柯斯质粒载体的介绍
穿梭质粒是指可以在多种宿主下复制。比如说通常能够在哺乳动物，酵母或者其他细菌复制表达的质粒，同时可以在大肠杆菌内复制。这样利于对质粒的分子生物学操作和大量制备。
表达质粒就是指带有启动子，增强子等等，使其在宿主体内不仅仅是可以复制，还能够通过转录翻印，在宿主内表达出相应蛋白的质粒
1）利用DNA连接酶便可以将目的基因（已经剪切下来的）连接到质粒载体上
2）目的基因的获得：利用限制性内切酶（限制酶）。
这种酶具有专一性...可以识别特定的回文序列来进行剪切。
3）如果你想得到一种基因，有多种方法。
其一：鸟枪法。就是多份样品各添加一种限制酶，然后筛选。
其二：人工合成法。就是利用核苷酸拼接成mRNA然后逆转录出相应的基因外显子之后再人工添加内含子就可以了，不过这种方法必须要知道相应的基因序列。
其三：反转录法...。这个同上一个的区别就是——mRNA是提取的并不是人工合成的，后面的步骤一样。
二三种方法有一个局限——只能用于真核生物的DNA提取。
4）至于细胞因子的基因...你从大肠杆菌中弄出来质粒接上目的基因然后在放回去应该就可以了。
这些问题在中国地图出版社出版的高中生物教材选修三中有比较详细的介绍，你可以弄本来看看。
不要把生物问题放到环境学栏目下了啊~~~呵呵
1978年由collins和hohn改建的一种新型大肠杆菌克隆载体，用正常的质粒与噬菌体λ的cos位点构成。“cosmid”一词是由英文“cos site-carrying plasmid”缩写而成的，其原意是指带有粘性末端位点（cos）的质粒。所谓柯斯质粒，乃是一类由人工构建的含有λ DNA的 cos序列和质粒复制子的特殊类型的质粒载体。诸如右图所示的柯斯质粒载体pHC79，就是由λ DNΑ片段和 pBR322质粒DNA联合组成的。一般长度4~6kb。含有Amp和Tet选择标记基因。其上的cos位点可识别噬菌体外壳蛋白。凡具有cos位点的任何DNA分子只要在长度上相当于噬菌体的基因组，就可以同外壳蛋白结合而被包装成类似噬菌体λ的颗粒。因此，插入柯斯质粒载体的外源DNA片段的长度可大于40kb，从而大大增加了载体的携带能力。
柯斯质粒载体二.柯斯质粒载体的特点
首先，它具备λ噬菌体的特性。经过外源DNA的适当克隆并体外包装成噬菌体颗粒后，柯斯质粒载体能高效地转化对λ噬菌体敏感的大肠杆菌宿主细胞。其次，它具有质粒的稳定性。柯斯质粒载体拥有质粒复制功能，能在宿主细胞内复制，并在氯霉素的作用下实现进一步扩增。此外，它通常携带抗菌素抗性基因，作为重组体分...
柯斯质粒载体三.柯斯克隆
柯斯质粒载体技术，以其独特的方式在大肠杆菌细胞中实现了真核基因组DNA的大片段克隆，这一过程被称为“柯斯克隆”（cosmid cloning）。其核心原理基于λ噬菌体DNA的特殊结构。λ噬菌体的DNA两端拥有互补的单链突出序列，即粘性末端（cos位点），这些位点使得DNA分子能够以特定方式连接，形成多连体分子。λ...
柯斯质粒载体的柯斯质粒载体的特点
柯斯质粒载体具有质粒复制子，因此在寄主细胞内能够像质粒DNA一样进行复制，并且在氯霉素作用下，同样也会获得进一步的扩增。此外，柯斯质粒载体通常也都具有抗菌素抗性基因，可供作重组体分子表型选择标记。第三，具有高容量的克隆能力。柯斯质粒载体的分子仅具有一个复制起点，一两个选择记号和COS位点等三...
柯斯质粒载体四.柯斯克隆的优点
首先，柯斯载体融合了质粒和λ噬菌体的特性，这使得它在克隆外源DNA片段方面的表现极为出色，能够容纳大约45kb的DNA序列。对于构建真核生物的基因组文库来说，柯斯载体无疑是一种理想的选择，它的大容量特性使得复杂基因的整合变得更为便捷。其次，使用柯斯质粒作为克隆载体，其非重组体的克隆背景较低。...
柯斯质粒载体的介绍
所谓柯斯质粒，乃是一类由人工构建的含有λ DNA的 cos序列和质粒复制子的特殊类型的质粒载体。诸如右图所示的柯斯质粒载体pHC79，就是由λ DNΑ片段和 pBR322质粒DNA联合组成的。一般长度4~6kb。含有Amp和Tet选择标记基因。其上的cos位点可识别噬菌体外壳蛋白。凡具有cos位点的任何DNA分子只要在长度上...
