闪烁体被射线电离、激发，并发出一定波长的光，这些光子射到光电倍增管的光阴极上发生光电效应而释放出电子，电子流经电倍增管多级阴极线路逐级放大后或为电脉冲，输入电子线路部分，而后由定标器记录下来。光阴极产生的电子数量与照射到它上面的光子数量成正比例，即放射性同位素的量越多，在闪烁体上引起闪光次数就越多，从而仪器记录的脉冲次数就越多。测量的结果可用计数率，即射线每分钟的计数次数（简写为cpm）表示，现代计数装置通常可以同时给出衰变率，即射线每分钟的衰变次数（简写dpm）、计数效率（E）、测量误差等数据，闪烁探测器是近几年来发展较快，应用最广泛的核探测器，它的核心结构之一是闪烁体。闪烁体在很大程度上决定了一台计数器的质量。

2.闪烁体
闪烁体是一类能吸收能量，并能在大约一微秒或更短的时间内把所吸收的一部分能量以光的形式再发射出来的物质。闪烁体分为无机闪烁体和有机闪烁体两大类，闪烁体必需具备的性能是：对自身发射的光子应是高度透明的。闪烁体吸收它自己发射的一部分光子所占的比例随闪烁材料而变化。无机闪烁体[如Nal（Tl）,ZnS（Ag）]几乎是100％透明的，有机闪烁体（如蒽，塑料闪烁体，液体闪烁体）一般来说透明性较差。现在常使用的几种闪烁体是：⑴无机晶体，主要是含杂质或不含杂质的碱金属碘化物；⑵有机晶体，在都是未取代的或取代的芳香碳氢化合物；⑶液态的有机溶液，即液体闪烁体；⑷塑料溶液中的有机溶液，即固溶闪烁体。

3.光电倍增管
它是闪烁探测器的最重要部件之一。其组成成份是光阴极和倍增电极，光阴极的作用是将闪烁体的光信号转换成电信号，倍增电极则充当一个放大倍数大于106的放大器，光阴极上产生的电子经加速作用飞到倍增电极上，每个倍增电极上均发生电子的倍增现象，倍增极的培增系数与所加电压成正比例，所以光电倍增管的供电电源必须非常稳定，保证倍增系数的变化最小，在没有入射的射线时，光电倍增管自身由于热发射而产生的电子倍增称为暗电流。用光电倍增管探测低能核辐射时，必须减小暗电流。保持测量空间环境内较低的室温，是减小光电倍培管暗电流的有效方法。

二、晶体闪烁计数（crystal scintillation counting）

1.探测原理
γ射线不同于α和β粒子，它类似于光和其它电磁辐射，在与物质作用时不直接产生电离，而是按下述三种机制之一被吸收：光电效应，康谱顿效应和生成电子对。在光电效应中，每个光子将保持它的全部能量直到与吸收物质内原子的一个轨道电子相互作用为止。在此过程中，光子把全部能量给予电子，电子以高速度射出，光子就不再存在，发射出的电子称为光电子，光电子按β粒子同样的方式，将其能量电离，其它原子则消耗掉。在康普顿效应中，能量为hv的入射γ光子，与吸收物质内原子的一个轨道电子相互作用。在该过程中，光子把它的能量给予轨道电子，使电子射出，随后带有较小能量hv'的光子按能量和动量两者都守恒的形式被“散射”。射出的电子称为反冲电子，又叫康普顿电子。康普顿电子象光电效应中的情况一样，按与β粒子相同的方式消散它的能量，散射光子进一步通过光电或康普顿过程被吸收。电子对生成时，某些入射光子能量按照爱因斯坦方程转化为质量：E＝mc2 式中E为er（乐格）表示的能量，m为以g表示的质量，c为光速，以cm／s为单位，入射的γ光子在吸收物质的一个原子的核场中以一种未知的方式湮灭，随后产生两个粒子，一个负电子和一个正电子，正电子只存在一个很短的时间，一旦它减慢，它就被吸收物质中的一个电子所中和，这一湮灭过程导致一对γ光子的产生，其每一个光子能量为0.51MeV,最终通过光电效应康普顿效应吸收。γ射线由于没有质量，具有很强的穿透性，而且最易被高电子密度的物质所吸收，如铅。具有高原子序数Z的原子直接与高电子密度有关。就探测器而言，某些无机盐能有效地吸收γ光子，发射出强度正比于所吸收γ射线能量的光子。例如，铊激活的碘化钠，由于碘原子的原子序数Z高，并且有较高的密度（比重3.67），而且每吸收单位能量的光子产额高，晶体的光透性也好，用来探测γ射线，效率较高。

