凯氏定氮法是什么
蛋白质测定的国标规定方法——凯氏定氮法介绍
【GB/T 5009.5—1985】
食品中蛋白质的测定方法
本标准适用于各类食品中蛋白质的测定.
1 原理
蛋白质是含氮的有机化合物.食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵.然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量.
2 试剂
所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制.
2.1 硫酸铜.
2.2 硫酸钾.
2.3 硫酸.
2.4 2%硼酸溶液.
2.5 混合指示液：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合.也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合.
2.6 40%氢氧化钠溶液.
2.7 0.05N硫酸标准溶液或0.05N盐酸标准溶液.
3 仪器
定氮蒸馏装置：如图所示.
（图略）
4 操作方法
4.1 样品处理：精密称取0.2.0g固体样品或2～5g半固体样品或吸取10～20ml液体样品(约相当氮30～40mg),移入干燥的 100ml或500ml定氮瓶中,加入0.2g硫酸铜,3g硫酸钾及20ml硫酸,稍摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上.小心加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色澄清透明后,再继续加热0.5h.取下放冷,小心加20ml 水.放冷后,移入100ml容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用.取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验.
4.2 按图装好定氮装置,于水蒸气发生瓶内装水至约2/3处,加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入数粒玻璃珠以防暴沸,用调压器控制,加热煮沸水蒸气发生瓶内的水.
4.3 向接收瓶内加入10ml 2%硼酸溶液及混合指示液1滴,并使冷凝管的下端插入液面下,吸取10.0ml样品消化稀释液由小玻杯流入反应室,并以10ml水洗涤小烧杯使流入反应室内,塞紧小玻杯的棒状玻塞.将10ml 40%氢氧化钠溶液倒入小玻杯,提起玻塞使其缓缓流入反应室,立即将玻塞盖紧,并加水于小玻杯以防漏气.夹紧螺旋夹,开始蒸馏.蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内,蒸馏5min.移动接受瓶,使冷凝管下端离开液面,再蒸馏1min.然后用少量水冲洗冷凝管下端外部.取下接收瓶,以0.05N硫酸或0.05N盐酸标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点.
同时吸取10.0ml试剂空白消化液按4.3操作.
4.4 计算
式中：X——样品中蛋白质的含量,%；
V1——样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积,ml；
V2——试剂空白消耗硫酸或盐酸标准液的体积,ml；
N——硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度；
0.014——1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数；
m——样品的质量(体积),g(ml)；
F——氮换算为蛋白质的系数.蛋白质中的氮含量一般为15～17.6%,按16%计算乘以6.25即为蛋白质,乳制品为6.38,面粉为5.70,玉米、高粱为6.24,花生为5.46,米为5.95,大豆及其制品为5.71,肉与肉制品为6.25,大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83,芝麻、向日葵为 5.30.
附加说明：
本标准由全国卫生标准技术委员会食品卫生标准分委员会提出,由卫生部食品卫生监督检验所归口.
本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草.
凯氏定氮法的原理?
食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量计算氮含量，再乘以换算系数，即为蛋白质的含量。
凯氏定氮法原理
凯氏定氮法原理是：在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收，再以标准盐酸滴定，就可计算出样品中的氮量。凯氏定氮法是由丹麦化学家凯道尔于1883年建立的，现已发展为常量、微量、平微量凯氏定氮法...
怎么测定蛋白质的含量?
①凯氏定氮法 原理：蛋白质平均含氮量为16%。当样品与浓硫酸共热，蛋白氮转化为铵盐，在强碱性条件下将氨蒸出，用加有指示剂的硼酸吸收，最后用标准酸滴定硼酸，通过标准酸的用量即可求出蛋白质中的含氮量和蛋白质含量。②双缩脲法 原理：尿素在180℃下脱氨生成双缩脲，在碱性溶液中双缩脲可与...
凯氏定氮法原理是什么?
凯氏定氮法原理是：蛋白质是含氮的有机化合物。蛋白质与浓硫酸和催化剂一同加热硝化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，并换算成蛋白质含量。含氮量*6.25=蛋白含量。凯氏定氮法的注意事项：...
凯氏定氮法测定食品中蛋白质的操作要点及注意事项、常见问题解答汇总...
总结：凯氏定氮法是食品中蛋白质测定的金标准，但其精确性依赖于每个步骤的严谨执行。记住，每一步都关乎蛋白质的真相，每个细节都可能影响最终的数字。让我们以科学的态度，把握这把测量食物蛋白质的钥匙，揭示营养的奥秘。更多实用技巧和实操指南，请关注我们的实验室服务号，持续为您带来专业支持。
凯氏定氮法的原理是什么?
凯氏定氮法是植株全氮量测定最经典的方法。方法原理：植株样品在硫酸钾和硫酸铜混合催化剂作用下，用浓硫酸消煮，使氮转化成为硫酸铵，然后加碱蒸馏，逸出的氨被硼酸吸收，用稀H2SO4滴定终点，根据标准酸的用量计算出植株含氮量。
克氏定氮法和凯氏定氮法的区别
原理是因为蛋白质含氮量通常在16%左右，所以将克氏定氮法测得的含氮量乘上系数6.25，便得到该样品的蛋白质含量。2，凯氏定氮法是由丹麦化学家凯道尔于1883年建立的，现已发展为常量、微量、平微量凯氏定氮法以及自动定氮仪法等，是分析有机化合物含氮量的常用方法。， 凯氏定氮法的理论基础是...
凯氏定氮法的实验原理是什么?
