什么是简并pcr
指的是做PCR时的预混液，将除了模板、引物以外其他的组分按照最佳配比混合在一起的混合液，使用时直接加入模板和引物就可以，这样做节省时间，也不用考虑反应体系性能问题。
不同的。
简并引物是指代表编码单个氨基酸所有不同碱基可能性的不同序列的混合物。
如何设计简并引物?
优先选择简并度低的氨基酸序列作为引物设计区域，如蛋氨酸和色氨酸仅有一个密码子，这有利于减少引物的复杂性。考虑物种的密码子偏好，选择在该物种中高频率出现的密码子，减少引物的简并性，提升特异性。避免引物在简并碱基处终止，确保3'末端尽可能避开密码子的第三位，以增加PCR的成功率。在简并度较...
pcr的关键性技术
若PCR扩增引物的核苷酸组成顺序是根据氨基酸顺序推测而来,就需合成简并引物。嵌套引物:利用第一轮PCR扩增产物作为第二轮PCR扩增的起始材料,同时除使用第一轮的一对特异引物外,另加1-2个新引物(处在同一个模板DNA的头两个引物之间序列)进行第二轮扩增。通过嵌套引物扩增的产物,产生错误扩增的可能性极小,所以应用嵌套...
PCR产物测序结果分析
产物测序的最大风险是有在凝胶上看起来的一个条带，实际上有多个分子。也就是说长度相似的分子有可能在电泳的时候只有一条带。如果只是进行pcr产物回收，没有进行凝胶分离的过程的话，东西可能更多了。问题就在于，如果出现双峰或者多峰，这个样品就白送了，什么也结果也没有。特别你现在用的还是简并...
【求助\/交流】如何根据相近属种已知基因来设计引物去PCR未知基因
EST库里blast找同源的，本物种里的est序列，拼接得到尽量长并且准确的序列，设计引物P，得到片段后RACE 要么直接用这个已知序列设计引物，多设计几对，碰巧哪对在保守区能P出来，就OK了。克隆测序，再做RACE。 ... 我打算从其他几个种属的糖基转移酶氨基酸序列的两个保守区域设计简并引物,通过PCR 方法...
PCR引物设计方法和原理
PCR引物设计方法和原理一、引物设计的目的获得目标片段DNA测序基因克隆体外转录突变探针设计分子标记二、引物设计的类型常规PCR引物PCR同源引物和简并引物探针引物设计的步骤下载DNA模板或蛋白质序列进行同源比较，找到保守同源序列设计引物四、PCR引物设计的原则引物长度（primerlength）:18-27bpGC钳(GCclamp:...
TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不...
poly结构可以尝试测序下去，应该没有太大问题，至于你说的引物问题，将已知的载体序列去掉开始那部分就应该是你的引物序列，因为是简并引物，所以只会出现一种引物情况，或者是你 PCR的时候，上下游的简并引物之间是不是特异性不好，所以出现不是你需要的扩增产物，你挑选的单克隆只是其中的一种，或者...
何谓PCR?PCR引物设计时有哪些注意事项(注:要考虑退火温度)?一条PCR引物...
3′端也不能有形成任何二级结构可能，除在特殊的PCR（AS-PCR）反应中，引物3′端不能发生错配。如扩增编码区域，引物3′端不要终止于密码子的第3位，因密码子的第3位易发生简并，会影响扩增特异性与效率。⑦ 引物的二级结构 引物自身不应存在互补序列，否则引物自身会折叠成发夹状结构，这种二级...
不知序列的DNA模板PCR引物的设计
极特殊情况下可以在模板上加一段人为的片段方便引物杂交。一个引物要根据模板两端序列的性质来设计。 引物的设计要符合以下原则：1、G+C含量45～55％，2、长度15～25个核苷酸，3、奈温大于55摄氏度，4、扩增跨度300～500为宜，5、引物最末端倒数第二个碱基要严格要求配对，6、不能含自身互补序列，7...
pcr中把CDNA和水整成混合液使用
可以稀释cDNA试一下，可以稀释10倍，然后再进行PCR，一般也可以扩增出来的。使用PCR法克隆目的基因的前提条件是：已知待扩增目的基因或DNA片段两侧的序列，根据该序列化学合成聚合反应必需的双引物。cDNA末端快速扩增(RACE)是一种在简并PCR产物,差异显示片段或已知的EST基础上,利用通用引物和基因特异引物进行...