2.探测装置
一个供探测γ光子用的固体晶体装置包括一个“密闭的”铊激活碘化钠晶体，安放在光电倍增管的表面上。“密闭的”晶体上是一块固态圆筒状的铊激活碘化钠，其顶部和四周都是用铝层包裹以避免光和湿气，因为碘化钠晶体易吸潮，为改善反射性，碘化钠晶体用一玻璃片密封，并同光电倍增管的表面直接接触，其间加些硅油以达到光学匹配，整个装置是不透光的。γ射线易于穿透晶体外表的铝层，然后被高效的晶体所吸收，晶体发射出其能量与入射γ射线能量成比例的可见光。接着，光电倍增管将可见光能量转换为电脉冲，各种能量转换过程（即从γ光子发射直到产生一个电脉冲）成比例的性质，以及γ光子的吸收性质，保证γ放射性同位素可通过晶体闪烁得以计数，并定量。晶体γ计数器通常设计成既能有效地探测光电效应，又能有效地探测康普顿效应。但探测效应随着光子能量的增大而减小，对于大多数市售γ计数器所用碘化钠晶体的尺寸来说，光电效应在低光子能量，例如在低于400keV时占主要地位，而在1MeV附近即以康普顿效应为主。在这两种能量之间，两种效应几乎以相等的频率发生，由于所用的晶体尺寸较小，难以探测到电子对的生成。另外，在塑料溶剂（如聚乙烯甲苯）中加入闪烁体（如POPOP或TP），做成片状，可用来探测能量较高的β射线，如32P放出的1.71MeV的高能量β射线。最早使用的硫化锌晶体较薄，内含微量的微量的银作为激活剂，可用来探测α射线。

3.晶体闪烁计数的定性、定量分析
放射性同位素铬主要按电子俘获方式衰变，其半衰期为27.8天，由于电子俘获，原子的原子序数减少1，因而变成一种钒的同位素，按电子俘获方式衰变至基态钒发生的频率为91％，并导致随后发射－5keV的弱X射线，此X射线一般难以探测，因为从样品中出来的 X射线在其能穿入碘化钠晶体之前已被吸收掉了。51Cr有9％的机会通过电子俘获衰变到钒的一种受激核态，并立刻通过发射－320keV的γ射线衰变至稳定的基态，这种γ射线易于探测。用晶体闪烁计数器来观察51Cr，在320keV处观察到一个尖锐的峰，称为光电峰，这是γ光子能量以光电效应损耗的结果，但并非所有能量都以此过程损耗，所以在较低能量时光子能量由于康普顿效应损耗而出现一连串较宽不明显的峰，从光电峰下到谷的对侧称为康普顿边缘。能量低于康普顿区的扩散峰，是由于γ射线对吸收物质的反散射引起的，散射光子的能量低。各种γ射线放射性同位素都有其特征的光电峰，利用特征光电峰，可对各种γ射线放射性同位素进行定性和鉴别。对各种样品的γ射线计数测量是将测得的计数率与总放射性强度或标准源的计数率进行比较，可以算出样品放射性占总放射性或标准源的百分比，从而获得样品放射性强度。

4.仪器性能的评价
晶体闪烁计数器现在基本都做成井型或圆柱型，用碘化钠（铊）作为闪烁体，探测γ射线，所以又把探测γ射线的晶体闪烁计数器称为 γ计数器（γ－counte-r）。γ计数器的性能一般是根据其对137Cs的662keV光电峰的分辩能力而加以比较的，探测系统的分辩率是一光电峰展宽程度的量度，定义为最大峰高的一半处的峰宽度（用keV为单位）除以该光电峰的最大脉冲高度（用keV为单位）再乘以100。如果光电倍增管工作在最佳状态时，分辩率能达到7％。但是，通常的井形晶体计数器由于光学性质较差，其分辩率也较差，其分辩率值约为12％。γ射线能量越高，光电峰的分辩率也会有所改善。

