求助RNA提取
Carrier RNA共沉淀剂提取RNA或者DNA同沉淀增加沉淀量体积使沉淀视
举例：
比说现收DNADNA几ng些DNA离沉淀候沉管底看看办候加点DNA共沉淀剂些共沉淀剂跟DNA能发任何反应没相互干扰沉候团管底根据管底否加共沉淀剂做判断目标DNA否沉淀说白共沉淀剂即carrier DNA指示剂作用通间接判断目标DNA或者RNA提取情况
共沉淀剂要些物质跟目标发反应干扰目标跟目标相同沉降系数都作共沉淀剂
用比glycogen酵母RNA 或者 tRNAhenry DNA鲑鱼精DNA线性丙烯酰胺等等
carrier DNARNA干扰目标RNA理化性质总RNA浓度肯定变提取核酸少目标RNA知道知道面
RNA提取步骤及注意事项（仅供参考）：
实验步骤如下：
1.取50—100mg的组织,加入1ml Trizol试剂，用匀浆器打匀(Trizol先放于冰上)。
2.将匀浆室温放置5min。
3.加入200μl氯仿,剧烈震荡混匀30s，冰上静置3min。
4.12000rpm，4℃离心15min。
5.将上清液小心转移到新的1.5ml离心管中（取400μl），加入等量体积的异丙醇，上下颠倒几次混匀，室温下放置15min。（此步中注意：不要吸取任何中间层物质，宁缺勿烂。）
6.12000rpm，4℃离心15min。
7.小心移去上清液，防止RNA沉淀丢失。
8.用70%乙醇（DEPC处理的水配制）洗涤1次，加入700μl乙醇，将RNA沉淀弹起，漂洗。（此时RNA是不溶解的）
9.8000rpm，室温离心10min。
10.尽可能彻底地吸走上清，防止RNA沉淀丢失。
11.真空离心干燥3—5分钟，或放在室温下使乙醇完全挥发掉。
12.沉淀用30μl DEPC-H2O溶解。如发现沉淀难溶，68℃处理10min。
13.RNA检测
(1)测定样品在260nm和280nm的吸光值按1OD=40μg/ml RNA计算RNA的产量。
OD260/OD280在1.8-2.0。
(2)进行甲醛变性琼脂糖凝胶电泳,确定RNA的完整性和污染情况。
注意事项：
1.获得RNA效率低有一下原因
a:样品裂解或匀浆处理不彻底
b:最后得到地RNA沉淀未完全溶解
2.A260/A280＜1.65原因
a:检测吸光度时，RNA样品不是溶于TE，而是溶于水。低离子浓度和低PH条件下，A280值会较高
b:样品匀浆时加地试剂量太少
c:匀浆后样品未在室温放置2分钟
d:水相中混有有机相
e:最后得到地RNA沉淀未完全溶解
3.RNA降解原因
a:组织取出后没有马上处理或冷冻
b:样品或提取地RNA沉淀保存于-5--20度，未在-60--70度保存
c:细胞在胰酶处理时被破坏
d:溶液或离心管未经RBase去处理
RNA提取步骤及注意事项（仅供参考）：
实验步骤如下：
1.取50—100mg的组织,加入1ml Trizol试剂，用匀浆器打匀(Trizol先放于冰上)。
2.将匀浆室温放置5min。
3.加入200μl氯仿,剧烈震荡混匀30s，冰上静置3min。
4.12000rpm，4℃离心15min。
5.将上清液小心转移到新的1.5ml离心管中（取400μl），加入等量体积的异丙醇，上下颠倒几次混匀，室温下放置15min。（此步中注意：不要吸取任何中间层物质，宁缺勿烂。）
6.12000rpm，4℃离心15min。
7.小心移去上清液，防止RNA沉淀丢失。
8.用70%乙醇（DEPC处理的水配制）洗涤1次，加入700μl乙醇，将RNA沉淀弹起，漂洗。（此时RNA是不溶解的）
9.8000rpm，室温离心10min。
10.尽可能彻底地吸走上清，防止RNA沉淀丢失。
11.真空离心干燥3—5分钟，或放在室温下使乙醇完全挥发掉。
12.沉淀用30μl DEPC-H2O溶解。如发现沉淀难溶，68℃处理10min。
13.RNA检测
(1)测定样品在260nm和280nm的吸光值按1OD=40μg/ml RNA计算RNA的产量。
OD260/OD280在1.8-2.0。