凯氏定氮法是通过测出样品中的总含氮量再乘以相应的蛋白质系数而求出蛋白质的含量,此法的结果称为粗蛋白质含量。原理：有机含氮化合物与浓硫酸共热消化，氮转化为氨，再与硫酸结合成硫酸铵。硫酸铵与强碱反应，放出氨。将氨蒸馏到过量的标准无机溶液中，再用标准碱溶液进行滴定。根据测得的氨量，...
凯氏定氮法的主要原理是什么?
三种试剂分别如下：在凯氏定氮法测定蛋白质含量实验中，消化阶段所用的试剂有浓硫酸、硫酸钾、硫酸铜。其中加浓硫酸主要是消化，即是通过加热使硫酸将食物中的有机氮转化成无机氮。加硫酸钾与硫酸铜主要是祈祷催化剂的作用用于加快消化的反应速率。采用凯氏定氮法的注意事项：样品应是均匀的。固体样品应...
国家标准检测蛋白质含量测定方法
蛋白质含量测定方法就是检测N元素的含量，像三聚氰胺的问题，就是通过增加N的含量使“蛋白质”含量提高的。国家标准检测蛋白质含量的方法叫做凯氏定氮法，食物中的蛋白质在催化加热条件下分解，导致氨和硫酸结合产生硫酸铵。 碱蒸馏采用无硫，硼酸吸收，用硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸耗计算氮含量...
冶刻长富：[答案] 凯氏定氮法 蛋白质测定的国标规定方法——凯氏定氮法介绍 【GB/T 5009.5—1985】 食品中蛋白质的测定方法 本标准适用于各类食品中蛋白质的测定. 1 原理 蛋白质是含氮的有机化合物.食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨...
札达县15184418889： 凯氏定氮法是蛋白质经典测定法,其原理是通过测出样品中氮的含量而求出蛋白质的含量.氮在蛋白质中的平均含量为16%;奶粉中蛋白质含量的国家标准为:... - ？
冶刻长富：[答案] (1)国家标准为每奶粉中含蛋白质不少于18.5g,氮在蛋白质中平均含量16%,则合格奶粉中氮的含量为 18.5g*16% 100g*100%=2.96%; 现测定一袋该类奶粉中氮的含量为2%,2%<2.96%,故该奶粉不符合国家标准. (2)盐酸中溶质的质量为:21.4g...
札达县15184418889： 什么是 凯氏定单法 - ？
冶刻长富： 凯氏定氮法是蛋白质含量测定的经典方法之一:被测的天然含氮化合物与浓硫酸共热时分解出氨,氨与硫酸反应生成硫酸铵.在凯氏定氮仪中加入强碱碱化消化液,使硫酸铵分解出氨.用水蒸汽蒸馏法将氨蒸入无机酸溶液中,然后再用标准酸溶液进行滴定,滴定所用无机酸的量(mol)相当于被测样品中氨的量(mol),根据所测得的氨量即可计算样品的含氮量.因为蛋白质含氮量通常在16 %左右,所以将凯氏定氮法测得的含氮量乘上系数6.25,便得到该样品的蛋白质含量.特点:该方法适合样品总氮的测定,时间比较长,步骤繁琐.
札达县15184418889： 凯氏定N法中的氮气球有什么作用 - ？
冶刻长富：[答案] 凯氏定氮法,是在特定的仪器中将样品与试剂充分反应,再将反应生成的NH3用特定的试剂吸收,通过测定吸收的NH3的量,确定原样品中的N元素的含量. 氮气球的作用是为了将反应生成的NH3全部鼓入吸收装置,去被充分吸收,而保证测定的准确.
札达县15184418889： 凯氏定氮法的适用范围及其优缺点 - ？
冶刻长富： 药典中的凯氏定氮针对有机氮化合物,主要是指蛋白质,aa,核酸,尿素以及大量合成的氮为负三价的有机氮化合物.它不包括叠氮化合物,联氮,偶氮,腙,硝酸盐,亚硝酸盐,硝基,腈,肟和半卡巴腙类的含氮化合物. 凯氏定氮法只是一个氧化还原反应,把低价氮氧化并转为氨盐来测定,而不能把高价氮还原为氮盐的形式,所以不可以测出物质中所有价态的氮含量.
札达县15184418889： 凯氏定氮法计算公式 ？
冶刻长富： 凯氏定氮法计算公式:X=[(V1-V2)*N*0.014/(m*10)]*F*100%.式中,X表示样品中蛋白质的百分含量,V1表示样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积,V2表示试剂空白消耗硫...
札达县15184418889： 凯氏定氮法与分光光度法的优缺点凯氏定氮法与分光光度法主要应用于食品中蛋白质含量的检测,优缺点有那些? - ？
冶刻长富：[答案] 凯氏定氮法的优缺点优点①可用于所有食品的蛋白质分析中;②操作相对比较简单;③实验费用较低;④结果准确,是一种测定蛋白质的经典方法;⑤用改进方法(微量凯氏定氮法)可测定样品中微量的蛋白质缺点①最终测定的是总有机氮,而不只...
札达县15184418889： 凯氏定氮法测定食品中蛋白质含量的原理和基本操作方法是什么?如题. - ？
冶刻长富：[答案] 原理:有机含氮化合物与浓硫酸共热消化,氮转化为氨,再与硫酸结合成硫酸铵.硫酸铵与强碱反应,放出氨.将氨蒸馏到过量的标准无机溶液中,再用标准碱溶液进行滴定.根据测得的氨量,计算样品的总氮量.、试剂与材料:浓硫酸...
