rna逆转录实验报告
什么是进入休眠期的骨骼~~
1970年,梯明发现了仅以RNA作为遗传物质的逆转录病毒,提示遗传物质不仅仅是DNA,也可以是RNA,从而使...随后,基因的这种可分割、不连续的现象在酵母tRNA基因、果蝇的 n3NA基因、人的胶原蛋白基因中也得到了...从此之后,有关染色体的研究报告层出不穷。人们发现同一物种所有个体的染色体对数是相同的、稳定的,并且...
HK-2细胞培养,人肾皮质\/近曲小管细胞培养攻略
探索肾脏的秘密实验室:HK-2细胞培养全攻略1994年,科研界的里程碑诞生了——HK-2,一个由MJ Ryan等人精心构建的人肾皮质\/近曲小管细胞系。它的诞生,源自对正常肾脏组织的深度剖析,通过将近端肾小管上皮细胞暴露于HPV16 E6\/E7基因重组逆转录病毒感染,历经一年无血清的严格考验,这个细胞系在科研...
全球有3800万人感染艾滋病,每年死亡人数超过100万
尤其是对年轻非洲人群的关怀和治疗力度。生存的希望:抗病毒治疗与未来 尽管挑战重重,抗逆转录病毒疗法的普及已大大改善了患者的生活质量和预期寿命。据NA-ACCORD研究,20岁开始治疗的HIV感染者,有望活到70岁出头。这提醒我们,及早检测和治疗是战胜艾滋病的关键,也是每个感染者延续生命的希望所在。
转录组文章 | 盐碱胁迫篇
并且比较了两个品种的转录组动态。共鉴定出2,859个差异表达基因,其中青花45差异表达基因数量明显少于碧雨春花。VDAC促进Ca2+的释放,间接促进Na+通过SOS2途径向液泡转运。阳离子\/H(+)逆向转运蛋白17和V-H + - ATP酶促进Na+和H+的交换,维持Na+在液泡内,从而减轻盐胁迫对植物的伤害。半乳糖醇合成酶和可溶性蛋白...
想要07和08年上海高考的生物试卷
(2)在实验三的四种物质A.B.C.D和过程①、②、③、④中:1)能发生半保留复制的物质是___;碱基组成与功能相同的物质有___和___(用图中字母回答)。2)有解旋发生的过程是___,有逆转录酶参与的过程是___,会发生碱基序列—UAC—和—AUG—配对的过程是___。(用图中标号回答)(3)实验四,若B注入到同样...
基因排斥现象解决设想
1969年,夏皮罗等人从大肠杆菌中分离到乳糖操纵子并使它在离体条件下转录。证实了一个基因可离开染色体而独立发挥作用。1970年,梯明发现了仅以RNA作为遗传物质的逆转录病毒,提示遗传物质不仅仅是DNA,也可以是RNA,从而使中心法则内容得到扩展。时隔20年后的1977年,人们又在猿猴病毒(SV。)和腺病毒(...
如何测定一段已知序列DNA的旁侧序列
利用浓度已知且与待测靶mR-NA序列相同的内对照mRNA(其片段长短不同,便于PCR扩增后产物的分离),在同一体系中,用相同的由32P标记的引物与待测mRNA一同进行逆转录和PCR扩增,扩增产物电泳后,分别测定二者产物放射性强度,由预先制备的标准曲线推算出每个样本特异mRNA的量。Gilliland等的结果表明,在1ng总RNA中可以对小于1...
寻06上海生物高考试卷
(5)Na+ 动作36.(11分)(1)见右图(2)4(3)2(4)43.6(5)光照强度 温度和CO2浓度37.(8分)(1)1)逆转录 2)mRNA 转录 3)多肽(或蛋白质)(2)小鼠上皮细胞 病毒RNA 密码子 RNA→DNA→mRNA→蛋白质38.(9分)(1)生物成分和非生物成分(2)1)常绿乔木 浮游植物 2)温度和雨量 矿质营养 3)C 4)海洋生态...
nm23-H1基因转染L9981肺癌细胞前后基因表达谱的变化_途观L
(Labonchip检测)具体操作步骤参考人cD- NA表达谱芯片使用手册,SBC-H―HC-100-22,具 体结果见《样品质检报告》。Lab-on-chip参照Agi- lent 2100分析仪...细胞因子与转录因子13条,细胞信号与蛋白相 关基因38条,细胞外基质与骨架蛋白9条,在表达 下调的基因中有541条功能不明的基因,而已知基 因有101条,其中...
端粒及端粒酶的结构功能及生理意义
2.2 针对端粒酶的逆转录酶性质抑制端粒酶活性 端粒酶实际上是一种特殊的专一逆转录酶. Strahl �et al〔16〕�以人B细胞系的JY616细胞和T细胞系的Jurkat E6-1细胞(这两种细胞均表现端粒酶活性)为研究对象,考察已知的反转录病毒逆转录酶抑制剂是否会影响这些细胞的端粒长度和培养时的生长速率. 实验表明,ddG可以...
