求助:高效液相色谱的标准品配置方法

作者&投稿:霜骨 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
高效液相色谱中怎样配制20ng/ml 的标准样品~

你的标准品是什么规格的,假如95%纯度的标准品,你可以先称量个0.01g左右标准品用甲醇的溶解定容到100mL得到0.01g*95%/100mL=0.095 mg/mL=95ng/mL,然后再用甲醇稀释到20ng/mL左右,但是由于标准品可能会吸潮的缘故,需要快速称量,称量无法准确到期望的质量,并且移液器经常也无法移取期望的体积,最后不太可能准确稀释到20,最终浓度在20上下也是可以,反正只是做校正曲线,把具体的浓度做在校正曲线上就好了。

高效液相色谱标准品稀释成几个不同的浓度,说明你要用内标法计算含量。
而用内标法就要有标准曲线,稀释不同浓度就是为了绘制标准曲线。

化学工作站上一般都有绘制标准曲线的功能的,一般不需要第三方软件。
我用的是Waters和Agilent,其工作站都有这个功能,其他仪器应该也是一样。

假如95%纯度的标准品,你可以先称量个0.01g左右标准品用甲醇的溶解定容到100mL得到0.01g*95%/100mL=0.095 mg/mL=95ng/mL,然后再用甲醇稀释到20ng/mL左右,但是由于标准品可能会吸潮的缘故,需要快速称量,称量无法准确到期望的质量,并且移液器经常也无法移取期望的体积,最后不太可能准确稀释到20,最终浓度在20上下也是可以,反正只是做校正曲线,把具体的浓度做在校正曲线上就好了。


简述高效液相色谱的应用
一、分离混合物 高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。通过与试样预处理技术相配合,高效液相色谱法所达到的高分辨率和高灵敏度,可分离并同时测定性质上...

高效液相色谱法测定的有哪些方法
高效液相色谱法含量测定的方法有:内标法、外标法和加校正因子测定供试品中主成分的含量。

高效液相色谱的基本原理
高效液相色谱的基本原理如下:一、分离原理 高效液相色谱法主要利用混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配平衡进行分离。在分离过程中,流动相携带样品通过固定相,不同组分在固定相和流动相之间的分配系数不同,因此会有不同的保留时间。二、检测原理 高效液相色谱法的检测原理主要是基于色谱柱流出组分...

如何提高高效液相色谱的分离效能?
1、固定相(色谱柱填料,长短,粒径)。2、流动相(包括有机相水相配比,pH值,有机相组成,水相中缓冲盐组成,缓冲盐浓度,是否加入表面活性剂,是否加入离子对试剂等)。3、流速(改变全部出峰时间,不会改变出峰顺序和相对保留时间)。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高...

高效液相色谱法的原理是什么?
高效液相色谱法的原理是基于色谱法的一种分离和分析技术。以下是详细的解释:一、色谱法基本原理 高效液相色谱法的基础是色谱法,它利用物质在固定相和移动相之间的吸附、溶解或分离等作用,实现物质的分离。固定相是色谱柱内的填料,移动相则是流经色谱柱的液体。样品在移动相中经过色谱柱时,不同的组分...

什么是高效液相色谱仪的主要部分?
2、进样系统;进样器:是将样品送入色谱柱的装置,进样方式可以分为两种:阀进样或自动进样。比较常用的是采用自动进样器装样。3、分离系统;色谱柱:对样品进行分离,是整个色谱系统的心脏,它的质量优劣直接影响到分离的效果。4、检测系统;检测器:将色谱柱连续流出的样品组分转变成易于测量的电信...

超高效液相色谱的优缺点
故液相色谱的输液泵也相应改变成超高压的输液泵。(3)高速采样速度的灵敏检测器。(4)使用低扩散、低交叉污染自动进样器。配备了针内进样探头和压力辅助进样技术;(5)仪器整体系统优化设计。色谱工作站配备了多种软件平台,实现超高效液相分析方法与高效液相分析方法的自动转换。与传统的HPLC相比,...

高效液相色谱法
高效液相色谱法(HPLC)以其显著优势在分析领域独树一帜:高效性:柱效高达30,000 n\/m,分离速度快于传统色谱法。 高灵敏度:配备紫外检测器,可达10-9 g的检测极限,荧光检测器则可达10-11 g。 自动化:操作过程高度自动化,节省时间和人力。相较于经典色谱法(LC),HPLC在固定相、输液设备和...

