单克隆抗体的制备流程是怎样的

作者&投稿:贸逃 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
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1.对小鼠注射特定的抗原蛋白,使小鼠产生免疫反应;

2.得到相应的B淋巴细胞;

3.将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,再用特定的选择培养基进行筛选;

4.在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂种细胞才能生长(这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体);

5.对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选,就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞;

6.最后,将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,或注射到小鼠腹腔内增殖,这样,从细胞培养液或小鼠腹水中,就可以提取出大量的单克隆抗体了!







单克隆抗体的制备过程
过程 1)免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb\/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。2)骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前,骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选,防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性(恢复HGPRT的活性的细胞不能...

单克隆抗体的制备工艺流程和单克隆抗体特点是什么?
将纯化过的抗原注射进小鼠等试验动物血液,产生免疫后提取其浆细胞和骨髓瘤细胞融合,培养、稀释、再分开培养直到制得单细胞群后提取分泌产物能和抗原结合的,保留培养物大量繁殖,培养液中即可提取大量单克隆抗体。特点:灵敏度高,专一性强,主要用于诊断、检定,也可用于治疗。

小鼠单克隆抗体的制备过程是怎样的?义翘神州可以提供抗体制备服务...
小鼠单克隆抗体的制备通常涉及以下流程步骤:免疫小鼠:选择一种目标抗原,并将其注射到小鼠体内,以刺激其免疫系统产生特异性抗体。通常会在一定时间间隔内多次免疫小鼠。提取脾细胞:等小鼠产生了足够的抗体后,通过牺牲小鼠,取出其脾脏并将其分离为单个细胞。融合:将小鼠脾细胞与肿瘤细胞(如SP2\/0或NS0...

制备单克隆抗体时,选择培养基要选择融合的( )。
【答案】:B 单克隆抗体技术的流程为:①小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞在聚乙二醇(PEG)作用下发生细胞融合;②加入HAT选择培养基(含H、A和T)后,未融合的骨髓瘤细胞因其从头合成途径被氨基蝶呤阻断,而又缺乏HGPRT不能利用补救途径合成DNA,从而死亡;③未融合的脾细胞难以在体外培养而死亡;④融合细胞因...

制备单克隆抗体常用什么作为诱导剂
制备单克隆抗体常用的诱导剂有:化学诱导剂——聚乙二醇(PEG)、生物诱导剂——灭活的病毒(常用灭活的仙台病毒)。具体操作方法如下:(1)仙台病毒法融合:①两种细胞在一起培养,加入病毒,在4℃条件下病毒附着在细胞膜上。并使两 细胞相互凝聚;②在37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到...

简述单克隆抗体的制备方案,流程应用和优点!(急,急,急!)
1.向生物体内注射抗原,使其发生免疫反应。2.从血液中分离已免疫的效应B细胞。3.培养骨髓瘤细胞。4.把骨髓瘤细胞和效应B淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞。5.筛选并培养杂交瘤细胞,产生单克隆抗体。优点:纯度高,特异性强,在疾病诊断上准确,高效,简易,快速。

单克隆抗体技术的程序
(1) 抗原制备。制备单克隆抗体的免疫抗原,从纯度上说虽不要求很高,但高纯度的抗原使得到所需单抗的机会增加,同时可以减轻筛选的工作量。因此,免疫抗原是越纯越好,应 根据所研究的抗原和实验室的条件来决定。一般来说,抗原的来源有限,或性质不稳定,提纯时易变性,或其免疫原性很强,或所需单抗...

如图为单克隆抗体制备流程示意图.(1)单克隆抗体制备技术的基础是...
(1)单克隆抗体制备技术是动物细胞融合技术的应用之一,其基础是动物细胞培养.(2)细胞融合是随机的过程,在HAT培养基中培养,目的是筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞).在细胞培养过程中,培养液中需要添加无机盐,但要注意无机盐的种类和浓度,关注培养基的渗透压和营养充沛,...

单克隆抗体的制备过程
即可获得大量单克隆抗体。(2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。各种新型培养技术和装置不断出现,大大提高了抗体的生产量。【百度百科】...