载体克隆容量最大的是
黏性质粒。人们发展出比λ噬菌体载体具有更大克隆能力的新型的载体——柯斯质粒载体，也称为黏陛质粒或黏粒。普通质粒：一般不超过10kb，噬菌体：15kb左右，极限值为23kb，柯斯质粒：31～45kb，酵母人工染色体：一般为500kb，甚至1M。
载体的类型
1、噬菌体载体。2、柯斯质粒载体。3、质粒载 pBR322。4、载体（Vector） ，指在基因工程重组DNA技术中将DNA片段（目的基因）转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。在实际生活中，胰岛素就可以通过使用载体将已插入胰岛素基因片段的质粒放入大肠杆菌内...
基因克隆的基因克隆技术
。4）载体本身最好具有尽可能多的限制酶单一切点，为避开外源DNA片段中限制酶位点的干扰提供更大的选择范围。若载体上的单一酶切位点是位于检测表型的标记基因之内可造成插入失活效应，则更有利于重组子的筛选。DNA克隆常用的载体有：质粒载体（plasmid），噬菌体载体（phage），柯斯质粒载体（...
比较柯斯质粒和λ噬菌体为载体进行DNA克隆的异同。
(2)进入寄主的柯斯质粒DNA分子，按照λ噬菌体DNA的方式环化，但无法按噬菌体的方式生活，更无法形成子代噬菌体颗粒。(3)具有高容量的克隆能力：柯斯质粒本身一般只有5～7.kb左右，而它克隆外源DNA片段的极限值竞高达45kh，远远超过质粒载体及λ噬菌体载体的克隆能力。同时，由于包装限制，柯斯质粒载体的...
cosmid和phagemid的区别
cosmid 是英文 cos site-carrying plasmid 的缩写, 也称粘粒、柯斯载体。本意是带有粘性末端位点的质粒, 因此, 柯斯质粒是人工建造的的含有λDNA的cos序列和质粒复制子的特殊类型的质粒载体。这是一类用于克隆大片段DNA的载体，它是由λ噬菌体的cos（cohesive）末端及质粒（plasmid）重组而成的载体。cosmi...
毅蓉水溶：[答案] 1.噬菌体载体 噬菌体(phage)是感染细菌的一类病毒,有的噬菌体基因组较大,加入λ噬菌和T噬菌体等;有的则较小,如M13、f1、fd噬菌体等.用感染大肠杆菌的λ噬菌体改造成的载体应用最为广泛. λ噬菌体由头和尾构成,其基因组是长约49kb的...
渭滨区18572865234： 质粒载体的简介 - ？
毅蓉水溶： 质粒是小型环状DNA分子,在基因工程中作为最常用,最简单的载体,必须包括三部分:遗传标记基因,复制区,目的基因. 质粒在所有的细菌类群中都可发现,它们是独立于细菌染色体外自我复制的DNA分子.自然界中,质粒是在营养充足...
渭滨区18572865234： 将外源基因导入受体细胞时,常用的运载体有哪些 - ？
毅蓉水溶：[答案] 1、质粒载体 质粒:是真核细胞细胞核外或原核生物拟核区外能共进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器(主要指线绿体和叶绿体)中和细菌细胞拟核区以外的环状脱氧核糖核酸(DNA)分子. 2、λ噬菌体载体 λ噬菌体:是一种大肠杆菌...
渭滨区18572865234： 柯斯质粒为什么能携带45kb左右DNA片段？
毅蓉水溶： 因为该质粒具有λ噬菌体的特性:在克隆了外源片段后可在体外被包装成噬菌体颗粒,高效地感染对λ噬菌体敏感的大肠杆菌细胞.进入寄主的柯斯质粒DNA分子,按照λ噬菌体DNA的方式环化, 但无法按噬菌体的方式生活,更无法形成子代噬菌体颗粒.
渭滨区18572865234： 质粒载体、入噬菌体载体、柯斯粒载体有什么优缺点? - ？
毅蓉水溶： 质粒操作简单,但容纳的外源片段较小,一般不超过10kb 后两种操作略现复杂,但可容纳大片段的dna
渭滨区18572865234： 常用的基因工程载体有哪些?各有什么优缺点? - ？
毅蓉水溶： 1、质粒载体 pBR322 2、克隆载体 3、表达质粒载体真核细胞常见表达载体 .pCMVp-NEO-BAN载体 特点: 该真核细胞表达载体分子量为6600碱基对,主要由CMVp启动子、兔β-球蛋白基因内含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗neo基因以...
渭滨区18572865234： 柯斯质粒为什么可以防止自身发生环化作用? - ？
毅蓉水溶： 要阻止在限制酶切割后线性载体分子的自身环化作用,具体可采用以下方法: (1)用碱性磷酸酶处理限制酶酶解产生的线性载体分子.碱性磷酸酶可除去线性载体DNA 分子的5¹-磷酸,而留下3¹-羟基基团.经过碱性磷酸酶处理的线性载体分...
渭滨区18572865234： 载体是赋予什么的物质 - ？
毅蓉水溶： 载体(vector) ,能载带微量物质共同参与某种化学或物理过程的常量物质,在基因工程重组DNA技术中将DNA片段(目的基因)转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子.三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒.条件:①...
