荧光定量pcr原理
荧光定量pcr原理是：在PCR扩增反应体系中加入荧光基团，通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。开始时，探针完整地结合在DNA任意一条单链上，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收，检测不到荧光信号；PCR扩增时，Taq酶将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号。
荧光定量PCR的应用
1、核酸定量分析
对传染性疾病进行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的检测。
2、基因表达差异分析
比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异 ( 如药物处理、物理处理、化学处理等 ) ，特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA芯片或差显结果的确证。
3、SNP检测
检测单核苷酸多态性对于研究个体对不同疾病的易感性或者个体对特定药物的不同反应有着重要的意义，因分子信标结构的巧妙性，一旦SNP的序列信息是已知的，采用这种技术进行高通量的SNP检测将会变得简单而准确。
实时荧光定量PCR的原理
所谓实时荧光定量PCR技术 ，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。检测方法1.SYBRGreenⅠ法：在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会...
qpcr原理
qPCR原理 实时荧光定量聚合酶链式反应是一种分子生物学技术，其原理是在PCR反应体系中加入荧光染料或特异性探针，通过监测荧光信号的强度变化来实时监测PCR扩增过程，并通过对扩增曲线的分析来实现对初始模板量的定量分析。一、PCR扩增与荧光信号检测 PCR过程中，随着反应的进行，目标DNA序列不断扩增，这些扩增...
实时荧光定量PCR技术的原理什么?
其原理是在实时荧光定量 PCR 反应中，引入了一种荧光化学物质，随着 PCR 反应的进行， PCR 反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。
荧光定量PCR—荧光篇
荧光定量PCR技术是一种高效且实时的定量分析方法，它通过在PCR反应中加入荧光化学物质，监测PCR过程中的荧光信号变化，实现对目标模板的精确计数。技术上，分为荧光染料法和荧光探针法两种。荧光染料法利用荧光染料SYBR GreenⅠ，染料与DNA双链结合时产生荧光信号，PCR扩增过程中，荧光信号强度随产物增加而增强...
qrt-pcr原理
实时荧光定量PCR原理 实时荧光定量PCR是一种分子生物学技术，它通过监测PCR反应过程中荧光信号的强度来实时监测目标基因的扩增情况，并通过对荧光信号的定量分析实现对目标基因表达水平的精确测定。原理详解：1. PCR扩增过程：在PCR反应过程中，随着反应的进行，目标基因片段不断扩增，复制产生更多的DNA分子。2...
荧光定量PCR(一)— 基础介绍
由于目前不同荧光定量PCR仪的原理和提供的检测光光谱范围的差异，因此在选择探针的发光基团和淬灭基团时一定要根据所用的仪器型号设置的可检测的荧光信号范围内选择（探针法可连接我们的荧光定量PCR试剂盒的编号及对应的机器型号）由淬灭基团TAMRA、Eclipse或BHQ系列染料组成的双标记荧光探针常常被用作水解探针...
什么是实时荧光定量PCR,检测指标是什么?
检测指标是：各样品的目的基因和管家基因分别进行Realtime PCR反应。PCR产物与 DNA Ladder在2%琼脂糖凝胶电泳，GoldView染色，检测PCR产物是否为单一特异性扩增条带。原理：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针...
qpcr原理
实时荧光定量PCR（qPCR）即在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过Cq值和标准曲线对起始模板进行定量分析的方法。根据Real-time qPCR的化学发光原理可以分为2大类：一类为探针类，包括TaqMan@探针和分子信标，利用与靶序列特异杂交的探针来指示扩增产物的增加；一类为非...
实时荧光定量 PCR
实时荧光定量 PCR ,简称 RT-QPCR, 属于 Q-PCR 的一种,目前该技术已得到广泛应用,如:扩增特异性分析、基因定量分析、基因分型、 SNP 分析等。荧光定量 PCR 常用的方法是 DNA 结合染料 SYBR GreenⅠ的非特异性方法。 SYBR Green I 是一种结合于所有 dsDNA 双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的荧光染料, 可与所...
rtpcr和实时荧光定量pcr区别是什么?
至于三者的关系，RT-PCR和实时定量PCR应该都属于PCR，在RNA实验中，这二者都会应用到。例如你要比较2个组织中的某基因的表达差异，首先你要提取2个组织的总RNA，然后通过RT-PCR检测该基因是否在2个组织中有表达，然后通过实时定量PCR测定该基因在2个组织中的表达量是否具有显著性差异。PCR原理：DNA的半...
贠毓扶正：[答案] 聚合酶链式反应 ( PCR) 可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增 .在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过 放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析 .无论定性还是定量分析,分析的...
君山区17524288581： 荧光定量PCR对初始模板量进行定量分析的原理是什么? - ？
贠毓扶正：[答案] 基于以下的理论. 1.每一个循环都会扩增一倍 2.引物扩增的效率一致 所以,如果结果X循环,产物得到了2的X次方.如果起始模板只有一半量,那产物就是2的(x-1)次方.如果起始模板的量是一倍,那产物就是2的(x+1)次方,以此类推. 只要在产物...
君山区17524288581： PCR技术原理是什么? - ？
贠毓扶正： 原发布者:yqjklhq 一.简述PCR基本原理?PCR技术的基本原理 类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右...
君山区17524288581： 定量PCR的过程及原理 - ？
贠毓扶正： http://baike.baidu.com/view/1478017.htm
君山区17524288581： 实时定量PCR基本原理如何? - ？
贠毓扶正： 实时PCR(real—time polymerase chain reaction)又称荧光定量PCR或TaqMan PCR,是美国PE公司(Perkin Elmer)于1995年研制出的一种新的核酸定量技术.该技术在常规PCR基础上运用荧光能量传递(fluorescence resonance energy ...
君山区17524288581： 实施荧光定量PCR的原理及使用方法？
贠毓扶正： 荧光定量PCR所使用的荧光化学可分为两种:荧光探针和荧光染料. 原理: PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团.探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'端-3'端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步.
君山区17524288581： 实时荧光定量PCR与普通PCR的区别是什么?结果有何异同?能说明的问题是什么? - ？
贠毓扶正：[答案] 原理不同:荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光;普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量,一般是紫外光. 反应要求:荧光定量对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp;普通定量可以扩增长点的片段....
君山区17524288581： 求荧光定量PCR分析基因多态性原理及举例,谢谢! - ？
贠毓扶正： 原理:在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法.举例:临床疾病诊断:各型肝炎、艾滋病、禽流感、结核、性病等传染病诊断和疗效评价;地中海贫血、...
君山区17524288581： 荧光定量PCR的 简单解释 - ？
贠毓扶正： 荧光定量PCR是( realtime fluores-cence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度.