三、液体闪烁计数（Liquifd scintillation counting）

液体闪烁计数所用的闪烁体是液态，即将闪烁体溶解在适当的溶液中，配制成为闪烁液，并将待测放射性物质放在闪烁液中进行测量。应用液体闪烁计数可达到4π立体角的优越几何测量条件，而且源的自吸收也可以忽略，对于能量低，射程短、易被空气和其它物质吸收的α射线和低能β射线（如3H和14C），有较高的探测效率，液体闪烁计数器是α射线和低能β射线的首选测量仪器。

1.探测机理
闪烁液产生光子的过程是，从放射源发出的射线能理，首先被溶剂分子吸收，使溶剂分子激发。这种激发能量在溶剂内传播时，即传递给闪烁体（溶质），引起闪烁体分子的激发，当闪烁体分子回到基态时就发射出光子，该光子透过透明的闪闪烁液及样品的瓶壁，被光电倍增管的光阴极接收，继而产生光电子并通过光电倍增管的倍增管的位增极放大，然后被阳极接收形成电脉冲，完成了放射能→光能→电能的转换。

2.闪烁液
液体闪烁计数系统作用的闪烁溶液，是指闪烁瓶中除放射性被测样品之外的其它组分，主要是有机溶剂和溶质（闪烁体），有时为了样品的制备或提高计数效率的需要，还加入其它添加剂。 ⑴溶剂：从β源放射β射线到发射能被肖阴极接收的光妇的这一系列能量转移环节中，能量转移效率是很低的，只有少部分放射能量被利用来发射光子，其中放射源与溶剂之间，能量转移效率大约为5￣10％。对溶剂的选择，主要视其对闪烁体的溶介度和将放射能转移给闪烁体的效率而定。如果以一定浓度的闪烁体在甲苯溶液中产生的脉冲高度为100％，那么，凡能产生80％以上的脉冲高度的都定为溶剂，能使脉冲高度随其浓度上升而逐渐减小的称为稀释液，而在浓度很低时就能引起脉冲高度显著下降的叫淬灭剂。在液体闪烁计数系统中，一个好的溶剂应满足下列条件：①对闪烁体的溶介度高；②对放射源的转移效率高；③对闪烁发射的光子透明度高；④在无论有无助溶剂的帮助下都可以溶介放射性样品；⑤在计数器的工作温度下来结冰；⑥能够形成均相的测量溶液。一般认为，烷基苯是最好的溶剂，如甲苯，二甲苯。此外，苯甲醚也是比较好的溶剂。另外，对于含水量较多的样品，采用1，4－二氧不作为溶剂，因为该有机化合物的极性较大，既能很好地溶介闪烁体又可溶介含水量较多的样品，能改善计数效率，缺点是价格昂贵，冰点高，久放后产生淬灭作用很强的过氧化物，必须经纯化才能使用，并应加入 0.001％的二乙基二硫代氨基甲酸钠或丁基氢氧基甲苯（BHT），
以抑制纯化的二氧六环变质。溶剂在闪烁溶液中约占99％，因此，它的纯度对闪烁液的品质是很大的影响因素。溶剂中不发光的杂质、氧和水的含量多少，都关系到淬灭程度。原则上讲，溶剂应具有闪烁纯，即不含或很少含有影响闪烁计数的淬灭成分。实际证明，“分析纯”试剂可以不经纯化而直接使用。

