为什么dna重组只筛选出白菌落
这个是蓝白斑筛选试验。
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法： 是根据载体的遗传特征筛选重组子，如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段，其中有β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点（MCS），它并不破坏读框，但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能，这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞。因此，宿主和质粒编码的片段虽都没有酶活性，但它们同时存在时，可形成具有酶学活性的蛋白质。这样，lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补，称为α-互补。由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下，在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落，因而易于识别。然而，当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选，又称为蓝白斑筛选。如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃温箱倒置培养12-16hr后，有重组质粒的细菌形成白色菌落。
一般白斑表示有目的基因插入lacZ，破坏其功能，而不能正常合成酶降解底物，从而不出现蓝斑。因此重组的载体一般LacZ的活性已被破坏，产生白斑，但是有时你插入的目的基因短，使得LacZ基因没有完全破坏的话，可能会出现淡蓝的斑。
DNA重组筛选菌落，要看你的目的了。
如使用具有蓝白斑筛选系统，其目的基因插入位点在lacZ内，重组转化后其破坏了启动子的完整性，转化阳性克隆菌落就不能产生蓝斑，此即为我们的目的白斑菌落。
为什么dna重组只筛选出白菌落
一般白斑表示有目的基因插入lacZ，破坏其功能，而不能正常合成酶降解底物，从而不出现蓝斑。因此重组的载体一般LacZ的活性已被破坏，产生白斑，但是有时你插入的目的基因短，使得LacZ基因没有完全破坏的话，可能会出现淡蓝的斑。
DNA重组体的筛选和鉴定的常用方法有哪几种?
【答案】：DNA重组体的筛选和鉴定的常用方法是：①抗药性标志选择：可在培养基中加入抗生素予以筛选，未转化的细菌被杀死，已转化的则生成菌落。②核酸内切酶酶切图谱分析：利用核酸内切酶切割重组体，然后电泳检测进一步确定重组体是否含有目的基因。③分子杂交法：可把待选菌在平板上培养成菌落，用硝酸纤维...
如何筛选和鉴定DNA重组体
比如用青霉素或者其他抗性环境来择选载入成功的重组体、活下来的就是目的基因表达成功的、
作为载体的质粒上有标记基因,重组DNA是怎么筛选质粒的?质粒会融入重组...
就根据标记基因筛选 是你将重组dna插入到质粒中
重组DNA可以从哪几个方面进行筛选和鉴定
第一：可以在重组的DNA中提前插入一个标记基因,一般是抗·抗生素基因（抗四环素、抗链霉素···）,那么如果目的基因的插入点在一个标记基因中的话,观察那个标记基因的表达.第二：DNA探针 第三：抗原抗体杂交技术 第四：直接检查产物
高中生物选修三知识点总结
③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。(2)最常用的载体是¬¬质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。(3)其它载体: 噬菌体的衍生物、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的获取1.目的基因是指: 编码蛋白质的结构基因 。2.原核...
重组DNA可以从哪几个方面进行筛选和鉴定
第一：可以在重组的DNA中提前插入一个标记基因，一般是抗·抗生素基因（抗四环素、抗链霉素···），那么如果目的基因的插入点在一个标记基因中的话，观察那个标记基因的表达。第二：DNA探针 第三：抗原抗体杂交技术 第四：直接检查产物
DNA克隆重组体的筛选
在生物技术中，DNA克隆重组体的筛选是一个关键步骤。首先，通过转化、转染或者感染的技术，将重组DNA分子导入到受体细胞中。这些细胞在特定条件下，如培养在涂布了适当培养基的培养板上，会形成大量的转化子菌落或者转染噬菌斑。每个重组体DNA分子都携带着特定的外源基因，而受体菌在接纳过程中通常只能接受一...
dna重组子的筛选鉴定有哪些步骤
DNA重组技术步骤如下：一、质粒DNA 提取的pQE-31和pUC18-CAT 质粒。二、制备重组DNA 在灭菌的1.5mL 离心管中，加入pQE-31质粒10mL(2mg／mL)，2mL酶切缓冲液，1mL BamHI 和HindIII酶 的混合液（各含10个单位），无菌双蒸水7mL，至反应混合物总体积为20mL，离心混匀，37℃反应过夜。2. 在另一...
