提高液相色谱中柱效的有效途径有哪些

作者&投稿:集珊 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
提高液相色谱中柱效的有效途径有哪些?~

1、可以进行一下操作
(1)、将色谱柱头尾调换,反冲色谱柱。
(2)、将柱子清洗:甲醇--乙腈--异丙醇--氯仿--环己烷--氯仿--异丙醇--乙腈--甲醇,每种溶剂冲洗30min~40min。
(3)、酸碱冲洗柱子:(假设之前是中性流动相)含0.5%甲酸的甲醇水9010冲洗40min--甲醇水9010冲洗40min--含0.5%氨水的甲醇水9010冲洗40min,(或先碱后酸)。
2、平时使用过程中多注意其使用事项也是有助于仪器性能的使用的

色谱柱的保存
(1)反相色谱柱每天实验后的保养: 使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
(2)长期保存色谱柱: 如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度最好是室温。
色谱柱的再生
因为色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现拖尾峰(tailing peak)。前者少见。>色谱峰高降低,基线的两个交点间的距离。W=4σ>峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说可能是柱效下降。
(1)反相柱的再生:依次采用20-30倍的色谱柱体积的甲醇:水=10:90 (V/V),乙腈,异丙醇作为流动相冲洗色谱柱,完成后再以相反顺序冲洗色谱柱。
(2)正相柱的再生:依次以20-30倍色谱柱的体积的正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇作为流动相冲洗色谱柱,然后再以相反的顺序冲洗色谱柱。要注意上述溶剂必须严格脱水。
3、色谱柱在使用过程中易出现的问题和解决办法 色谱柱在使用中最常见的问题就是柱压升高,如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加,属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高(系统管路堵塞及压力传感器故障除外),以下列举了部分常见原因及解决办法:
(1)色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染; 解决方法:如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染,可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力,或者卸下色谱柱头,将其放在10%的稀硝酸内超声清洗10分钟,后再用纯水超声。

液相色谱柱的柱效能是评价液相色谱性能的一项重要指标,混合物能否在液相色谱柱中得到分离,除取决于选择合适的固定相外,还与色谱操作条件及液相色谱柱的装填状况等因素有关。在一定的色谱操作条件下,液相色谱柱的柱效可用理论塔板数或理论塔板高度来衡量。要提高液相色谱柱的效率可从以下几方面入手。
(1)降低移动相的流速,但会使分析时间延长。
(2)减少固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。
(3)减小固定相的颗粒度,但不能过分,过分后色谱柱的渗透率也会减小。
(4)选用低粘度的移动相,以利于快速传质,但却不利于多组份分析。
(5)适当提高柱温,可降低移动相的粘度,但柱效和分离度也随之降低。
(6)尽量减小停滞移动相的体积,但却加快了移动相的流速。
从以上介绍可看出,在色谱分析过程中,各种因素是互相联系和制约的。只有通过对柱效值的跟踪测算,对自己分析方法不断的研究和实践,才能找到最佳的工作条件。 如果需要更换色谱柱或者咨询色谱柱技术方面。搜索成都摩尔科学仪器有限公司

提高液相色谱中柱效的有效途径有:减小填料粒径,增加色谱柱长,使用尽量大小均一、外型规则的填料,使用合适的流速,使用合适的流动相组成,使用合适的固定相。

高效液相色谱的工作方式:

在柱层析中,溶剂在重力作用下滴入装有吸附剂的色谱柱中。高效液相色谱是一种改进的柱色谱。在高达400个大气压的高压下,泵输送溶剂通过色谱柱。柱吸附剂或固定相通常是由固体颗粒(如二氧化硅或聚合物)制成的颗粒材料。

与柱色谱相比,利用泵输送,不仅可以快速分析,而且可以使用更小的颗粒作为柱填料。粒子越小,其表面积更大,通过固定相与流动相及样品组分之间的相互作用,可以更好地实现混合物中各组分分离。流动相通常是溶剂(如水、乙腈、甲醇)的混合物。

混合物的组分由于与吸收剂颗粒的相互作用的程度不同而彼此分离,在此过程中不同组分的洗脱速率不同,从而导致组分流出色谱柱时分离。与柱色谱相比,高效液相色谱自动化程度高,灵敏度高。

扩展资料:

液相色谱系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数;

在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。



要提高液相色谱效率几面入手
  
  (1)降低移相流速,使析间延
  
  (2)减少固定相量,色谱柱品负载量随减
  
  (3)减固定相颗粒度,能,色谱柱渗透率减
  
  (4)选用低粘度移相,利于快速传质,却利于组份析
  
  (5)适提高柱温,降低移相粘度,柱效离度随降低
  
  (6)尽量减停滞移相体积,却加快移相流速
  
  介绍看,色谱析程,各种素互相联系制约通
  
  柱效值跟踪测算,自析断研究实践,才能找佳工作条件

要改善条件介绍几种供参考
1、色谱柱色谱柱使用间柱效降低影响离度改善更换新色谱柱已经新色谱柱离度采用更些色谱柱增加离度
2、流相调节通调节流相各组比例使流相极性发变化离效率要针要检测具体情况进行析确定
3、改变柱温相同条件升高柱温增色谱柱离能力提高离度

扩散效应。


高效液相色谱 rrt 什么意思
在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。高效液相色谱法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用。分为六类:1、吸附色谱法 2、分配色谱法 3、离子色谱法 4、分子排阻色谱法 5、键合相色谱法 6、亲和色谱法 ...

