如何对植物病害进行标本采集和鉴定
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植物鉴定一般有:来源鉴定、性状鉴定、显微鉴定及理化鉴定等方法。
(一)来源鉴定法
又称基原鉴定法,是应用植(动、矿)物分类学的知识,对中药的来源进行鉴定,确定其正确的学名,以保证应用品种准确无误。
1.来源鉴定的内容:包括原植(动)物的科名、植(动)物名、拉丁学名、药用部位,矿物药的类、族、矿石名或岩石名。
2.原植物鉴定的步骤:①观察植物形态;②核对文献;③核对标本。
中药的原植物鉴定,除经典分类学方法外,还可使用化学分类学、细胞分类学、数值分类学、DNA分类学方法和技术。
(二)性状鉴定法
就是用眼看、手摸、鼻闻、口尝、水试、火试等十分简便的方法来鉴别药材的外观性状,这些方法积累了丰富的传统鉴别经验,具有简单、易行、迅速的特点。 性状鉴定的内容包括形状、大小、色泽、表面特征、质地、折断面的特征、气、味、水试、火试等。
1. 药材 :
⑴ 形状 :药材的形状与药用部位有关,每种药材的形状一般比较固定。
⑵ 大小 :指药材的长短、粗细(直径)和厚度。
⑶ 色泽 :药材的颜色与成分有关,颜色是否符合要求,是衡量药材质量好坏的重要因素之一。一般应在自然光下观察药材的颜色,如用两种色调复合描述色泽时,应以后一种色调为主色。
⑷ 表面特征 :指药材表面是光滑还是粗糙,有无皱纹、皮孔、鳞片、毛茸或其它附属物等。
⑸ 质地 :指药材的轻重、软硬、坚韧、疏松(或泡松)、致密、黏性、粉性、油润、角质、绵性、柴性等特征。
⑹ 断面特征:包括自然折断面和横切面。
⑺ 气 :“气”是由于药材含有挥发性物质的缘故,也是药材的重要鉴定特征之一。
⑻ 味:药材的味感是由其所含的化学成分决定的,每种药材的味感是比较固定的。味感也是衡量药材品质的标准之一。
⑼ 水试 :有些药材放入水中,能产生特殊的现象,如沉浮、溶解情况、颜色、透明度、有无黏性、膨胀度、旋转与否及有无荧光等。
⑽ 火试 :有些药材用火烧之,能产生特殊的香气或臭气,会有颜色、烟雾、闪光或响声等现象出现,可据此鉴别其真伪甚至优劣。
三)显微鉴定法
是利用显微镜来观察药材的组织构造、细胞形状以及内含物的特征,矿物的光学特性,以及利用显微化学方法,确定细胞壁及细胞内含物的性质或某些品种有效成分在组织中的分布,用以鉴定药材的真伪和纯度甚至品质,以及对中成药是否按处方规定投料进行鉴定。
1.显微制片方法
包括有横切片或纵切片、表面制片、粉末制片、解离组织片、花粉粒与孢子制片、磨片制片、含粉末药材的制剂显微制片等。
2.植物细胞壁和内含物的鉴别
3.显微测量
目镜测微尺先用镜台测微尺标化,然后在显微镜下测量细胞及细胞内含物的大小。通常是在高倍物镜下进行测量,但欲测量较长的纤维、非腺毛等的长度时,则在低倍物镜下测量,记录最大值与最小值。
4.显微常数测定
常见的显微常数主要有用于叶类鉴别的气孔数、气孔指数、栅表比、脉岛数和脉端数等。这些显微常数常因植物种类不同而异,而同种植物则较为恒定,对于叶类、某些带叶的全草类和花类药材的品种鉴定有重要意义。
5.常用封藏试液
⑴ 蒸馏水、稀甘油:适用于观察淀粉粒、油滴、树脂等细胞内含物及细胞壁的颜色。
