puc19质粒dna降解
如何对提取的DNA纯化
本实验通过碱变性法提取E.coli DH5α(pUC19)的质粒DNA,并且通过一系列的分离纯化技术将其质粒DNA与染色体DNA、RNA、蛋白质等杂质分开从而得到纯化的质粒DNA分子。通过琼脂糖凝胶电泳可以通过DNA条带的位置来大致判断其分子大小,也可以将实际电泳的结果和理论结果相对比,分析差异产生原因,从而完善实验方法,严谨实验步骤。
求助:分子生物学选择题(非专业人员慎入)
19、b 20、a？ （GU—AG规律)参考资料：《现代分子生物学》朱玉贤
外泌体lncRNA找哪家
三、本文中转染质粒DNA、siRNA，转染细胞数量信息如下：A.将全长2435 bp的序列克隆到pCR3.1载体中构建SNHG16过表达载体;B.siRNA序列：SNHG16-homo-349，5′GCCUCUGCUGCUAAUUGUUTT-3; SNHG16-homo-867，5′-CCAAGGAGGGACUGUUUAATT-3′和SNHG16-homo-2004，5′-CCCAGUGUUGACUCACCAATT-3；C...
酵母菌有什么作用?
如果构建的酵母最小基因组中所保留的基因可以被人类或者病毒的DNA序列完全替换,那么替换后的表型将完全取决于外源基因,这将成为一种筛选抗癌和抗病毒药物的分析系统。?4。酵母在发酵工程中的应用单细胞真核生物的酵母菌具有比较完备的基因表达调控机制和对表达产物的加工修饰能力。酿酒酵母(Saccharomyces.Cerevisiae)在分...
高一 生物竞赛试题
84.可用于基因工程载休的DNA分子有A.细菌拟核DNA B.病毒DNA C.噬菌体DNA D.质粒DNA85.依照能量金字塔绘制原理,F列哪些生态系统巾的生产者和消费者有可能构成倒金字塔形?A.城市 B.天然湖泊 C.沼泽 D.人工养殖池塘86.青少年处在生长发育的关键时期,每天需要补充一定量的蛋白质。下面右关蛋白质在人体内作用的...
如何高效率转染免疫T细胞?
二、本研究使用中使用Invigentech（英克）公司INVI DNA RNA 转染试剂转染质粒DNA、siRNA到Vδ1 T 免疫T细胞里面；三、本文中转染质粒DNA、siRNA，转染细胞数量信息如下：A. 将全长2435 bp的序列克隆到pCR3.1载体中构建SNHG16过表达载体;B. siRNA序列：SNHG16-homo-349，5′GCCUCUGCUGCUAAUUGUU...
常德市西沙回答： 一般可以忽略它的降解,我们必须知道DNA作为遗传物质,它是十分稳定的.在4度的话更加稳定,长时间放置一年半载的肯定没问题.放到-20度的话更好.
茶克14725315519问： pUC19质粒转化结果为什么能在LB+Amp平板上检测 - ？
常德市西沙回答： pUC19是适合于双脱氧法DNA测序的载体,通常运用于重组dna的分子克隆中,首先我们制备大肠杆菌的感受态细胞(能接受外来重组的dna),这种感受态菌株必须不同外来DNA分子发生遗传重组,通常是rec基因缺陷型的突变体,同时它们必须是限制系统缺陷或限制与修饰系统均缺陷的菌株,即具有这三种缺陷(rk mk rec ),同时对氨苄青霉素敏感(ap).puc18载体自身带有抗氨苄青霉素基因,而外源片段不具有,这样只有带有puc19的转化子的菌株才能在氨苄青霉素平板上存活,而外源片段自身环化的不能存活,这称为抗性筛选.
茶克14725315519问： 质粒提取的步骤 - ？
常德市西沙回答： 实验一 ApaLI (178) P(BLA) ALPHA 质粒DNA的提取、 质粒DNA的提取、酶切 DNA的提取 及琼脂糖凝胶电泳 ApaLI (2367) EcoRI (397) AvaI (413)XmaI (413) SmaI (415) APr pUC19 BamHI (418) PstI (440)HindIII (448) P(LAC) ORI 2686 bp ApaLI ...