为什么在tail pcr中一般随机简并引物的量是特异性引物的量的3倍_百...
随机简并引物随机结合的位点多，所以需要多加。这样才能保证片段的有效扩增。一般TAIL-PCR过程中要多试几种随即引物
巫聪慢肝： 简并PCR是根据目的蛋白的氨基酸序列推测DNA序列,由于氨基酸密码子具有简并性,即一个氨基酸可能有多个密码子,所以在设计引物时要考虑所有可能的情况,合成混合的简并引物.利用简并引物进行PCR,可扩增目的蛋白的基因序列.
合肥市13835556197： 什么是PCR? - ？
巫聪慢肝： 聚合酶链式反应简称PCR(英文全称:Polymerase Chain Reaction),是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的酶促合反应,将待扩增的DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物经“高温变性——低温退火——引物延伸”三步反应的多次循环,使DNA片段在数量上呈指数增加,从而在短时间内获得我们所需的大量的特定基因片段.
合肥市13835556197： ung可以预防什么污染(ung防止什么污染) ？
巫聪慢肝： 1、标本间的交叉污染:标本污染主要包括采集标本的容器被污染,或因密封不严造... PCR是基于DNA在体外95的高温下会简并成单链,在低温下(通常在60左右)引物和...
合肥市13835556197： 谁知道降落PCR(Touchdown PCR)的原理是什么? - ？
巫聪慢肝： ), 两者之间有一个碱基以上的间隔.使用简并引物即可以进行Touchdown PCR.由这种方法将获得大量的产物,但因为由肽序列可以知道引物之间的确切距离,所以可以根据产物的大小来选择所需要的产物.该方法的优点在于可以富 集引物与模板正确配对的产物.
合肥市13835556197： 什么是PCR实验 - ？
巫聪慢肝： PCR是一种体外DNA 扩增技术,是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的酶促合反应,将待扩增的DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物经“高温变性——低温退火——引物延伸”三步反应的多次循环,使...
合肥市13835556197： 简并引物PCR是根据蛋白质的氨基酸序列设计一组混合引物来合成相...？
巫聪慢肝： 分子生物学中,同一种氨基酸具有两个或更多个密码子的现象称为密码子的简并性(degeneracy).这样的序列就叫简并序列
合肥市13835556197： 什么是聚核酶链式反应? - ？
巫聪慢肝： 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,英文缩写PCR)是利用DNA片段旁侧两个短的单链引物,在体外快速扩增特异DNA片段的技术.该方法利用双链DNA在不同温度具有不同的生物特性(94摄氏度双链完全分离,72摄氏度对应性吸附,55摄氏度双链结合)在3个温度区反复循环,使反应液中特定的微量片断得以大量扩增.
合肥市13835556197： 什么是pcr检测 - ？
巫聪慢肝： 定量PCR(PolymeraseChainReaction)技术有广义概念和狭义概念.广义概念的定量PCR技术是指以外参或内参为标准,通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测,进行PCR起始模板量的定量.
合肥市13835556197： 什么是PCR扩增技术 - ？
巫聪慢肝： 基因扩增技术(PCR)聚合酶链反应(polymerase chain reaction简称PCR)又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新.可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力,能检测单分子DNA或对每10万个细胞中仅含1个靶DNA分子的样品,因而此方法立即在分子生物学、微生物学、医学及遗传学等多领域广泛应用和迅速发展.由于PCR具有敏感性高、特异性强、快速、简便等优点,已在病原微生物学领域中显示出巨大的应用价值和广阔的发展前景.
