超高效液相色谱的优缺点
优点:分离效率高,选择性好,检测灵敏度高,操作自动化,应用范围广;
与气相色谱法相比具有的优点:不受试样的挥发性和热稳定性限制,应用范围广;流动相种类多,可通过流动相的优化达到高的分离效率;一般在啊室温下分析即可,不需高柱温。
缺点:分析成本高,液相色谱仪价格及日常维护费用贵,分析时间一般比气相长。
原理是一致的。
不同的地方一个是仪器,一个是色谱柱。
后者超高效液相色谱,可以缩短检测时间,节省时间,节省流动相,大大地提高了效率。
先说色谱柱,超高效液相色谱柱的粒径会更小,柱子也更短。如果说样品流过液相色谱柱的感觉是流过满是石头的管路,那么超高效液相色谱柱就是装满了沙子的管路。一般液相色谱柱的粒径是5um,超高效液相色谱柱的粒径有3.5um,3.0um,甚至有1.7um。这样样品和固定相的吸附会更加充分,分离也会很快。
再说仪器,刚才说到的满是沙子的管路,因为色谱柱的粒径减小,所以柱压会大大提高。这样普通的液相色谱仪也就不耐受这种高压了。所以超高效液相色谱仪,从泵,到各个管路都是耐高压的。这样可以充分发挥色谱柱的作用,快速分离样品。
上面一张图是高效液相色谱图,15min分析出的一个样品。下面一张图是超高效液相色谱图,同一个样品,7min就分析完毕。而且峰型更好。
超高效液相色谱法的原理与高效液相色谱法基本相同,所改变的地方有以下几点:
小颗粒、高性能微粒固定相的出现。 高效液相色谱的色谱柱,例如常见的十八烷基硅胶键合柱,它的粒径是5um,而超高效液相色谱的色谱柱,会达到3.5um,甚至1.7um。这样的孔径更加利于物质分离
(2)超高压输液泵的使用。
由于使用的色谱柱粒径减小,使用时所产生的压力也自然成倍增大。故液相色谱的输液泵也相应改变成超高压的输液泵。
(3)高速采样速度的灵敏检测器。
(4)使用低扩散、低交叉污染自动进样器。配备了针内进样探头和压力辅助进样技术;
(5)仪器整体系统优化设计。色谱工作站配备了多种软件平台,实现超高效液相分析方法与高效液相分析方法的自动转换。
与传统的HPLC相比,UPLC的速度、灵敏度及分离度分别是HPLC的9倍、3倍及1.7倍,它缩短了分析时间,同时减少了溶剂用量降低了分析成本。
不过由于实验过程中仪器内部压力过大,也会产生相对应的问题。例如泵的使用寿命会相对降低,仪器的连接部位老化速度加快,包括单向阀等部位零件容易出现问题等。
高校液相色谱分析采用归一化法定量有何优缺点
归一化法是把所有的色谱峰算总和,再把目标物与总和的色谱峰比值计算大致含量,对于含量较大的目标物定量可靠性高一些,但是由于积分的缘故,无论是积分事件的设定还是手动积分,,对低含量的测定影响很大导致误差变大数据可靠性较低,优点是效率高,操作简便,缺点就是低浓度测定不准。
气相色谱与液相色谱的异同点
11、样品处理方法不同:由于液相色谱需要在移动相中溶解样品,所以需要一定的样品处理方法来降低溶解度、去除杂质或者提取需要分离的物质。而气相色谱则通常不需要液处理,这也是其操作更加简单的一个优点。12、分析结果的重复性不同:鉴于气相色谱的结果与环境温度、压强等操作因素关系较大,其分析结果的重复...
色谱分析技术论文
色谱分析技术论文篇一 涂料检测中的现代色谱分析技术应用分析 摘 要:文章首先介绍了气相色谱法涂料检验的原理,并对检验环节中常见的问题以及解决对策进行分析。从技术的优缺点两方面进行。其次重点分析高效液相色谱法的应用原理,并对涂料检测环节的技术要点做出总结。帮助提升检测结果的准确性。关键词:...
高效液相色谱中面积归一化法的原理是什么?
在没有参照物的情况下,可采用高效液相面积归一法化法对样品含量进行标定,并可从有机溶剂(溶解残渣)、水、无机杂质(燃烧残渣)的量中扣除该方法测定的含量,即测得样品含量。高效液相色谱有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点,但也有缺点,与气相色谱相比各有所长,相互补充。三,面积...
安捷伦,日立,岛津的高效液相色谱HPLC怎么样啊?
即使出问题也容易自己解决,不像其它牌子,出问题就得求售后,相信以后仪器出问题也要由你负责解决的吧。日立的不用考虑,各方面都不好,口碑烂。我们学校购置设备都是安捷伦的,包括气相、液相。岛津的一般,还好用,但是设计没有安捷伦的好,用过的就有感觉了,尤其是工作站不好用。
硝态氮测定方法
硝态氮测定方法有分光光度法、离子选择电极法和高效液相色谱法。分光光度法是测定硝态氨水体中最常用的方法,原理是利用不同浓度的氨溶液和其他溶液,用比色杯比色,在一定波长的紫外光照射下,当硝态氮的浓度达到一定的程度时,其色度值才能达到一定的标准。离子选择电极法是测定硝态氨最常用的方法...
