trizol+ambion

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谏闸19241908888问： Trizol抽总RNA对做miRNA芯片有影响吗?抽提过程是否会损失部分miR,怎样避免? - ？
汝州市唯新回答： 肯定会损失了 但样品量多一点的话 影响不大

谏闸19241908888问： 怎样用TRIzol 法提取动物血清总RNA - ？
汝州市唯新回答： 1、将组织在液氮中磨成粉末后,再以50-100mg组织加入1ml的Trizol液研磨;每2E6个细胞加入1mLTrizol.注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%.2、研磨液室温放置5min,然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿,盖紧离心管...

谏闸19241908888问： trizol法提取血中的RNA,怎样做量会更多？
汝州市唯新回答： 1 血要新鲜.如果是冻存的,在解冻时要完全,之后再加Trizol. 2 可以稍多加一些Trizol,少加些血.混匀之后放置10分钟左右,直接加三氯甲烷,混匀再去离心. 可以不用先离心去沉淀之后再加三氯甲烷. 3 每个步骤操作要快,用的时间药短些,防止降解 4 异丙醇沉淀的时候,放-20°C的冰箱半个小时,或再适当延长一点时间.迅速离心,之后加75%乙醇.只洗一遍,洗2遍易损失部分RNA. 5 不要过分干燥,管内稍有点残余的乙醇也没关系.干燥一会就迅速加DEPC水少量.一般我都加的30.如果需要浓度高点可以少加水. 6 提取RNA之后迅速反转录成cDNA再保存. RNA直接冻存会降解.也会影响以后反转的效率.

谏闸19241908888问： 如何提取芦荟RNA 最好是苯酚法？
汝州市唯新回答： 动植物组织mRNA提取: 一、材料 水稻叶片或小鼠肝组织. 二、设备 研钵,冷冻台式高速离心机,低温冰箱,冷冻真空干燥器,紫外检测仪,电泳仪,电泳槽. 三、试剂 1、无RNA酶灭菌水:用将高温烘烤的玻璃瓶(180℃ 2小时)装蒸馏水...

谏闸19241908888问： trizol成分作用是什么 - ？
汝州市唯新回答： 在收集到生物材料之后,最好能即刻进行RNA制备工作.若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃冷冻柜.在制备RNA时,将储存于冷冻柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破细胞,不可以先行解冻,以避免...

谏闸19241908888问： Trizol法提取流感病毒 RNA - ？
汝州市唯新回答： 1、取200ul样品数+阴性对照+阳性对照加入1.5ml灭菌eppendorf管;2、加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀;3、13000rpm离心15min;4、在第3步离心快结束时,另取同样多eppendorf管,加入400ul于-20℃...

谏闸19241908888问： 用trizol提取rna时,为什么dna不会溶解在水相 - ？
汝州市唯新回答： 提取RNA时如何去除DNA的污染的方法: 注意实验室的标准化问题,注意污染的存在,同时严格按照说明书上的操作应该没有 问题.发现DNA污染,用DNAse I 消化1小时,37度 离心取上清的时候,一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体...

谏闸19241908888问： 想请教用过Trizol法提取RNA,且结果比较理想的详细步骤及注意事项,是否可以共享一下,谢谢 - ？
汝州市唯新回答： 我这边刚好在做,给你说下: 贴壁细胞的话去培养液,PBS洗一遍,加Trizol吹打下来.组织的话,在液氮里面捣碎,然后粉末放进Trizol,用超声粉碎器粉碎(超声每3秒,停10秒冷却,直到看不见组织碎末). (此步骤可以-80oC冻存,下面...

谏闸19241908888问： TRIzol法提取流感病毒RNA每个步骤详细注意事项? - ？
汝州市唯新回答： 三、Trizol法提取法(这是提禽流感病毒的步骤,供参考) Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.1、取鸡胚尿囊液,加入5-10倍体积Trizol液,混匀;2、室温放置5分钟,然后以每1ml Trizol液加...

谏闸19241908888问： trizol法提取RNA分成的三相分别是什么 - ？
汝州市唯新回答：[答案] 上层无色,接近透明色的为RNA;中层白色(很薄)的为DNA;下层红色的为蛋白质.基本的层次和颜色是这样的,但是植物材料考虑到色素的问题,颜色会有细微的差异.三相中DNA最薄,另外两相差不多,RNA相比蛋白质厚一点.

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