(2)进行甲醛变性琼脂糖凝胶电泳,确定RNA的完整性和污染情况。
注意事项：
1.获得RNA效率低有一下原因
a:样品裂解或匀浆处理不彻底
b:最后得到地RNA沉淀未完全溶解
2.A260/A280＜1.65原因
a:检测吸光度时，RNA样品不是溶于TE，而是溶于水。低离子浓度和低PH条件下，A280值会较高
b:样品匀浆时加地试剂量太少
c:匀浆后样品未在室温放置2分钟
d:水相中混有有机相
e:最后得到地RNA沉淀未完全溶解
3.RNA降解原因
a:组织取出后没有马上处理或冷冻
b:样品或提取地RNA沉淀保存于-5--20度，未在-60--70度保存
c:细胞在胰酶处理时被破坏
d:溶液或离心管未经RBase去处理
CTAB法提取RNA的原理
CTAB是一种阳离子去污剂,可以有助于细胞裂解并具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol\/L NaCl)，由于溶解度差异，CTAB与多糖形成复合物沉淀，但核酸仍可溶。通过有机溶剂抽提，去除蛋白，酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来 ...
求提取毒种RNA方法
给你推荐个RNA提取辅助试剂，外源RNA酶清除剂，避免台面，洗头，离心管这样的耗材引入的外源性RNA酶对RNA的降解。华越洋生物 提取病毒RNA，建议你买一个我们公司的病毒RNA提取试剂盒。绝对好使。
RNA提取中加入氯仿和异丙醇的原因
氯仿的作用有多个方面,一是作为有机溶剂变性蛋白,使其沉淀并通过离心除去,同时也通过变性作用抑制RNase活性;二是RNA提取试剂中通常含有苯酚(Trizol主要成分就是苯酚,很多自己配试剂提的方法也用苯酚,抽提蛋白时也会用到苯酚),苯酚微溶于水,抽提烷之后水相里有痕量的酚,如果不除去会损伤核酸,需要通过氯仿把水相里参...
rna提取-80度可以助沉淀吗
可以。在rna提取的介绍下，是进行防止混乱，可以助沉淀。rna存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体，由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。
做植物RNA的提取,结果都不好,这是什么原因呢?
出现DNA污染，RNA降解。用华越洋生物的植物RNA提取试剂盒，超快，绝无DNA污染。华越洋生物，核酸提取试剂领导者！
提取rna过程的氯仿有什么替代物
辅助试剂100ml。因为辅助试剂100ml和氯仿的结构相似，成分也比较相似，用法也一致，所以可以使用辅助试剂100ml来代替氯仿。辅助试剂100ml在使用的时候毒性较小，而且使用的时候可以减少DNA污染RNA的可能性。
rna提取中胍盐污染原因
核糖核酸酶(RNA酶)的污染。根据提取中胍盐规范得知，rna提取中胍盐使用的是苯酚-胍盐法，失败主要原因是核糖核酸酶(RNA酶)的污染，辅助因子破坏原本的反应条件，导致出现污染的情况。核糖核酸，存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。
小鼠精子中RNA的提取应该注意什么
小鼠精子中RNA的提取应该注意什么 动植物样品的采集及DNA 样品的提取 1 动物样品的采集及处理方法 遗传学数据在野生动物和圈养动物的保护和管理中变得日益重要。在本文中，我们总结了 一些能简便而有效地获得样品及数据的方法。我们在采集样品之前，最好对将要进行的遗传学分析有所了解。然而，采集者并非...
在提取总RNA和反转录的过程中,如何避免RNase的污染
生物通ebioTips 4：溶液残留的痕量DEPC会通过羧甲基化修饰RNA嘌呤基团，羧甲基化修饰RNA在无细胞体系中翻译效率非常低。不过除非大量的嘌呤基团被修饰，通常这种羧甲基化修饰RNA和DNA或者RNA之间的杂交性不受明显影响。所以，对于0.1%的DEPC，一定要100度加热处理15分钟以上去除溶液中的DEPC，再进行RNA相关...