⑵ 甘油醋酸试液:使淀粉粒不膨胀,特别适宜淀粉粒的观察与显微测量。
⑶ 水合氯醛试液:可使皱缩的细胞膨胀;可溶解多种色素,如叶绿素及树脂、淀粉粒、蛋白质、菊糖、挥发油,而各种晶体不溶解;有清净、透明作用,使细胞、组织透明,便于观察细胞形状和组织构造及细胞内含的各种结晶体。
6.扫描电子显微镜和偏光显微镜的应用
⑴ 扫描电子显微镜:分辨率高,可达3nm,放大倍数一般可达几十万倍,图像富有立体感。
⑵ 偏光显微镜:主要用于观察和分析矿物类中药的光学性质,也可用于研究动物和植物类中药的组织及细胞内含物,如淀粉粒、草酸钙簇晶等。对于透明矿物,一般使用透射光源的偏光显微镜;对于不透明矿物则使用放射光源的偏光显微镜。
(四)理化鉴定法
1.物理常数的测定
包括相对密度、旋光度、折光率、硬度、黏稠度、沸点、凝固点、熔点等的测定。这对挥发油类、油脂类、树脂类、液体类药(如蜂蜜等)和加工品类(如阿胶等)药材的真实性和纯度的鉴定,具有特别重要的意义。
2.一般理化鉴别
⑴ 化学定性分析:利用药材中的化学成分能与某些试剂产生特殊的气味、颜色、沉淀或结晶等反应来鉴别中药的真伪。
⑵ 微量升华:利用中药中所含的某些成分,在一定温度下能升华的性质获得升华物,在显微镜下观察其结晶性状、色泽,或取升华物加试液观察反应。
⑶ 荧光分析:利用中药中所含的某些化学成分在紫外光或常光下能产生一定颜色的荧光的性质进行鉴别。紫外光灯的波长为365nm,如用短波(254~265nm)时应加以说明。
⑷ 显微化学分析:将药材的切片、粉末或浸出物等置于载玻片上,加某些化学试剂后产生沉淀或结晶,在显微镜下观察其形状和颜色进行鉴别。利用显微和化学方法确定中药有效成分在中药组织构造中的部位,称为显微化学定位试验。
⑸ 泡沫指数和溶血指数:利用皂苷的水溶液振摇后能产生持久性的泡沫和溶解红血球的性质,可测定含皂苷类成分药材的泡沫指数或溶血指数作为质量指标。
3.检查
⑴ 水分测定法:2005年版《中国药典》水分测定法有四种,即烘干法、甲苯法、减压干燥法和气相色谱法。
⑵ 灰分测定法:2005年版《中国药典》灰分测定法包括总灰分测定法和酸不溶性灰分测定法。
⑶ 膨胀度的测定:膨胀度是药品膨胀性质的指标,系指按干燥品计算,每1g药品在水或其它规定的溶剂中,在一定的时间与温度条件下膨胀后所占有的体积(ml)。主要用于含黏液质、胶质和半纤维素类的天然药品。
⑷ 酸败度:是指油脂或含油脂的种子类药材,在贮藏过程中发生复杂的化学变化,产生游离脂肪酸、过氧化物和低分子醛、酮类分解产物,因而出现臭味,影响药材的感观性质和内在质量。
⑸ 色度检查:利用比色鉴别法检查药材在贮藏过程中有色杂质的限量,如白术。
⑹ 有害物质的检查:中药中的有害物质主要有内源性的有害物质和外源性的有害物质。
①内源性的有害物质:
②外源性有害物质:
4.色谱法
⑴ 薄层色谱法:是用于定性鉴别最多的色谱法之一。
⑵ 高效液相色谱法
⑶ 气相色谱法:适用于含挥发油及其它挥发性组分的中药及中成药的分析。
⑷ 蛋白电泳色谱法:用于动物药、果实种子类及根茎类等含蛋白质及氨基酸的药材的真伪鉴别。
⑸ 高效毛细管电泳
5.分光光度法