DNA克隆的重组体的筛选
而 转化或转染时每一受体菌又只能接受一个重组体分子，如何将众多的转化菌落或转染噬菌斑区分开来，并鉴定哪一菌落或噬菌斑所含重组DNA分子确实带有目的基 因，这一过程即为筛选或选择。根据载体体系、宿主细胞特性及外源基因在受体细胞表达情况不同，可采取直接选择法或非直接选择法。
蔚可欣美： 你是用蓝白斑筛选体系吗? 一般白斑表示有目的基因插入lacZ,破坏其功能,而不能正常合成酶降解底物,从而不出现蓝斑.因此重组的载体一般LacZ的活性已被破坏,产生白斑,但是有时你插入的目的基因短,使得LacZ基因没有完全破坏的话,可能会出现淡蓝的斑.
泾县17761266158： 外显子的操作步骤 - ？
蔚可欣美： 操作步骤及其基本原理是: ⑴基因组DNA经“霰弹法”切成小片段后,克隆在位于“外显子捕捉序列”下游的克隆位点上. ⑵将这些重组载体汇总后感染反转录病毒的专宿包装细胞系(ecotropicretroviralpackagingcellline)——ψ2细胞系.ψ2细...
泾县17761266158： 为什么蓝白筛选时,筛选出的白色菌落要将进一步鉴定?哪些方法能确认阳性克隆? - ？
蔚可欣美： 用菌液PCR方法来鉴定,至于这个方法的原理和怎么操作,上网可以收到
泾县17761266158： 基因克隆中a - 互补选择原理是什么 - ？
蔚可欣美： 生物科学蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法: 是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等.现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信...
泾县17761266158： 培养DNA重组细菌后,如何选出目的细菌 - ？
蔚可欣美： 可在质粒上加入抗性基因. 如在质粒上加入抗青霉素基因,导入细菌后,用含有青霉素的培养基来培养.存活下来的细菌一定是被成功导入质粒的细菌了. 当用DNA连接酶连接后,将这些细菌放在特制的培养基中培养,进行筛选,举例: 某个质粒含有抗青霉素基因,若这个质粒上加如目的基因后进入了细菌.我们把所有的细菌都放在含有青霉素的培养基中培养,那些没有被质粒进入的细菌都会死去,而成功倒如质粒的细菌会因为质粒上的抗青霉素基因活下来,我们就成功筛选出了所需细菌
泾县17761266158： 基因工程中 目的基因与运载体结合的成功率 - ？
蔚可欣美： 是这样的,一般我们用两个检测标准 第一个是标记基因,用来检测是否运载体进入到受体细胞里面.例子:运载体里面带有一个抵抗抗生素的基因.那么把所有受体细胞(比如,大肠杆菌)撒在培养皿上之后,培养皿中有抗生素,只有当运载体...
泾县17761266158： dna重组子的筛选鉴定有哪些步骤 - ？
蔚可欣美： DNA重组技术步骤如下: 一、质粒DNA提取的pQE-31和pUC18-CAT 质粒. 二、制备重组DNA 在灭菌的1.5mL 离心管中,加入pQE-31质粒10mL(2mg/mL),2mL酶切缓冲液,1mL BamHI 和HindIII酶 的混合液(各含10个单位),无菌双蒸水7mL...
泾县17761266158： 蓝白斑筛选 - ？
蔚可欣美： α-互补 的原理 载体上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N端146个氨基酸的编码序列.这个编码区中插入了一个多克隆位点,但并没有破坏lacZ的阅读框架,不影响其正常功能.E. coli DH5α菌株带有β-半乳糖苷酶C端部分...
泾县17761266158： 重组基因筛选的具体做法是? - ？
蔚可欣美： 用四环素标记的重组筛选法需要做影印,也就是将菌落影印到一个没有抗生素的平板上.这样在无抗培养基上具有菌落,而有抗培养基上相应位置没有菌落的那个菌落,就是含有重组质粒的菌.这个做法很不方便,不好操作,现在基本已经被蓝白斑筛选法取代了.
泾县17761266158： 基因工程中,为何要进行重组体的筛选 - ？
蔚可欣美： 基因工程中你希望得到的是具有效应的蛋白质,需要将带有目的基因的载体转入受体细胞,如果不筛选,不具目的基因的载体进入受体细胞后你去培养他就造成了资源浪费