在牛肝中提取RNA时,要注意些什么问题
一些RNA提取方法,在进行具体实验时,应根据研究对象的性质,提取核酸的用途而对上述方法在操作步骤和试剂使用量上作一定的修改。1、 在核酸提取时,为了增加细胞的裂解度,增加核蛋白复合体破碎度,以释放更多的游离核酸,在操作中常要用到溶菌酶和蛋白酶K,在确保没有核酸水解酶存在的前提下,酶反应时间越长越好。2、 ...
祗阀炎琥： 总RNA提取试剂盒步骤: 1. 样品处理:a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀. b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理. c. 贴壁细胞:...
定边县14712613963： 求助QIAGEN试剂盒提取总RNA的步骤 - ？
祗阀炎琥：[答案] 植物材料用最精确的方法,称取不超过100mg的植物材料,置于处理过的研钵,加入液氮进行研磨将研磨得到的粉末,快速转移至无RNase,并经过液氮冷却的2mL离心管(自备),注意材料要保持冷冻状态加入450µL Buffer RLT(1...
定边县14712613963： 提取RNA提取不出来求助 - ？
祗阀炎琥： 1. 保证细胞数量要足够,提取的时候细胞应该铺70%以上. 2.细胞裂解很关键,详细按照试剂盒的要求操作,保证有足够的裂解时间. 3.试剂使用要规范,要严格使用进口无RNA酶的枪头进行操作. 4.特此强调洗脱RNA的水一定要干净无RNA酶. 如果还不能提取出来,可以更换提取方法,比如TRZOL法或者更换试剂盒
定边县14712613963： 怎么从病毒中提取RNA核酸? - ？
祗阀炎琥： 首先要把病毒的外壳蛋白质去掉 可以使用蛋白酶
定边县14712613963： 求助QIAGEN试剂盒提取总RNA的步骤?? - ？
祗阀炎琥： 求助QIAGEN试剂盒提取总RNA的步骤样品处理:a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀.b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理.c. 贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液.用取样器吹打混匀.
定边县14712613963： Trizol法提取RNA操作步骤? ？
祗阀炎琥： 动植物总RNA提取-Trizol法 Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.用Trizol法提取的总RNA绝无蛋白和DNA污染.RNA可...
定边县14712613963： 小鼠胚胎RNA提取求助 - ？
祗阀炎琥： rna提取相对比dna提取要难点,建议用成品试剂盒.如果经费限制,可以使用DEPC处理,去除RNA.目前经常用的方法是传统的酚氯仿抽提、离心柱、磁珠法等.都是比较成熟的方法,如果需要可以直接私信
定边县14712613963： 溶在乙醇中的RNA如何再提取 - ？
祗阀炎琥： 加入1/10体积的NaAc(3M)和2ul糖原-80℃或-20℃放置1小时,然后于低温离心机4℃离心(13000rpm、20min),倒掉乙醇(注意不要倒掉沉淀),然后加入500ul75%乙醇溶液洗涤沉淀,低温离心(13000rpm,5min),然后将乙醇溶液吸干并晾干,接着就可以用DEPC水或RNase free水溶解沉淀即可~
定边县14712613963： 求问[求助]提取总RNA必须要用多少pH值的苯酚?? - ？
祗阀炎琥： ??不是只用TRIZOL,氯仿,异丙醇,75%乙醇,RNase-free water就行了吗?还要用苯酚吗?djrhewc(站内联系TA)我们好像也没用到...linxi8579(站内联系TA)我们提RNA是用的试剂盒,好像里面也没有苯酚.就是有裂解液,洗脱液,漂...
定边县14712613963： 求助提取RNA 糖原使用 - ？
祗阀炎琥： Make 10 mg/ml of RNase free and DNase free glycogen in ddH2O. Add 1 or 2 microliters of glycogen and one tenth volumes of 3 M sodium acetate, pH 5.3 before adding 100% ethanol, instead of isopropanol, to precipitate RNA. It doesn't make ...
