液相+示差检测器+测糖只在3分钟出现倒峰，怎么回事

液相色谱测试中用示差折光检测器，测试结果为倒峰，请问这是为什么？~

流动相的背景吸收高于待测物质造成的。

是，检测的时候打开样品池。
我大概给你画了一下，这图不准确，不过你可以这样理解一下：

首先是原理：一束光穿过两个通道，然后对比参比池和样品池的信号差，从而形成图谱。
那么参比池中就是你的流动相，样品池中你的流动相带着样品流过。这样就产生了信号差了。

操作，你说的操作基本是对的。打开流动相之后，让它流过参比池，然后流过样品池，就像平衡一样，每个通道平衡半个小时，让流动相充满整个通道。因为示差检测器不容易平衡，所以可以多切换两次。
然后进样的时候，把通道切换成样品池，这样进样之后流动相就可以带着样品从样品池中流过了。

另外，如果你进样的时候进的是参比池也没有关系。它的原理是信号差嘛，两个通道反了也可以形成信号差。示差检测器有一个正负的选择，反了就是所有信号都反了，色谱峰颠倒了。不用重新切换通道，只要把正负换一下接着采集就可以了。

这个我建议你把样品稀释一倍，然后看看情况。
如果倒峰还是那么大，说明它应该是溶剂峰，那么你的待测物质没有跑出来。

如果倒峰的高度也减半了，那应该这个倒峰就是你的供试品色谱峰。是这样，示差检测器比较特殊，他是有参比池和样品池两个通道，光打过去之后对比两者的折光率。只要有不同就会出峰。

那么倒峰可能是你把参比池和样品池弄错了，搞反了，所以所有的色谱峰都是反的。也有可能是样品本来就比流动相的背景吸收要低。工作站里面有一个设定，在检测器部分。把信号翻转过来就可以了。相当于以电信号为0的那条线为轴，把朝下的色谱峰做一个镜面。

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天峻县15759027866： 液相色谱仪示差检测器在3分6出峰是什么峰 - ？
右辉尿石： 虽然示差检测器没有波长,不过不同流动相,不同的色谱柱还是会有区别的.说说方法和你检测的样品吧. 按说示差检测器是不会有溶剂峰的,因为流通池和参比池的东西是一样的.除非你的溶剂不是流动相.证明是不是溶剂峰的办法就是进一针水,看看死体积.如果水的峰在3.6min后,那就是溶剂峰,如果在3.6min前,那就不是溶剂峰. 如果是杂质,那就只能从你样品类型中分析了.不是问一句什么峰就能知道的了.

天峻县15759027866： 甘露醇在液相色谱检测中会出峰吗? - ？
右辉尿石： 会出峰的.要看你的液相是什么检测器了.如果是示差检测器,很容易测试到.如果是UV检测器,可以试下190nm的波长.

天峻县15759027866： 液相响应低的会是检测器光路出问题吗 - ？
右辉尿石： 首先,你的肯定是你的检测器有问题,而不是你的样品和测定物质有问题. 一般来说有的物质就是响应值低.因为不饱和度低,或者你选择的波长不是这个物质的最大吸收. 如果说,你以前做过这个物质,响应值很高,现在再做,响应值就低下来了.那就是检测器的问题了.你可以查看一下氘灯能量,看看你的氘灯用的时间.一般来说岛津的氘灯用四五千个小时也就是差不多了,安捷伦的氘灯一两千个小时就差不多了.如果你的使用时间太长,那就是氘灯该换了.

天峻县15759027866： 如何检测食品中糖类物质的含量 - ？
右辉尿石： 第一法:高效液相色谱法,当称样量为10g时,检出限为2.0mg/100g原理:试样经处理后,用高效液相色谱氨基柱分离,示差折光检测器检测,根据蔗糖的折光指数与浓度成正比,外标单点法定量.检测仪器:高效液相色谱仪(附示差折光检测器),氨基柱第二法:酸水解法,当称样量为5g时,直接滴定法检出限为0.24g/100g原理:试样经去除蛋白质后,其中蔗糖经盐酸水解转化为还原糖,再按还原糖测定.水解前后还原糖的差值为蔗糖含量.检测仪器:酸式滴定管

天峻县15759027866： 高效液相色谱法分析一个样品为什么只出溶剂峰不出样品峰?是不是浓度太低?应该分析多大浓度的样品合适? - ？
右辉尿石： 浓度太低只是其中的一种可能性,可以提高样品浓度或加大进样量解决.还有其它的原因 1.样品在色谱柱上无保留或是保留时间太长,较大的可能是流动相不适用,改变流动相种类或比例.无保留的原因也较多,除以上原因外,也有可能是柱子选择不对,或是柱损坏. 2.紫外检测器的话,可能是波长选择的原因,可能此波长下样品的紫外吸收非常小.

天峻县15759027866： 液相出峰时间延迟是怎么回事呀? - ？
右辉尿石： 是不是因为柱子 没冲好,柱子里面有残留也会导致这种情况的朋友可以到行业内专业的网站进行交流学习! 分析测试百科网这块做得不错,气相、液相、质谱、光谱、药物分析、化学分析、食品分析.这方面的专家比较多,基本上问题都能得到解答,有问题可去那提问,网址百度搜下就有.

天峻县15759027866： 您好,我想用高效液相色谱做梨果实的蔗糖、葡萄糖、果糖、山梨醇的分离分析,请问选什么色谱柱好?？
右辉尿石： 一般检测糖要用示差检测器,紫外检测器不行,色谱柱一般选用钙型阳离子柱,waters,岛津这些牌子都可以,价格大概在12000-20000元之间.

天峻县15759027866： 液相色谱示差检测器光强度弱怎么回事 - ？
右辉尿石： 这个很难说,示差检测器不容知易平衡,很多时候都显示光强度弱. 比如,温度,如果温度不恒定会出现这种情况.我指的不是柱温,而是实验室温度; 比如,压力,示差检测器必须没有道气泡,所以不能用AB泵,必须混合之后走单泵.而且必须压力稳定; 再比如,你没有平衡好.示差检测器必须在流通池和样品池反复切换冲洗.每个通道冲洗30min,然后切换到另一个通道,你观察基线,最好是阶梯状态.因为内它是一束光照两个通道,所以,当两个通道出现温度差异,有一个通道有气泡,或者两个通道的流动相有差异的时候就会显容示光强度弱.

天峻县15759027866： 高效液相色谱法常出现的故障及解决的方法 - ？
右辉尿石： 高效液相色谱仪使用中常见故障及解决方法 1 概述.高效液相色谱仪系统液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱 温箱、检测器、数据处理系统组成.对于整个系统而言,柱子、泵和检测器是核 心部件同时也是易出问题的主要部位. ...

天峻县15759027866： 用高效液相色谱法检测阿维菌素原料不出峰是什么原因？
右辉尿石： 采用高效液相色谱法在色谱柱 Bondapak C18柱 (250 mm*4.6 mm i.d.) 上, 以V(甲醇):V(水):V(三乙胺)=87:13:0.2为流动相, 示差折光检测