名词解释临床最佳给药方案
2 血药浓度分析技术:建立准确,精密,灵敏的血药浓度或其他体液浓度的测定方法, 这是治疗药物监测的前提。 常用的方法有 (1) 高效液相色谱法( HPLC法): 优点:可测定大部分药品, 且干扰小,还可测定代谢物。在新药研究中又不需要免疫试剂盒,价格相对便宜。缺点: (2) 荧光偏振免疫法(FPLA):有专用设备即TDX快速...
求岛津 安捷伦 water高效液相色谱仪的异同?如进样差别,能否绘制标准...
以岛津20A,安捷伦1200,waters2695为例,这三个仪器型号是各自品牌市场保有量最大的。waters 的机械部分是最佳的,使用寿命20年没有问题,另外两个品牌要差一些。waters相对于岛津、安捷伦的死体积要大一些,分离度和柱效不及岛津和安捷伦。安捷伦具有最小的死体积,岛津次子、waters最差。安捷伦具有较好的...
液相详细资料大全
基本介绍 中文名 :液相 外文名 :liquid phase 概念 :只包含液体额相 相关概念 :气相、固相 定义 :均匀的溶液 拼音 :yè xiàng 液相合成,举例说明,经典液相色谱,定义,分类,优缺点,液相烧结,定义与目的,机理, 液相合成 如同传统反应过程一样,液相合成(也称平行合成或者...
反向高效液相色谱法 分离,定性和定量的 原理是什么
定性通过保留时间定量通过峰面积同一物质在相同色谱条件下保留时间一致,需要对照品比对定性。同一物质的浓度与峰面积成正比例关系,所以根据对照品的浓度和峰面积,可以定量得出样品的浓度。不够详细,就这些吧! 本回答由网友推荐 举报| 评论 6 1 为您推荐: 反向高效液相色谱法 反向高效液相适用范围 正相液相色谱法...
赧绿盐酸:[答案] 1,为进行分离,可以根据样品的组分将流动相和固定相的组合最佳化.如果熟悉液相色谱,这是非常有利的,但对初学者来说,这是困难的. 2,适用样品范围广,80%的分析对象可借此法分析. 3,可以使用高效的分离柱,易于分离复杂的多组分混合...
改则县15852512179: 高效液相色谱法有哪些特点 - ?
赧绿盐酸: 高效液相色谱HPLC流程示意①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压.②高效:分离效能高.可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高...
改则县15852512179: UPLC与HPLC有哪些差别? - ?
赧绿盐酸: UPLC是超高效液相色谱.HPLC是传统的高效液相色谱. UPLC具有以下优势: 1.高分离度 根据液相色谱分离的解析度方程,解析度正比于柱效能的平方根 而根据范迪姆特(VanDeemter)色谱理论,柱效反比于系统固定相粒度大小.UPLC系统运用的固定相粒度能达到1.7μm,根据上述方程,该系统达到的效能将比5μm粒度系统高70%,而比3.5μm高40%. 2.高速度 在保证得到同样质量数据的前提下,UPLC能提供单位时间内更多的信息量.在不影响解析度的的情况下,小粒度能提供更高的分析速度,同样也能使柱长减少,根据VanDeemter色谱理论,最优流速反比于粒度大小. 3.灵敏度
改则县15852512179: 高效液相色谱仪的特点? - ?
赧绿盐酸: 1.进样系统 一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的.这对提高分析样品的重复性是有益的. 2.输液系统 该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分.高压泵的一般压强为l.47~4.4X107Pa,流速可调且稳定...
改则县15852512179: 高效液相色谱法有"四高一广"的特点有哪些 - ?
赧绿盐酸: 高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须用色谱泵对流动相加高压. 高速:分析速度快、流动相流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时. 高效:分离效能高.可选择不同的固定相和流动相搭配以达到最佳分离效果,高效液相色谱比气相色谱的分离效能高出许多倍. 高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级. 应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势.其实高效可以替换成高分离度,不过意思是一样的.
改则县15852512179: 高效液相色谱与气相色谱相比有什么优点 - ?
赧绿盐酸: 液相测定范围广:液相色谱仪可检测物质比较多,配备不同的检测器,结合衍生实验可以检测绝大多数化合物.气相色谱可检测的物质只有易挥发物质,尤其是有机物测定有很好的效果.精密度高:常做实验就可以知道,液相的精密度判定标准...
改则县15852512179: 超高效液相色谱质谱仪能分析什么? - ?
赧绿盐酸: 这类设备分六大类,价格高昂,使用者不多. 从你讲的来看应该是离子陉,定性的;或者是三级四极杆,定量用的. 这两类液质联用仪都是 作小分子有机化合物分析的.不是做微量元素和重金属的.