x-a-gal检测双杂交

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x-a-gal加完酵母平板可以直接用吗
X-α-Gal,是一种酵母半乳糖苷酶(MEL1)的显色底物,用于在培养基上直接检测GAL4系统的酵母双杂交作用。

x-a-gal工作浓度
4mg\/mL。根据道客巴巴官网相关查询得知,x-a-gal工作浓度为4mg\/mL。浓度,是分析化学中的一个名词,含义是以1升溶液中所含溶质的摩尔数表示的浓度。

用Gal4系统做酵母双杂,显色反应用的X-a-Gal能不能用X-Gal代替?
显色反应只能用的X-a-Gal,不能用X-Gal代替。如果你来不及的话,可以用其它方法判定,在产品说明书上一般都有代替方法。

x-a-gal四缺培养基应该放多少度
37℃下存放和使用。该培养基的组成中包含了葡萄糖、大肠杆菌酶(B-gal)、异硝酸钠、氯化钴、x-a-gal以及四种不同抗生素,可以用于筛选含有外源基因插入的大肠杆菌克隆体。在使用该培养基时,应将其加热至70℃左右,快速冷却后加入所需抗生素,混匀后倒入平板,然后存放在37℃下,等待大肠杆菌菌落的...

x-α-gal怎么配
准备溶液、稀释溶液、定容溶液。1、准备溶液:将24mg的X-α-Gal溶解在6mL的二甲基甲酰胺(DMF)中,使终浓度为4mg\/mL。2、稀释溶液:使用适量的DMF将上述溶液稀释至总体积为1升,加入适量的三乙胺。3、定容溶液:使用经DEPC处理过的水将稀释后的溶液定容至10ml标记线处。此步骤中的pH值应大约在7-...

蛋白相互作用研究方法有哪些?
酵母双杂交,Yeasttwo hybrid(Y2H), 这是一个古老的技术,Stanley Fields 和 Ok-KyuSong 在 1989 年的时候利用大肠杆菌中 GAL4 乳糖操纵子的原理,开发出这个方法用于检测蛋白质之间的相互作用 。GAL4 操纵子有两个结构域,BD(binding domain)结构域和 AD(activation domain),其中 BD 结构域可以结合在 UAS(...

X-α-Gal的量容
408.64 g\/mol报告基因Mel表达后,在含X-α-Gal的平板上显蓝色 A)涂布于预制平板: 溶解24mg X-α-gal 于6 mL DMF中得到终浓度为4 mg\/mL的溶液。B)直接加入琼脂中: 溶解60mg X-α-gal 于3 mL DMF中得到终浓度为20 mg\/mL的溶液。

一个以A开头的GalGame男主只有一条腿女主是机器人。很感人,2019年1月...
ATRI:My Dear Moments,国内翻译亚托莉:我挚爱的时光

酵母双杂交法的原理?
酵母双杂交法的原理:典型的真核生物转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating domain)。前者可识别DNA上的特异序列, 并使转录激活结构域定位于所调节的基因的上游, 转录激活结构域可同转录复合体的其他成分...

如何用酵母双杂交系统探究蛋白质的功能
这些改造后的基因在启动子区有相同的转录激活因子结合位点, 因此可以被相同的转录激活因子(如上述的Gal4蛋白)激活。 通过这种双重或多重选择既提高了检测灵敏度又减少了假阳性现象。 其他还有针对“诱饵”或“猎物”表达载体等所作的改进, 这里不一一详述。在双杂交鉴定过程中要经过两次转化, 这个工作量...

厍皇13870014823问: 用Gal4系统做酵母双杂,显色反应用的X - a - Gal能不能用X - Gal代替? -
墨脱县双鹭回答: 显色反应只能用的X-a-Gal,不能用X-Gal代替.如果你来不及的话,可以用其它方法判定,在产品说明书上一般都有代替方法.

厍皇13870014823问: 酵母双杂交系统到底是啥回事?有啥用 -
墨脱县双鹭回答: 酵母双杂交系统由Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立 i .典型的真核生长转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating ...

厍皇13870014823问: 酵母双杂交的具体过程是什么?(中文) -
墨脱县双鹭回答: 菌株与质粒AH109酵母菌株(MATa,trp1. 901,leu2—3,112,ura3-52,his3-200,gal4A,gal8O~X, LYS2::G地1U^s-GALlT^T^-HIS3, G U^s—GAI2T^T^- ADE2,URA3::h吐1U^s.h吐1T^T^.1acZ),YM187酵母 菌株(NATQ,um3-52,his3-200,ade2—101,trpl-...

厍皇13870014823问: 为什么X - gal被半乳糖苷酶分解后有颜色?产物是什么? -
墨脱县双鹭回答: X-gal也称 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,X-Gal是β-半乳糖苷酶的显色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物.常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选. β-半乳糖苷酶与Xgal显色反应是通过b-半乳糖苷酶能把无色的化合物Xgal分解成半乳糖和一个深蓝色的物质5-溴-4-氯靛蓝

厍皇13870014823问: X - Gal的介绍 -
墨脱县双鹭回答: X-gal也称5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside或5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside,X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的显色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物.常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选.

厍皇13870014823问: ...处理,使其处于能吸收周围DNA的状态,这种细胞称为___细胞.(3)在相同条件下的培养基中,菌落___(填序号)颜色一定为白色的.(4)检测菌落③中... -
墨脱县双鹭回答:[答案] (1)构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,能遗传给后代,并表达和发挥作用. 基因工程的操作均是... 不能表达产生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,菌落颜色为白色. (4)检测菌落③中的目的基因是否表达的第一步(...

厍皇13870014823问: 许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ'基因,其编码的产物β - 半乳糖苷酶在X - gal和IPTG存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色.基因工... -
墨脱县双鹭回答:[选项] A. 基因工程中,构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,能遗传给后代,并表达和发挥作用 B. 转化过程中,大肠杆菌应先用Ca2+处理,使其能够吸收周围DNA的状态 C. 菌落颜色为白色的是菌落② D. 菌落③中的目的基因是否表达,可采用的检测办法是抗原-抗体杂交

厍皇13870014823问: loxp位点的插入会影响基因的表达吗 -
墨脱县双鹭回答: loxp位点的插入会影响基因的表达目的采用大肠杆菌β-半乳糖酶基因LacZ作为报告基因,建立Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶含有loxp位点的转基因小鼠.与不同组织特异性Cre小鼠杂交,获得时空性表达Tyro3、Axl的转基因小鼠,为研究其在各个组织...

厍皇13870014823问: (2012•泰州三模)许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ'基因,其编码的产物B - 半乳糖苷酶在X - gal和IPTG 存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌... -
墨脱县双鹭回答:[答案] (1)基因工程的核心步骤是构建基因表达载体,目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,能遗传给后代,并表达和发挥作用... 在X-gal和IPTG 存在下,菌落颜色为白色. (5)检测目的基因是否表达产生蛋白质,可采用抗原一抗体杂交法. 故答案:(1...


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