高效液相色谱仪为什么称为高效,效率靠什么参数决定
一部分凭借经验,一部分凭借参考该检测项目的其他文献或者其他方法。用多了,就凭经验就可以了。但是检测器的参数,如FLD的波长,一般需要查阅文献或者其他的方法。很多时候,即使是标准里给你了条件,你也不能完全按照它的条件设置你的仪器参数。因为标准里用的仪器品牌可能跟你的不同,那么在建立参数的时候只能参考,不能照搬照抄。所以,每个检测项目的仪器参数,都需要自己根据手头的资源进行摸索,优化的。尽量保证你的化合物峰形正常,保留时间不能太靠前也不要太靠后(4分钟-10分钟比较理想)。如果是多个化合物要保证分离度足够。同时还要保证一些非目标化合物峰对化合物峰的干扰小。你的问题涉及的东西比较多,不是三言两语就能完全说明白的
需要根据你的方法标准设置流动相流速,流动性的组成,或者设置流动相的梯度洗涤,进样口进样量的设置,泵温,还有就是设置检测器的波长!
高效液相色谱仪叫HPLC,其实最初液相色谱发展受制于压力问题,一直不好解决,所以液相虽然在20世纪初就已经有所应用但直到八九十年代才广泛发展的原因了,而那个时候后来居上的气相色谱早已经很成熟了。当然后来的液相解决了高压问题,发展特别迅速,使得液相能检测有机物中70-80的物质,HPLC也叫高压液相色谱。其流动相的梯度变化和多种检测器的应用也是液相能广泛应用的提供条件。液相的色谱柱虽然短,一般才5-30厘米之间,但其柱效有时能达到20000,而相对于气相色谱的动辄几十米长的柱子来说,柱效比气相还高,所以也叫高效液相色谱。 柱效一般用理论塔板数来表示,塔板数越高柱效越高。柱效取决于固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。如果峰形对称并符合正态分布,N可近似表示为: 理论塔板数=5.54(保留时间/半高峰宽)2 (2是平方)因为有很高的分离效率,分离效率不止是理论塔板数,还包括分离样品的时间长短 ,因为比普通液相色谱、离子色谱、气相色谱等的理论塔板数高 分离速度快,所以称其为高效液相,
超高效液相就是分离效率比高效液相还要高,这主要是因为色谱柱填料颗粒直径要更小,分离系统压力更高所决定。
为什么要对高效液相色谱仪定量?
高效液相色谱仪定量分析是一种相对分析,是通过对已知含量的物质和待测样品在相同条件下进行分析,得到数据后进行对照计算,推算出含量的。题中已经知道未知含量物质的峰面积后,还无法得到含量,如果需要得到绝对含量数据,还需要将一个已知含量的样品(标准样品)在同一条件下进行一次分析,得到相同物质组份...
高效液相色谱仪为什么称为高效
高效液相色谱仪叫HPLC,其实最初液相色谱发展受制于压力问题,一直不好解决,所以液相虽然在20世纪初就已经有所应用但直到八九十年代才广泛发展的原因了,而那个时候后来居上的气相色谱早已经很成熟了。当然后来的液相解决了高压问题,发展特别迅速,使得液相能检测有机物中70-80的物质,HPLC也叫高压液相...
高效液相色谱仪做标准曲线时为什么要稀释?
做标准曲线首先有标准物质,然后有一个曲线的浓度范围。比如说,标准物质X,浓度是0.1mg\/ml-2mg\/ml。配制样品的时候,取X适量,配制成浓度为10mg\/ml的母液,然后逐级稀释,配制成浓度为0.1mg\/ml,0.2mg\/m,0.5mg\/ml,1.0mg\/ml,2.0mg\/ml的样品,然后按照浓度由低到高的顺序进样分析。(由...
液相色谱仪的工作原理
高效液相色谱仪工作原理;高压泵将贮液罐的流动相经进样器送入色谱柱中,然后从检测器的出口流出,这时整个系统就被流动相充满。当欲分离样品从进样器进入时,流经进样器的流动相将其带入色谱柱中进行分离,分离后不同组分依先后顺序进入检测器,记录仪将进入检测器的信号记录下来,得到液相色谱图。...