⑵闪烁液：在液体闪烁计数系统中，闪烁体又称荧光体，是闪烁液的溶质，它的很多，根据其荧光特性及作用，可分为两类，即第一闪烁和第二闪烁体。
①第一闪烁体：（初级闪烁体）：常用的第一闪烁体：对联三苯（TP）：化学结构 它是最早使用的闪烁体之一。它的计数率高，价格比较便宜，但是，在低温或含水溶液介度不高。2,5－二苯恶唑（PPO）：化学结构 它是目前普遍使用的闪烁体，能很好地溶介在常用的溶剂中，在含水的情况下也是如此，在甲苯中的溶介度达200克／升以上。它的化学性质稳定，价格也较便宜。但是，它的最大缺点是有明显的浓度淬灭（自身淬灭），即随着PPO在溶剂中的浓度升高，计数效率下降。2-苯基－5－（4-二苯基）－1,3,4恶唑（PBD）：化学结构为 它是已知的最有效的闪烁体之一。比PPO能耐受浓度淬灭，但是，它的溶介度低，尤其是在低温和含水样品存在时，溶介度下降更快，而且用量比PPO多两倍，价格昂贵。2-（4-t-丁基苯基）-5-（4-二苯基）－1,3,4,恶二唑（丁基－PBD）：化学结构为 它的溶介度比PBD高，其最大优点对化学淬灭和颜色淬灭不敏感，因此，可以获得较高的计数效率。 ②第二闪烁体（次级闪烁体）：第二闪烁体的主要功能是吸收第一闪烁体发射的光子后，再在较长的波段上重新发射出荧光来，并能增加光子的产额。在高浓度下第二闪烁体起着一部分与第一闪烁体相同的作用（即接受激发溶剂分子的的退激能量，并发出荧光），此外，它还能与淬灭因子竞争，从而减少了第一闪烁被淬灭的程度。在下列一种或一种以上的情况下，必须在闪烁液中加入第二闪烁体：a. 样品中含有直接淬灭第一闪烁体的化合物；b. 第一闪烁体浓度太高而引起强烈的自身淬灭，且发射的光谱范围与光电倍增管光阴及不匹配；c. 计数器的光电倍增管光阴极对于较长波长的光谱响应比较好；d. 测量的样品在近紫外区有明显的吸收。
常用的第二闪烁体有：1,4,双2（5苯基恶唑）苯（POPOP）它的溶介度小，在甲苯系统为1.2克／升，在二氧六环中为1.5克／升。溶介速度慢，通常需加热促其溶介，它是目前普遍使用的第二闪烁体。1,4双2（4－甲基－5－苯基恶唑基）-苯（DMPOPOP）：它的溶介度比POPOP大，在甲苯系列内为2.3克／升，在二氧六环内是0.8克／升，溶介速度也快，但没有POPOP的计数效率高，且需要较高的使用浓度。 此外，还有对－双（0-甲基苯乙稀基）苯，（双－MSB）和2-（4'-二联苯基）－6-苯基苯并恶唑（PBBO），几种常用的初级闪烁体的荧光波长在3460－3800埃之间，而Cs-sb型光阴极的最大光谱响应波长为4000埃左右。因此，对于Cs-Sb材料的光阴极，仅用初级闪烁体不能很好地进行能量转移，计数效率很低，加入次级闪烁体后发射光谱波长增加到4180－4300埃，使其与Cs-Sb型光阴的光谱响应得到改善，能量转移较好，计数效率提高。Cs-K-Sb型是双碱型光电倍增管，它的最大光谱响应波长比Cs-Sb型短。因此，不用次级闪烁体也可以有较好的计数效率。但是，考虑到次级体和其它功用，通常在实际工作中，往往都要使用次级闪烁体。
闪烁液中除了溶剂，闪烁体之外，有时还添加一些其它成分。为了增加闪烁液对含水样品的溶解能力，需加入助溶剂；为了改善计数效率，则加入抗淬灭剂。甲苯、二甲苯等有机溶剂极性很小，对水的溶介能力较差。当样品含水较多时，即使样品体积不大，也很难和甲苯中二甲苯互溶为透明的均相学府。有时样品的含水量虽然不大，但它的放射性水平很低，为了在较短的测量时间获得符合统计误差要求的计数往往需要增加样品的体积，这就等于增加了含水量，这样的样品也不能很好地和甲苯或二甲苯互溶，为此，要加入一定量的极性较大的有机溶剂，如甲醇，乙醇，乙二醇乙醚等，这些溶剂在非极性溶剂和水分子之间起着桥梁作用，既能和甲苯、二甲苯互溶，又能和水互溶，达到增加含水样品在闪烁液内的溶解度的目的，所以称之为助溶剂。\par 助溶剂的淬灭作用较大要限制其用量，因而，可容纳的含水量也是有限的。其中乙二醇乙醚的极性大且学淬灭作用小，是常用的助溶剂。抗淬灭剂通常用在对含水量很大的样品测量或采用二氧六环作溶剂时，因为这种闪烁液淬灭作用大，为改善计数效率，加入抗淬灭剂萘是十分重要的。萘也是一种荧光物质，它可以抵消一部分淬灭作用，但是萘不能和对联三苯合用，尤其是在甲苯、二甲苯溶剂中，否则计数效率很低。液体闪烁计数器中，闪烁液的最佳体积可以在一定范围内有所变化，吸要能获得较高的计数效率，就应该采用较少的体积，尤其对于3H样品来说，较小体积的闪烁液还可以减少本底计数（大约0.5cpm／ml闪烁液），减少样品的自吸收。如果当样品中含有淬灭剂成分时，增加闪烁液的体积，可以经稀释作用来减少淬灭。