额济纳旗迪尔回答:[答案] 你按照买的反转录试剂盒来做就行.(1)、从细胞中提取细胞总RNA用GIBCO公司的Trizol试剂提取细胞总RNA.按试剂使用说明操作:离心收集细胞,倾去细胞液,向沉淀中加1 ml Trizo1(每106-107细胞),混匀至室温5分钟,用1 ml加...
机窦15233572567问: 我做的实验是提取总的RNA,然后反转录,再PCR,最后出来的结果是这样的见图,我的目的条带为500bp?
额济纳旗迪尔回答: 这就是特异性不好,建议做如下改进:1,控制好RNA提取过程,尽量减少RNA降解和基因组DNA的混入;2,严重怀疑你的模板量过高,把模板稀释10-1000倍的梯度试试;3,做二阶段温度pcr,先用稍高退火温度p上5循环,剩余的再用你现在的温度,或者有梯度pcr仪的话,做梯度pcr;4,如果镁离子浓度较高,可稍降镁离子浓度.若有疑问,欢迎继续讨论,纯属手打,欢迎采纳,祝实验顺利!
机窦15233572567问: 生物.讲一下RNA逆转录过程?
额济纳旗迪尔回答: 在逆转录酶作用下以dNTP为底物,RNA为模板,tRNA为引物,按5′→3′方向,合成一条与RNA模板互补的DNA单链,它与RNA模板形成RNA DNA杂交体.随后又在反转录酶的作用下,水解掉RNA链,再以此DNA为模板合成第二条DNA
机窦15233572567问: RNA是如何反转录成cDNA的?过程和原理怎样?请教 - ?
额济纳旗迪尔回答: 操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水 65C反应10min,冰上放置5min后:这一步是让RNA变性,把RNA的二级结构打开; 再加dNTP,RNaseA,BUFFER, MTV逆转录酶, 反应25℃10min:这一步是让反转录引物(oligodT,随机引物)和模板RNA退火结合 37℃60min:这一步是反转录酶的工作温度 70℃10min:这一步是变性,把合成的cDNA和RNA变性开,就拿到单链的cDNA
机窦15233572567问: RNA逆转录的具体过程是怎样的? - ?
额济纳旗迪尔回答: 更正一下tchxb的答案: 先转出与RNA互补的DNA单链,后转出双链DNA RNA首先反转录成cDNA(负链DNA),构成RNA-DNA中间体.中间体中的RNA再经过RNA酶H水解,而以剩下的负链DNA复制成双股DNA. tchxb的答案基本上是对的.
机窦15233572567问: RNA反转录为cDNA 原理 主要想知道各个水浴、冰浴步骤在实验中的作用 - ?
额济纳旗迪尔回答: 第一次70度水浴5min为让RNA二级结构打开,便于引物结合. 第一次冰浴1min为了退火,让引物能够结合RNA. 37度水域是让cDNA聚合. 第二次70℃水浴是再变性,让引物脱离模板RNA和cDNA第一链. 第二次冰浴是为了让cDNA-RNA复性成为cDNA-RNA杂合双链. 明白没有?
机窦15233572567问: RNA反转录为cDNA 原理 主要想知道各个水浴、冰浴步骤在实验中的作用RNA反转录过程步骤如下:将提取的RNA用DEPC水吹起,加入引物1、引物2,加... - ?
额济纳旗迪尔回答:[答案] 第一次70度水浴5min为让RNA二级结构打开,便于引物结合. 第一次冰浴1min为了退火,让引物能够结合RNA. 37度水域是让cDNA聚合. 第二次70℃水浴是再变性,让引物脱离模板RNA和cDNA第一链. 第二次冰浴是为了让cDNA-RNA复性成为cDNA-...
机窦15233572567问: RNA逆转录生成的是双链DNA吗?为什么? - ?
额济纳旗迪尔回答: 1、先是合成与RNA互补的DNA单链,然后DNA单链在DNA聚合酶的作用下继续合成为DNA双链. 2、逆转录(reverse transcription)是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成.是RNA病毒的复制形式,需逆转录酶的催化. 3、过程:先是以RNA为模版,在逆转录酶的作用下合成与其碱基互补配对的DNA单链,然后再以DNA单链为模版在DNA聚合酶的作用下继续合成双链DNA. 4、逆转录是RNA病毒的复制形式,需要逆转录酶的催化. 5、艾滋病病毒(HIV)就是一种典型的逆转录病毒.
机窦15233572567问: 关于逆转录病毒的RNA - ?
额济纳旗迪尔回答: 逆转录病毒进入细胞能复制DNA. 反转录病毒的最基本特征是在生命过程活动中,有一个从RNA到DNA的逆转录过程,即病毒在逆转录酶的作用下,以病毒RNA为模板,合成互补的负链DNA后,形成RNA-DNA中间体.中间体的RNA被RNA酶...
机窦15233572567问: RNA的提取和反转录的实验步骤? - ?
额济纳旗迪尔回答: 小麦总RNA的提取 实验目的 从黄化小麦苗中提取总RNA,可以为cDNA文库的构建做好准备.我们重点是要保证RNA的完整性、产率、防止修饰和纯度,尤其是完整性、防止修饰和纯度.RNA是单链,2'OH是它的化学性质远比DNA活泼.所...