茶克14725315519问： 博凌科为的BL21(DE3) 感受态细胞 怎么样? - ？
常德市西沙回答： 本博凌科为的BL21(DE3)感受态细胞是采用大肠杆菌BL21(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA 的化学转化.使用pUC19 质粒检测,转化效率可达107,-70 ℃ 保存几个月转化效率不发生改变.每支感受态可以酌情分装使用,降低了实验的成本.质量稳定,使用方便,质优价廉.BL21(DE3)感受态细胞的基因型为:F - ompT hsdSB(rB -mB -) gal dcm (DE3) 储存:-70 ℃ 保存,避免反复冻融
茶克14725315519问： 抽提的质粒DNA电泳时怎么出现切口.断裂或降解现象? - ？
常德市西沙回答： (1)使用的是收集后冷冻保藏的细菌.解决方法:使用新鲜培养的细菌. (2)宿主菌富含核酸内切酶.解决方法:增加一步Rinse A洗涤步骤以彻底去除残留的核酸内切酶.或者将质粒DNA进行乙醇沉淀. (3)质粒DNA在Solution II中暴露过久,易造成质粒DNA的切口断裂.裂解步骤控制在5分钟内完成. (4)培养的细菌被杂菌污染.解决方法:重新挑取单菌落培养细菌. 生物帮上面有相关问题的介绍, http://doc.bio1000.com/list-38.html Real-Time PCR技术文档,Real-Time PCR技术文档下载
茶克14725315519问： 如何获取大量免疫相关基因 - ？
常德市西沙回答： 对虾免疫相关基因QM的功能研究对虾白斑综合症病毒(whitespotsyndromevirus,WSSV)是危害养殖对虾的最主要病原,其致病能力强,传播范围广,给世界对虾养殖业造成了巨大的损失,然而至今仍无有效的防治方法.要进行病害的有效防...
茶克14725315519问： 提取质粒时这样去除基因组总DNA - ？
常德市西沙回答： 用碱裂解法提质粒,基因组DNA会与细胞残骸聚集,而小的质粒DNA溶在水相中,通过离心就能除去;如果还担心有少量基因组DNA污染,可以电泳后从胶中回收质粒片段;用核酸外切酶也能消化掉线性的DNA,而环形和超螺旋的质粒DNA则得以保留.
茶克14725315519问： 大肠杆菌PUC19质粒如图所示.LacZ基因是PUC19质粒上重要的标记基因,其表达产物能水解X - gal,进而使大肠杆菌菌落呈蓝色.用EcoRI构建重组质粒,导入... - ？
常德市西沙回答：[选项] A. 应用涂布法将受体菌群接种在培养基表面 B. 培养基中应含有氨苄青霉素和X-gal C. 挑取菌落的接种环在操作前后都应该灼烧灭菌 D. 应挑取培养基表面的蓝色菌落进行扩大培养
茶克14725315519问： 碱裂解法提取质粒后质粒被降解可能原因有哪些? - ？
常德市西沙回答： 还有可能是你的琼脂糖凝胶浓度太高了,浓度越高,分子筛效应越大,质粒又比较大,当然容易拖尾了.其次也可能是你的电泳电压过大;还有就是RNA污染,你提完质粒后没有用RNase降解,不过这就不叫拖尾了,称作有杂带.至于注意事项,你搞清每一步的原理后自己仔细想想就知道了.时刻记住不要让质粒因为机械损伤而打断,不要让质粒被降解,尽量除去质粒内残存的乙醇,因为这会对接下来的酶切造成很大的影响.
茶克14725315519问： pUC19质粒转化结果为什么能在L平板上培养检测B+Amp - ？
常德市西沙回答： pUC19质粒带有Amp抗性,能在有Amp的培养基上生长,其他不带质粒的大肠杆菌没有Amp抗性基因,不能在该平板上生长,故pUC19质粒转化的大肠杆菌能在BL+Amp平板上培养筛选检测