3.探测装置
在液体闪烁计数中引用非常灵敏的光电倍增管，对于探测穿透力低的α射线和低能量的β射线（如3H，14C等）是极为重要的。使用一个光电倍增管的单光电倍增管液体闪烁计数器，由于电倍增管的热噪声及样品受光照射后发出的磷光，会有较高的本底计数，探测效率也较低。使用两个性能指标大致相同的光电倍增管，并和符合电路相连接，做成双管符合型液体闪烁计数器，符合电路只能通过由两只倍增管同时产生的信号，因而只有当两只光电倍增管在符合电路分辩时间内同时观察到的信号才被记录下来，而由热噪声或磷光产生的随机脉冲则被扣除掉，有效地降低仪器本底，提高了探测效率，系统探测效率可在50％以上。在液体闪烁计数系统中，光电倍增管阳极形成脉冲电压的大小，与阳极一次收集的电子数成线性关系。在光电倍增管放大倍数不变的情况下（取决于高压的稳定性），光阴极产生的光电子越多，最后到达阳极的电子数也越多，而光电子数取决于光子数。在正常情况下，闪烁剂分子释放的光子数与放射性同位素衰变时产生的β射线能量成正比关系。由于放射能在传递和能量转换途中，或多或少地要发生能量消耗，因此，放射能和发射的光子数之间近似地成线性关系。这说明液体闪烁计能够作能谱研究，以分析不同能量的放射性同位素，达到定性目的。例如，3H、14C
双标记样品，可通过双道液体闪烁计数器同时测定。阳极在单位时间内产生脉冲电压的数量，与闪烁瓶内放射性同位素的多少以及同位素衰变率成线性关系，与样品内的放射性强度成正比，这是液体闪烁测量的定量基础。例如，在知道液体闪烁计数器探测效率的前提下，通过对某种放射性样品进行测定，可以求得该样品中的放射性强度为多少微居里或多少贝柯勒尔。

4.双标记同位素测量的应用
液体闪烁计数器特点之一是能作双同位素分析，配备两个或三个以上独立的脉冲高度分析器的多道装置，并具有脉冲相加和线性门装置，在每种同位素的最佳计数条件下同时测量它们，就能区分发射不同能量的同位素，假定有一个含有3H和14C的样品，我们将仪器中脉冲高度分析器多道装置中的道1调3H的平衡点（最佳工作条件），道2调在14c的平衡点。3H和14C标准样品溶解的在同样的溶剂中，并采用与实验样品相同的闪烁体，首先测量空白样品，然后对实验样品和标准样品进行计数 。
为了使双标记测量获得成功，两种放射性同位素的β谱必须要有足够的差异来满足脉冲高度分析所要求的分离。在两种同位素能谱过于接近的情况下，例如14C和35S，必须首先对它们进行同位素的化学分离，然后再分别计数。在双标记测量中，较常用的成对同位素有3H和14C、3H和35S、3H和32P及14C和32P等。总之，在双同位素标记的测量中，要满足下述两个条件：第一，较高能量的同位素尽量能够在不受较低能量同位素干扰的条件下进行计数；第二，选择一个最佳条件，以对双标记样品中较低能量的同位素能进行计数。