高效液相色谱仪色谱
在实际操作中,待测液体通过注射进色谱柱,借助压力在固定相中移动。由于各物质与固定相的相互作用差异,它们按顺序离开色谱柱,形成不同的峰信号。通过检测器捕获这些信号,然后通过比对分析来确定样品中的化合物成分。高效液相色谱因其高效、适用于高沸点、大分子量和极性差异大的有机化合物分析,成为了...

UPLC与HPLC有哪些差别?
一、性质不同 1、UPLC UPLC,指超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)。2、HPLC HPLC,指高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \\ HPLC)。二、技术原理不同 1、UPLC 借助于HPLC(高效液相色谱)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等...

延寿县19349255508: 高效液相色谱怎么计算和制作标准混合物 -
崔良鼻炎: 混标定容到相同的体积,在此体积下计算每一标准物质需要加入的量,这个量可以根据相同检测器下的“质量/响应”比进行计算,使所有的峰高尽量一致,也可以根据方法需要进行量的计算和加入.

延寿县19349255508: 高效液相色谱仪流动相如何配置 -
崔良鼻炎: 水是纯水,这只是一个比例,也就是3比1,没有什么大的要求.配好以后,抽滤一下(用0.22微米,也有用0.25微米的膜),但我也见过不过滤的.如果有条件还是过滤一下,有的检测器对气泡还是比较敏感的,也有利于仪器的保护.

延寿县19349255508: 高效液相色谱的原理及分析方法 -
崔良鼻炎: 分析色谱图 手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定一段时间,让基线跑平,用液相针吸取称量融配脱气后的对照(含量已标定),打开定量环将液相针里的液体匀速...

延寿县19349255508: 气 、液相色谱测试方法资料有谁有啊? -
崔良鼻炎: 高效液相色谱定量分析过程可分为样品的前处理、标准品的配制、进样、色谱分离、检测及数据处理等七个步骤.一 误差的主要来源随着现在市场销售仪器自动化程度的提高,进样、色谱分离、检测及数据处理等实验环节对实验结果产生的误...

延寿县19349255508: 高效液相色谱仪流动相如何配置 -
崔良鼻炎: 水是纯水,这只是一个比例,也就是3比1,没有什么大的要求.配好以后,抽滤一...

延寿县19349255508: 介绍高效液相色谱法入门知识 -
崔良鼻炎: 楼主,您好. 高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法.注入进样阀的供试品,由流动相带入柱内,各成分在柱内被分离,并依次进入检测器,由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色...

延寿县19349255508: 如何使用液相色谱 -
崔良鼻炎: 原发布者:jing2595832液相色谱基础知识2017年04月11日一、什么是色谱色谱是一种分离工具,而不是传统意义上的分析仪器.色谱法也叫层析法,它是一种高效能的物理分离技术,将它用于分析化学并配合适当的检测手段,就成为色谱分...

延寿县19349255508: 高效液相色谱方法及应用的目录 -
崔良鼻炎: 第一章 绪论 第一节 高效液相色谱法的特点 一、与经典液相(柱)色谱法比较 二、与气相色谱法比较 三、高效液相色谱法的优点 四、高效液相色谱方法发展简介 第二节 高效液相色谱法的分类 一、按溶质在两相分离过程的物理化学原理分类 二...

延寿县19349255508: 如何建立好药物含量的高效液相色谱分析方法 -
崔良鼻炎: 1,首先必须去进行配制药物溶液前处理的工作.找出该药物的溶解性,探索出该药物的有效溶剂,使该药物能在该溶剂中充分溶解,这是药物溶液配制的前处理必然途径,也是进行高效液相色谱含量分析的首要条件.2,然后就是...

延寿县19349255508: 请教高效液相色谱仪的样品的要求 -
崔良鼻炎: 首先确定样品成分,获取该成分的纯品(对照品),将对照品溶液配制成与样品成分浓度相当的浓度(比如样品浓度是10mg/ml左右,对照品溶液就配制成10mg/ml).对照品溶液和供试品溶液分别进样,进行色谱分析,获得对照品成分峰面积与供试品溶液峰面积.此时已知对照溶液峰面积,对照溶液浓度,供试品溶液峰面积,求供试品溶液浓度,因为成分在液相中响应值不变,故对照品溶液浓度/对照品溶液峰面积=F(即响应因子)=供试品溶液浓度/供试品溶液峰面积,求得供试品溶液浓度. 如果想算含量,含量=[(浓度X稀释倍数)/供试品称样量]X100%

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