primer+star酶
作者&投稿：束岸 （若有异议请与网页底部的电邮联系）
鄣有15938295444问： 荧光定量pcr中5 - 3外切酶活性怎么作用 - ？
双辽市别嘌回答： 一般的taq酶没有5'-3'的外切活性,不过现在有一些酶,比如TAKARA的Ex-Taq是有5'-3'的外切活性的,主要是为了减少错配提高保真率. 再好的就是PrimerStar了. 另外还有pfu酶,最近用的比较多,保真性介于Ex和PS之间,还是挺好用的,就是扩增效率没.
鄣有15938295444问： 最近做PCR扩增,用taq酶能扩出条带来,但是换成primerstar之后就一直出不了带,到底是什么原因?师姐说从来没遇到过,一般都是primer能出,taq酶出... - ？
双辽市别嘌回答：[答案] 做个对照,如果酶没有问题的话.那可以降低一下退火温度或者稍微提高一下模板量再试试.
鄣有15938295444问： 最近做PCR扩增,用taq酶能扩出条带来,但是换成primerstar之后就一直出不了带,到底是什么原因? - ？
双辽市别嘌回答： 做个对照,如果酶没有问题的话.那可以降低一下退火温度或者稍微提高一下模板量再试试.
鄣有15938295444问： 基因定点突变使用taq聚合酶好还是pfu聚合酶好 - ？
双辽市别嘌回答： 般taq酶没5'-3'外切性现些酶比TAKARAEx-Taq5'-3'外切性主要减少错配提高保真率 再PrimerStar 另外pfu酶近用比较保真性介于ExPS间挺用扩增效率没
鄣有15938295444问： 已知一段DNA序列,酶是EcoR1和Nde1,如何设计引物呢??？
双辽市别嘌回答： 设计引物用专业软件如DNA STAR, PRIMER 5,设计好之后加上你提到的限制性内切酶的酶切位点即可
鄣有15938295444问： 如何用primer - blast 设计以cdna为宓膓pcr 引物 - ？
双辽市别嘌回答： Primer-BLAST,在线设计用于聚合酶链反应(PCR)的特异性寡核苷酸引物. 这个工具整合了目前流行的Primer3软件,再加上NCBI的 Blast进行引物特异性的验证.Primer-BLAST免除了用另一个站点或工具设计引物的步骤,设计好的引物程序直接用Blast进
鄣有15938295444问： 如何如何使用primer primer设计引物 - ？
双辽市别嘌回答： 首先得下载安装一个primer5 的软件,网上百度搜索后即可下载获得 点击File下拉菜单,选择New,然后选择DNA Sequence 从word文件中copy目标序列,然后control+V到primer5的文本框中,选择As is,点击OK.设计引物前得进行酶切位点分...
鄣有15938295444问： 琼脂糖凝胶电泳实验失败原因??？
双辽市别嘌回答： 可能性太多了. 1. 你跑胶一般都要放MARKER或者叫DNA LADDER吧,这个MARKER除外对DNA标记大小以外, 还可以用来监控ELECTROPHORESIS的质量, 如果MARKER显示而DNA没显示, 说明ELECTROPHORESIS正常而DNA有问...
鄣有15938295444问： 为何DNA合成要有primer,RNA合成就不需要? - ？
双辽市别嘌回答： 这个是因为DNA聚合酶和RNA聚合酶的特性不一样.DNA聚合酶只能在已有的3-OH接,而RNA聚合酶可以把游离的核糖核苷酸连起来.自然情况下,合成DNA的引物就是RNA.
鄣有15938295444问： 为什么PCR引物可以决定被合成片段的大小 - ？
双辽市别嘌回答： 因为GC之间有三个氢键,而AT之间只有两个氢键,因此GC含量越高,要打开氢键的能量就要求越大,即退火温度越高. PCR退火有的是根据GC含量估算Tm更详细说明次料: PCR引物应该保持合理的GC含量.含有50%的G+C的20个碱基的...