包括紫外-可见分光光度法、红外分光光度法和原子吸收分光光度法。常用波长范围为:200~400nm的紫外光区;400~760nm的可见光区;2.5~25um(按波数计为4000~400cm-1)的红外光区。
6.色谱-光谱联用仪分析法
7.浸出物测定
对某些中药的有效成分尚未清楚或尚无精确定量方法的中药,一般可根据已知成分的溶解性质选用溶剂进行浸出物的测定。通常选用水、一定浓度的乙醇(或甲醇)、乙醚作浸出物测定。有冷浸法和热浸法。测定前供试品需粉碎,使能过二号筛。
8.含量测定
⑴ 含量测定方法:既有经典分析方法(容量法、重量法等)又有现代仪器分析法(如紫外-可见分光光度法、气相色谱法、薄层扫描法、高效液相法等)。
⑵ 挥发油含量测定方法有两种:①甲法适用于测定相对密度在1.0以下的挥发油;②乙法适用于测定相对密度在1.0以上的挥发油。
材料和用具 标本夹、吸水纸、塑料袋、纸袋、标签、铅笔、记号笔、小刀、枝剪、手锯、标本缸、酵酸铜、硫酸铜、95%乙醇、甲醛溶液、亚硫酸、甘油、蒸馏水等。
内容与方法
(一) 病害标本的采集
1 标本采集基本要求
采集完整的标本,最好是先摄影然后再压制或浸渍保存,拍照越清晰越好,要求拍正常植株和病害部位。每号标本,样本数量应至少采集2-3份。
2 取样部位
(1)标本上有子实体的应尽量在老叶上采集
因为它比较成熟,许多真菌有性阶段的子实体都在枯死的枝叶上出现,而无性阶段子实体大多在活体上可以找到。
(2)柔软多汁的子实体或果实材料,则应采集新发病的幼果。
(3)病毒病应尽量采集顶梢与新叶。
(4)线虫病害标本应采病变组织,为害根部的线虫病害标本除采集病根外还应采集根围土壤。
(5)表现蔫萎的植株要连根挖出,有时还要连同根际的土壤等一同采集。
(6)对于粗大的树枝和植株,则宜削取一片或割取一截。
(7)如果病害在叶、果实和枝干上都有表现时,尽量采集全面。
(8)寄生类应和寄主一起采集。病害症状很特殊病害,要连同植株的枝叶或花一起采集,以便鉴、定其寄主名称。
3 标本数据记录和标本编号
要求记录准确、简要、完整。完整的记录与标签同样十分重要,要有寄主名称、
采集日期与地点、采集者姓名、生态条件和土壤条件等。
4 标本采集 方法
(1)枝干类、根部病害标本的采集
取其得病部位,用锯、枝剪或高枝剪采取,切勿用手折断,影响标本的美观,对纤维长而强韧的枝干等,尤应注意。
(2) 叶部病害标本的采集
大型叶植物,它们的叶子和花序均很大,采集标本时可采一部分或分段采集,以同株上幼小叶加上花果组成一份标本(同时标明叶实际大小);或把叶、叶柄各自分段取其一部分;
对于像菟丝子、列当这样的寄生植物应连同寄主一起采集,并记录寄主的名称。 (3)肉质或多汁植物(花、果实)病害标本的采集
应将其纵切或横切,有时需将其内部的组织挖出,还要考虑是否将一半的材料浸泡在保存液中保存。在野外干燥时,要在切开的茎表面洒大量食盐,用盐包裹的材料应置于夹有多层报纸的标本夹中,24小时后要把浸有盐水的报纸移去,或者用开水将材料烫死,然后放置在薄纸板-铝板的三明治层中烘干。
(二)病害标本的制作
从田间采回的标本,除一部分用作分离鉴定外,对于典型的病害症状最好是先摄影然后再压制或浸渍保存。压制或浸渍的标本尽可能保持其原有性状,微小的标本可以制成玻片,如双层玻片、凹穴玻片或用其它小玻管小袋收藏。