5.液体闪烁计数样品的制备
流体闪烁测量的榈制备是很重要的操作，操作的成功与否，直接影响到计数效率。样品制备方法的选择要考虑以下四个因素：⑴所测样品的物理和化学特性，决定所用闪烁液类型和决定是否需要将样品转化为更适于测量的形式；⑵样品所含的同位素的种类，对于含3H的样品要更加注意；⑶预计的放射性水平，在样品的放射性强度低时，要求的制备方法比较严格；⑷制备过程的经济和方便，尤其在样品数量多的更为重要。其一般原则是必须使所制备的样品的放射性，能在一个短的测量时间达到适当的统计学准度，最关键的是要求样品制备过程中，尽可能地减少“淬灭”因素。

⑴均相样品的制备

脂溶性样品可直接加入甲苯、二甲苯系统的闪烁液，含水量小于3％的样品，仍应用甲苯、二甲苯系统的闪烁液，但需加入乙醇或甲醇或乙二醇乙醚等极性溶剂助溶，助溶剂与甲苯的比例通常为3:7。必需时加抵消部分淬灭作用，提高计数效率，含水量再大时，最好采用100毫升乙二醇乙醚。20毫升乙二醇，8克PPO,500毫克POPOP，150克萘，最后用二氧六环加到1升的闪烁液配方，此配方容纳水量大，效率好相当高，但需注意二氧六环易形成过氧化物，会导致化学发光的进行，所以应在避光条件下贮存，或者在贮存期间加入锌粒或其它抗氧化剂以清除过氧化物。

⑵非均相样品的制备

①乳状液计数：表面活化合物Triton X-100是广泛应用的乳化剂，其化学结构式： 它的亲水端吸引水和其它极性分子，疏水端吸引甲苯等非极性分子。乳状液的物理性能随着水分的增加而改变。当甲苯闪烁液与Triton X-100按2:1（v／v）组成的配方时，样品水分在15％以下的乳状液是透明的；随着水分的增加，就会出现两个不同的相，分相的乳状液不稳定，不能用于测量；水分继续增加，就形成稳定的乳状液，此时液体是透明的或不透明的。乳状液的分相与温度有关，在温度由17℃开始下降时，计数效率线性地增加约10％，到4－0℃之间为最大值，温度再低，计数效率不再增加，通常把乳状液首先加热到40℃，然后在无振荡的情况下冷却，在4℃保持2－4小时。溶质在有机相和水相之间的不同分布是决定乳状测量计数效率的关键，乳状液测量的效率有时会比均相测量更高，这是因为淬灭物质主要保留在水相中而不影响在有机相中发生的能量转移过程。在均相溶液中，系统中所有的成人的成份都密切地相互接触，所以任何一个淬灭作用都能表现出来。
②悬浮液测量：对于在甲苯等为基础的闪烁液中溶解度极低的无机盐等样品，可采用凝胶技术成悬浮测量液。样品经初步处理后，制成相同大小的颗粒，然后在含有凝胶剂的系统中做成悬浮液。对于悬浮液测量，下列要求是必须的：①固体物质要很好地粉碎，并要求是白色或无色的均匀粉状颗粒，以避免光的吸收；②要求样品确实不溶于闪烁液，否则溶解的与不溶解的部分有不同的计数效率，造成计数不稳定，结果不易重复。悬浮液测量的优点是样品不溶解在溶剂中，所以样品淬灭极小。在悬浮测量中作为聚胶剂 的物质有硬脂酸铝、蓖麻油的衍生物（thixin）
及二氧化硅的细颗粒（Cab-o-sil）。含3.5￣4.0％ Cab-o-sil的悬浮液，要以得到很高计数效率，Cab-o-sil还可以减少计数瓶壁对放射性吸附作用，一般制样时，往往先加Cab-o-sil，再加入放射性样品，使放射性更多地吸附在悬浮颗粒上而提高计数效率。悬浮液测量法除应用于固体无机盐的测定外，也可用于水溶液和组织匀浆，还可用来测量薄层层析的放射性，应用时只要将层析物粉碎，简单地与凝胶混合即可，如果待测物能部分地从层析支持物上被洗脱而溶于闪烁液，则此法不可使用。
③支持物测量：与悬浮液测量相似，凡不溶于闪烁液的样品，可将它放置在支持物上再浸入闪烁液中进行计数。支持物的种类很多，如纸条、滤纸、玻璃纤维滤纸及醋酸纤维素膜片等。支持物在计数瓶内的位置对计数有直接影响，通常都采用平放瓶底测量，且膜片不超出闪烁液面，保持支持物和测量杯的干燥，都能获得较高的计数效率和测量重复性。支持物测量除淬灭作用小外，还有一个突出的优越性，即一次测量可以党纲较多的样品。因在同一测量瓶内，随膜片叠加数目的增加（10片之内），计数率线性增加而计数效率保持不变，这对于放射性水平低的含水样品测量非常适用。\par 在上述几种支持物中，以醋酸纤维素薄膜、玻璃纤维滤纸的效果优于普通滤纸，因为普通滤纸对光子传播几乎是不透明的，所以计数效率很低。