大量单克隆抗体的制备方法?
背景 BACKGROUND 困惑 PUZZLED 体外培养法有哪几种培养方式?何谓无血清培养?探索 在体外培养法中,目前各个实验室普遍采用细胞单层法,就是将杂交瘤细胞加入培养瓶中,用完全培养基培养,细胞浓度以1.0X100~2.0X106个\/mL为宜,然后收集培养上清液。如果希望在体外高效率地大量制备单克隆抗体,就必须高...

自流井区13462143419: 简述单克隆抗体的制备过程 -
芷胜替尼:[答案] 1.对小鼠注射特定的抗原蛋白,使小鼠产生免疫反应;2.得到相应的B淋巴细胞;3.将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,再用特定的选择培养基进行筛选;4.在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只...

自流井区13462143419: 下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图 -
芷胜替尼:[答案] 抗原制备——动物免疫——细胞融合——筛选建株——抗体生产

自流井区13462143419: 制备单克隆抗体的技术流程是怎样的呢?
芷胜替尼: (一)抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗... 次日一般即为对数生长期细胞. 图11-2杂交瘤技术制备单克隆抗体的流程 在体外培...

自流井区13462143419: 单克隆抗体制作步骤?
芷胜替尼: 单克隆抗体制作简要步骤:1,抗原准备;2,动物免疫;3,B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合;4,杂交瘤细胞的筛选;5,阳性杂交细胞克隆化;6,大规模单克隆抗体的制备.

自流井区13462143419: 下列是制备分泌抗原X抗体的过程,根据右图解回答问题: ⑴.制备单克隆抗体的步骤: ①将              注入小鼠体内,从小鼠脾脏中获... -
芷胜替尼:[答案] ⑴ ① 抗原 ③ 选择性 ④ 产生专一抗体又能无限增殖⑵ 特异性强、灵敏度高 ⑶ B淋巴 蛋白质

自流井区13462143419: 单克隆抗体制备过程是怎么样的?
芷胜替尼: 骨髓瘤细胞用10%小牛血清的培养液在细胞培养瓶中培养,融合前24h换液一次,使骨髓瘤细胞处于对数生长期

自流井区13462143419: 如图是单克隆抗体制备流程阶段示意图.(1)___技术是单克隆抗体技术的基础.给小鼠注射特定抗原的目的是___.(2)与血清抗体相比,单克隆抗体的优点是... -
芷胜替尼:[答案] (1)细胞培养技术和细胞融合技术是单克隆抗体技术的基础.给小鼠注射特定抗原的目的是诱导产生能产生抗体的浆(B)细胞. (2)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,其最大的优越性是特异性强,灵敏度高,可以体外大量制备. (3)图中培养基属于...

自流井区13462143419: 运用动物细胞工程技术制备单克隆抗体的正确操作步骤是()①筛选杂交瘤细胞 ②制备特异性抗原 ③免疫动物 ④制备免疫的细胞和骨髓瘤细胞 ⑤能产生特... -
芷胜替尼:[选项] A. ②④③⑦⑤①⑥⑧ B. ②③④⑦①⑤⑥⑧ C. ④③⑦②⑤①⑧⑥ D. ③④⑦①⑤⑧⑥②

自流井区13462143419: 如图是单克隆抗体制备的过程,请据图回答下列问题.(1)单克隆抗体制备的技术原理有___和___.(2)从小鼠体内提取B淋巴细胞之前,需对小鼠___.(3)... -
芷胜替尼:[答案] (1)单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术,它们的原理依次是细胞膜的流动性和动物细胞增殖. (2)从小鼠体内提取B淋巴细胞之前,需对小鼠注射特异性抗原,使小鼠发生免疫反应产生相应的B淋巴细胞. (3)诱导原生质...

自流井区13462143419: 如图是单克隆抗体制备过程示意图.(1)制备单克隆抗体常用的动物细胞工程技术有 - _ - 和 - __.(2)在制备单克隆抗体过程中,首先要将 - __注入小鼠体... -
芷胜替尼:[答案] (1)单克隆抗体的制备过程涉及的技术有细胞培养技术和细胞融合技术. (2)在制备单克隆抗体过程中,首先要将特定的抗原蛋白注入小鼠体内,然后从小鼠脾脏中获得B淋巴细胞. (3)图中培养基属于选择培养基,用来筛选杂交瘤细胞.只有杂交瘤才...

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