(三) 病害标本的保存
1 干燥法 适用于一般含水较少的茎、叶等病害标本的制作,最简单、最经济、应用最广。 将采集的标本夹在吸水纸中,同时放入写有采集地点、日期和寄主名称的标签,再用标本夹压紧后日晒或加温烘烤,使其干燥,干燥愈快愈能保持原有的色泽,标本质量亦愈高。夏季采的标本在温湿度高的情况下,容易发霉变色,换纸宜勤,通常在压制的最初三、四天每天换纸l-2次(视标本含水多少,及温湿度情况而定),以后每二、三天换一次,至完全干燥为止。在第一次换纸的同时,应将标本加以整理,因经初步干燥,标本变软易于铺展。烟草、蚕豆、梨、马铃薯的茎叶等很易发黑变色,都是很难保存颜色的标本,在制作过程中特别要注意快速干燥。需要保持绿色的干制标本,可先将标本在2-4%硫酸铜溶液中浸24小时,或经过醋酸铜溶液(配方及方法见浸渍法中醋酸铜的浸渍法)处理后再压制。也可以在叶面抹一层液体石蜡后再压,可以保持鲜绿色2-3天。
2 浸渍法 适用于 多汁的病害标本,
如果实、块根或担子菌的子实体等,必须用浸渍法保存。浸渍液体种类很多,有纯属防腐性的,亦兼有保持标本原色的,现介绍数种常用及效果较好的方法。
(1)防腐浸渍法:此类浸渍法仅能防腐而没有保色作用,如萝卜、甘薯等,不要求保色的标本,洗净后直接浸于以下溶液中。 ①5%福尔马林浸渍液。
②亚硫酸浸渍液:l000ml水中加5%-6%亚硫酸15ml(一般市售的亚硫酸含量为5— 6%)或用亚硫酸钠10.5g,浓硫酸8ml,水500ml配成混合液。
(2)保持绿色标本的浸渍液及浸泡法:
①醋酸铜保(绿)色浸渍法:往50%的醋酸中逐渐加入醋酸铜结晶溶解至饱和作为母 液(大约1000ml50%的醋酸中加入l5g醋酸铜即可达饱和),使用时兑水稀释1-4倍(稀 释倍数视标本颜色而异,色深者稀释倍数可小些)。将此液加热煮沸,投入标本,开始时标本的绿色被漂去,再经数分钟后标本又恢复绿色,此时立即将标本取出,用清水洗净,保存于5%的福尔马林溶液中,此法称为热处理。冷处理的办法是将标本置于上述稀释液中浸3小时后标本退色,再经72小时后标本恢复绿色,此时将标本取出,取水冲净,保存于5%的福尔马林溶液中。此法保持色泽时间较长,其保色原理大致是铜离子与叶绿素中的镁离子发生置换作用。所以,溶液经多次处理标本后,铜离子会逐渐减少。如要继续使用,应补入适量的醋酸铜。此法保存标本往往略带蓝色,与植物标本原色稍有出入。
②硫酸铜保(绿)色浸渍法:用清水冲洗标本,直接浸泡在5%的硫酸铜溶液中1—7天,待标本略带褐色时取出用清水漂洗,去除标本表面多余的硫酸铜溶液,然后保存在亚硫酸浸渍液中。
③保存黄色和桔红色标本的浸渍液:保存杏、梨、柿、红辣椒等果实标本用亚硫酸浸
渍液,亚硫酸浸渍液有漂白作用,因此使用时要注意浓度,一般用1 %即可(浸杏时浓度可再稀些),因浓度太小,防腐力不够,可加入适量酒精。为了防止果实崩裂,可加入少许甘油。
④保存红色标本的浸渍液:保存标本红色较难,因为红色是水溶性的花青素,很难保存。常用Hesler浸渍液保存,成分是:氯化锌50g,福尔马林25ml,甘油25ml,水1000ml。 将氯化锌溶于热水中,加入福尔马林,如有沉淀,用其澄清液。此溶液适用于由于花青素 而显红色的标本,如苹果、番茄等。