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旗晏西比： 选定放射性标记剂的比活度λqδ的值必须足够大,以保证实验所需要的灵敏度,而又要尽可能地小,使得在该实验条件下辐射自分解可忽略.一般情形是根据实验目的和实验周期长短,来选择具有合适的衰变方式,辐射类型和半衰期,且放射毒...

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旗晏西比： 细菌是将细菌接种在含某种示踪元素(一般是N15)的培养基上培养, 植物的话一般标记氧元素:用O18标记的水培养;标记碳:C14标记的二氧化碳 ...... 实验中都会有相应的标记物药品,只要注意如何表述、操作就行.

新邱区15073495712： 放射性物质怎么制取 - ？
旗晏西比： 放射性是物质自身性质,一是通过提取,二是通过中子对撞改变其原子本身稳定性

新邱区15073495712： 一般肠道运动通过能力裣查要如何做? ？
旗晏西比： 肠道运动通过能力裣查:(1) 不透X线标记物检测肠道通过时间:让患者服用不透X线的钡条或钡囊,利 用腹部平片的骨性标志,监测不同时段、不同肠段钡条或钡囊的...

新邱区15073495712： 目前放射免疫分析分离结合与游离标记物的方法是什么?目前放射免疫分 ？
旗晏西比： 第二抗体沉淀法 RIA反应结束时,加入二抗,使其形成抗原-一抗-二抗的双抗体复合物.同时加入一定量的与一抗同种动物的血清或IgG,使其与二抗形成较大量的可见沉淀物,与双抗体复合物共沉淀.离心分离结合与游离标记物.聚乙二醇(PEG)沉淀法 PEG能非特异地沉淀抗原抗体复合物等大分子蛋白质,而不沉淀小分子抗原.PR试剂法 它是将二抗先与PEG按一定比例混合成悬液,将二抗法和PEG法沉淀原理相结合的方法.活性炭吸附法 活性炭可吸附小分子游离抗原或半抗,而大分子蛋白则留在溶液中.在抗原抗体反应后,加入活性炭颗粒,使游离的抗原吸附到颗粒上,再离心使颗粒沉淀,上清液含有标记抗原抗体复合物供测定.

新邱区15073495712： 6、制备放射性标记化合物最主要方法是 - 上学吧普法考试？
旗晏西比： 没有制备,只有提纯.提纯设备很复杂.涉及到高雯蓉蓉设备和离心机等.个人或小型单位不具备实力.放射性元素没有像普通的单质或化合物那样超过99%纯净的,超过50%就算纯的.保存用防辐射容器

新邱区15073495712： 同位素标记法做实验,我怎么搞不懂,是什么意思啊 - ？
旗晏西比： 同位素标记法是利用质子数相同中子数不同的同种物质进行试验 因为质子数相同,所以电子数也相同,因此反应的性质是不变的;但是由于中子数不同,那么同位素就会有一定的放射性,可以由探测仪器追踪到,研究反应过程

新邱区15073495712： 荧光标记核酸引物是怎么做的 - ？
旗晏西比： 荧光标记引物直接去公司合成即可.荧光标记物有很多种,能够产生出不同颜色的信号,所以你需要根据实验要求选择一下.