液相色谱仪工作原理
详情请查看视频回答
高效液相色谱仪所对应的检测器为什么检测器
高效液相色谱仪所对应的检测器有紫外吸收检测器、荧光检测器、化学发光检测器等。现分述如下:1.紫外可见吸收检测器 紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器之一,几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。其特点是灵敏度较高,线性范围宽,噪声低,适用于梯度洗脱,对强吸收物质检测限可达1n...
安捷伦高效液相色谱仪为什么不能用于正相
不支持。安捷伦高效液相色谱仪的泵和检测器是专门为反相设计的,不支持操作正相色谱柱。安捷伦高效液相色谱仪是一种用于化学、畜牧、兽医科学、化学工程、食品科学技术领域的分析仪器,于2017年5月18日启用。
液相色谱仪工作原理
一、原理:高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论,色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成,造成的结果就是色谱柱的柱效远远高于原始的经典液相色谐,它柱子使用后还能具有高度灵敏度检测器。能够对流出来的分析物进行连续检测。色谱仪是利用混合物各组分在固定相和流动相...
液相色谱仪原理
、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
为什么作为高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤,脱气
使仪器正常工作。作为高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤,脱气是因为过滤可以除去溶剂中的机械杂质,脱气可以防止空气进入色谱柱,使检测器噪声减小,基线稳定,使仪器正常工作。
花欧太得: 高效液相色谱仪叫HPLC,其实最初液相色谱发展受制于压力问题,一直不好解决,所以液相虽然在20世纪初就已经有所应用但直到八九十年代才广泛发展的原因了,而那个时候后来居上的气相色谱早已经很成熟了.当然后来的液相解决了高压...
清水河县19696702933: 高效液相色谱仪器的结构及其各部分作用 - ?
花欧太得: 1、溶剂输送系统;储液器,用来贮存数量足够、符合要求的流动相.配有溶剂过滤器,以防止流动相中的颗粒进入泵内.脱气器,脱气的目的是为了防止流动相从色谱柱内流出时释放出气泡进入检测器,从而引起噪声,不能正常检测. 输液泵...
清水河县19696702933: 高效液相色谱仪与气相色谱仪有什么异同 - ?
花欧太得: 液相色谱仪与气相色谱仪的区别:1.分析对象的区别GC:适于能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品;但对高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及高聚物的样品,尤其对大多数生化样品不可检测占有机物的20%HPLC:适...
清水河县19696702933: 什么叫高效液相 - ?
花欧太得: 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从...
清水河县19696702933: 高效液相色谱仪的特点? - ?
花欧太得: 1.进样系统 一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的.这对提高分析样品的重复性是有益的. 2.输液系统 该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分.高压泵的一般压强为l.47~4.4X107Pa,流速可调且稳定...
清水河县19696702933: 高效液相色谱方法及应用的目录 - ?
花欧太得: 第一章 绪论 第一节 高效液相色谱法的特点 一、与经典液相(柱)色谱法比较 二、与气相色谱法比较 三、高效液相色谱法的优点 四、高效液相色谱方法发展简介 第二节 高效液相色谱法的分类 一、按溶质在两相分离过程的物理化学原理分类 二...
清水河县19696702933: 为什么要学会高效液相色谱 仪的使用 - ?
花欧太得: 在现代分析手段中,非常常用的一个检测仪器.可以比较快速的同时检测一些物质.可以对物质定性定量的分析,下面是HPLC的一些特点: “三高一广一快”①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱...
清水河县19696702933: 高效液相色谱仪器原理是什么? - ?
花欧太得: 高效液相色谱仪主要的组成部件为高压输液泵、进样装置、色谱柱、检测器和色谱数据处理装置.1.高压输液泵由于高效液相色谱所使用的色谱柱一般装填小于10μm的固定相颗粒,故对流动相有较大的阻力,所以对于泵的耐压有一定的要求....
清水河县19696702933: 超高效液相色谱质谱仪能分析什么? - ?
花欧太得: 这类设备分六大类,价格高昂,使用者不多. 从你讲的来看应该是离子陉,定性的;或者是三级四极杆,定量用的. 这两类液质联用仪都是 作小分子有机化合物分析的.不是做微量元素和重金属的.
清水河县19696702933: 高效液相色谱仪主要包括哪几个部分 - ?
花欧太得: 高效液相色谱仪般由溶剂输送系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统和数据处理与记录系统组成,具体包括储液器、输液泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪或数据工作站等几部分. 其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相...