(四) 标本的保存
制成的标本,经过整理和登记,然后依一定的系统排列和保藏。
菌类标本一般按分类系统排列,要有两套索引卡片,一套是寄主索引,一套是菌类索引,以便于寻拽和整理。
标本室(柜)要保持干燥、潸浩,并要定期施药以防虫蛀与霉变。
1 标本盒保藏 教学和示范用的干制病害标本,采用玻面纸盒保藏比较方便,玻面纸盒,的适宜大小为20×28×2 cm。纸盒中先铺一层棉花,并在棉花中加少许樟脑粉以驱虫。最后在棉花上放上标本和标签。
2 标本瓶保藏 浸渍的标本放在标本瓶内保藏,为了防止标本下沉和上浮,可绑在玻璃条上然后再放入标本瓶。标本瓶的口盖好后滴加石蜡封口,然后贴上标签。
3 纸套内保藏 用牛皮纸叠成15×33cm的纸套,大量保存的干制标本,大多采用纸套保藏,将标本装入纸套内,并在纸套上贴好标签,放在标本柜中即可。
如何对植物病害进行标本采集和鉴定
叶部病害标本的采集:(1)大型叶植物:叶子和花序均很大,采集时可采一部分,或把叶、叶柄各自分段取其一部分。(2)对于像菟丝子、列当这样的寄生植物应连同寄主一起采集,并记录寄主的名称。
为什么要对植物病害进行病源鉴定 其意义何在?
植物健康生长并正常发育,才能为人类提供更多更好的各种农产品。植物因受到不良条件或有害微生物的影响超过其忍耐限度时,都可能导致植物的生长与发育出现异常状态——病害,给人类造成重大经济损失,甚至带来灾害性后果。虽然根据植物表现的异常状态可以对病害进行初步诊 植物发生病害后,在其体内外出现的可以...
如何对植物病害进行标本采集和鉴定?
(1)采集具有典型症状的病害标本,尽可能采集到不同时期、不同发病部位的标本。(2)采集有病征的病害标本,以便进行病原物鉴定工作。真菌病害的病原一般有无性、有性两个阶段,应尽量在不同的时期分别采集。有些真菌的有性子实体常在地面的病残体上产生,也要注意采集。(3)避免病原物混杂,采集时对...
怎么对现代植物的病害进行诊断?
1. 对现代植物病害的诊断应从全面检查和仔细分析症状入手,避免草率下结论。2. 诊断植物病害时,首先要观察病植物的所有症状,寻找关键性病征,并注意是否大面积同时发生。3. 其次,通过询问病史、查阅资料和镜检、剖检等手段,全面分析病例特点,以获得尽可能多的信息。4. 自然界中,典型症状可能并不典...
怎么对现代植物的病害进行诊断?
1. 对现代植物病害的诊断应从详细观察症状开始,全面检查并仔细分析,避免草率下结论。2. 诊断过程中,首先要仔细观察病植物的所有症状,寻找关键性病征,并注意是否病害大面积同时发生。3. 接着,通过询问病史和查阅相关资料,收集尽可能多的病例信息,并结合镜检、剖检等检查方法进行综合分析。4. 自然界...
怎么对现代植物的病害进行诊断?
具体内容:①在病植物上常伴随有一种病原生物存在;②该微生物可在离体的或人工培养基上分离纯化而得到纯培养;③将纯培养接种到相同品种的健株上,表现出相同症状的病害;④从接种发病的植物上再分离到其纯培养,性状与原来微生物记录相同。如果进行了上述4步鉴定工作,得到确实的证据,就可以确认该微...