高效液相色谱中理论塔板数的计算方法是什么?
N为常量时,W随tR成正比例变化。在一张多组分色谱图上,如果各组份含量相当,则后洗脱的峰比前面的峰要逐渐加宽,峰高则逐渐降低。用半峰宽计算理论塔板数比用峰宽计算更为方便和常用,因为半峰宽更容易准确测定,尤其是对稍有拖尾的峰。N与柱长成正比,柱越长,N越大。用N表示柱效时应注明柱...

高效液相色谱仪原理及操作步骤
高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送,色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万),同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。 扩展资料 高效液相色谱仪配置高压二元泵或者低压四...

高效液相和超高效液相的区别在那
大家知道,色谱柱填料粒径越小,理论塔板数就越高,也就是说柱效越高,所以之前色谱柱发展过程中是追求越来越低的填料粒径的,但是高效液相能够承受的最大柱压只有400bar所以低于3um的柱子一般是要降低流速来降低柱压才能够使用的,但是这样却会降低分离的效率,所以超高效液相色谱应运而生,超高的耐压...

高效液相色谱换溶剂对结果有什么影响
在高效液相色谱(HPLC)中,变换溶剂时,直接将一种互不相溶的溶剂替换前一种溶剂可能会对色谱行为产生一些不利影响。以下是对这些影响的简要讨论。基线噪声和基线漂移:直接更换溶剂可能会导致色谱图上的基线噪声增加和基线漂移。这是因为新旧溶剂之间的不相溶性可能会产生微小的液滴,这些液滴在色谱柱中...

高效液相的原理,最好详细点
高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9´107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。特点 1.高压:液相...

试比较气相色谱法和高效液相色谱法的特点。
高效液相色谱的流动相不仅起运载作用,而且流动相对组分有一定的亲和力,分离过程的实现是组分、流动相和固定相三者间相互作用的结果,主要通过改变流动相的种类和组成来提高分离的选择性。(3)其他方面。气相色谱法可以使用较长的毛细管柱来获得总的高柱效,柱外效应对柱效的影响较小。与气相色谱比较,高效...

高效液相色谱仪为什么称为高效,效率靠什么参数决定
液相的色谱柱虽然短,一般才5-30厘米之间,但其柱效有时能达到20000,而相对于气相色谱的动辄几十米长的柱子来说,柱效比气相还高,所以也叫高效液相色谱。 柱效一般用理论塔板数来表示,塔板数越高柱效越高。柱效取决于固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速...

液相色谱法能否增加柱长提高柱效?
可以适当增加,柱长增加,柱压也增加,一旦超过填料的承受限度,色谱柱就出问题了,因此增加柱长有极限。如果是解决分离度不好的问题,两个分基本分开,想分得更好,可以。如果根本分不开,还是通过色谱系统的调整解决问题,单纯增加柱长不起作用。

高效液相色谱中分离度为0是什么原因
高效液相色谱中分离度为0是什么原因 要改善的条件很多,介绍几种供参考 1、色谱柱,色谱柱使用时间长了,柱效会降低,会影响到分离度的,改善方法是更换新的色谱柱。如果已经是新的色谱柱了,分离度还不好,那可以采用更长一些的色谱柱,也会增加分离度。2、流动相的调节,通过调节流动相中各组分的...

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鄢念咳喘: 要提高液相色谱效率几面入手(1)降低移相流速,使析间延(2)减少固定相量,色谱柱品负载量随减(3)减固定相颗粒度,能,色谱柱渗透率减(4)选用低粘度移相,利于快速传质,却利于组份析(5)适提高柱温,降低移相粘度,柱效离度随降低(6)尽量减停滞移相体积,却加快移相流速介绍看,色谱析程,各种素互相联系制约通柱效值跟踪测算,自析断研究实践,才能找佳工作条件

剑川县17767611479: 在液相色谱中,提高柱效的途径有哪些?其中最有效的途径是什么 -
鄢念咳喘: 提高柱温最有效,用有机溶剂处理可以提高一些,不过感觉柱效是天生的, 有些色谱柱就是不行

剑川县17767611479: 提高高效液相色谱柱效的方法
鄢念咳喘: 提高液相色谱柱效的方法有:改进柱填料、改变色谱条件(温度和流速)等. 主要还是改进柱子本身的方法最为主要,不过这个色谱柱生产商考虑的肯定更多,我做QC的就不用管那么多了. 另外,如果柱效下降,保存之后换下来放置一段时间也可以恢复一部分柱效.

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