如何对植物病害进行标本采集和鉴定
(1)枝干类、根部病害标本的采集 取其得病部位,用锯、枝剪或高枝剪采取,切勿用手折断,影响标本的美观,对纤维长而强韧的枝干等,尤应注意。(2) 叶部病害标本的采集 大型叶植物,它们的叶子和花序均很大,采集标本时可采一部分或分段采集,以同株上幼小叶加上花果组成一份标本(同时标明叶实际...
病害标本有哪些分类?
有的病害在植物不同生育阶段或不同部位表现不同的症状,应在不同时期或不同部位采集后进行压制。有些病害的病原物能侵害不同的寄主,并表现不同的症状,如梨锈菌在梨和转主寄主桧柏上为害的症状不同,应分别采集在各个寄主上不同阶段的标本。蜡叶标本的干燥工艺对标本质量有很大影响,传统的方法是将新鲜的标本夹在...
如何进行植物病害诊断和鉴定:
(1)非传染性病害的病原鉴定 在对养分、水分、温湿度和厌围环境条件进行分析的基础上,可进行化学诊断,就是将有病的植物榨出液或病土进行分析,测定矿物营养(如氮、磷、钾、硫、铁以及其他微量元素的含量),是否符合健康植物的标准,并查明所缺元素。其次还可以进行人工诱发试验,如水培法和砂培法,...
怎么对植物病情定量进行分级?
严重度(severity,intensity)表示发病的严重程度,分级表示,严重度级别可按单个叶片植株或整个田块的发病程度划分,也可综合考虑而划分,制成分级标准检索表或分级标准图,发病调查时据以目测估计制定的严重度分级标准要简明实用,目力能准确识别,且能反映病害造成的损失程度 叶部病害的严重度可以按病部(斑...
子支复方: 操作方法: 1. 采集完整的标本.2. 取样部位: (1)尽量采集老叶 (2)采集新发病的幼果. (3)应尽量采集有病毒的新叶. (5)蔫萎植物需连根挖出. (6)若树枝和植株较大,则削一片或割一截为标本. (7)如病害在叶、果实和枝干上都有时,应...
宛城区19243601857: 如何对植物病害进行标本采集和鉴定? - ?
子支复方: 园艺植物病害标本采集与制作一、目的要求 学习采集、制作和初步鉴定植物病害标本的方法,了解当地园艺植物常见病害种类、症状特征和发生情况,为识别园艺植物病害,安全保存植...
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宛城区19243601857: 做植物标本大概多长时间?步骤? - ?
子支复方: 一般时间是一周到一月 植物制作标本步骤 1. 采集 在采集的时候,要尽量选择有花、果实的植物;矮小的植物可以采集整株,高大的植物只采集枝条;要保护标本的各部分完好无损;有根的,要把根上的土洗净. 2. 压制 在压制的时候,把采集...
宛城区19243601857: 怎样采集植物样本? - ?
子支复方: 植物标本最好是在植物开花期采摘,花、茎、叶、根齐全为好.2. 要采集制作植物标本,需准备植物标本夹和吸水的萱草纸,标本夹可以自己动手制作,用木条做两片网式架,架上要留有可绑绳索的头,两...
宛城区19243601857: 制作植物叶部病害的干标本应注意什么 - ?
子支复方: 1、保持病害危害特征 2、一般不宜压制干标本,这样容易损坏病害特征 3、一般制作成蜡叶标本和浸渍标本
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子支复方: 植物标本制作 在野外采集、制作植物标本,是一件很有意义和乐趣的事.春天来了,正好趁此机会去郊外走走看看,享受一下大自然的乐趣. 要采集制作植物标本,需准备植物标本夹和吸水的草纸,标本夹可以自己动手制作,用木条做两片网...
宛城区19243601857: 怎么做植物标本 - ?
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宛城区19243601857: 关于作植物标本 - ?
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宛城区19243601857: 谁知道植物标本怎么做? - ?
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