nanodrop测蛋白浓度a280
作者&投稿：比音 （若有异议请与网页底部的电邮联系）
令溥17086858313问： 如何测量RNA的纯度和含量 - ？
虎林市奥勃回答： 1. 相关概念RNA质检参数OD260/OD280、OD260/OD230的意义.260、280、320、230nm下的吸光度分别代表了核酸、蛋白质、盐浓度和有机溶剂的值.A230: 测定其它碳源物质,如酚,糖类等.A260:核酸的吸收峰测,测RNA,DNA,引...
令溥17086858313问： 怎样用紫外分光光度计测DNA质量和浓度? - ？
虎林市奥勃回答： 一般用微量分光光度计比较快速简便,DNA浓度会直接在软件上显示,A260 / A280的比值用于评估样品的纯度, 纯净的样品比值大于1.8,低于2.0.较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0.
令溥17086858313问： 如何用分光光度计测量核酸的浓度 - ？
虎林市奥勃回答： 方便,灵敏,除了知道含量,还知道组成成分,比如od260/od280低了,就说明蛋白等杂志多了.但是,不知道质量,比如真核rna:跑胶的话有三条带,说明你的rna抽的不错,但是用分光光度计虽能测出rna含量高,但是我们不知道是不是被降...
令溥17086858313问： 酶标仪rna40*a260什么意思 - ？
虎林市奥勃回答： 不叫酶标仪吧,叫分光光度计,比较多人用nanodrop,进口的比较贵,也有国产的,是根据吸光度检测的,一般酶标仪是用来检测免疫反应的,elisa出来的浓度
令溥17086858313问： 如何利用OD260:OD280比值鉴定蛋白纯度是否被核酸污染? - ？
虎林市奥勃回答： 当蛋白中掺入了核酸之 后,OD260:OD280比值变化很明显,尤其是纯的蛋白制品中掺入了一点点核酸后,变化最明显.例如:纯的蛋白样品,其OD260:OD280比值为 0.57,而掺入5%的核酸之后,该笔直上升到了1.06. 但是反过来却是不成...
令溥17086858313问： 可以用紫外分光光度法对氨基酸,蛋白质进行定量分析吗 - ？
虎林市奥勃回答： 可以,而且实际上也是这么干的.不过用紫外分光光度法来分析有两种,一种是直接把蛋白质或氨基酸溶液在OD280下看峰,高级一点的如nanodrop这种机器就可以直接给出蛋白浓度,但这种方法极易受到抽提蛋白时去污剂的影响而出现严重偏差,所以如果是在缓冲液中的纯蛋白是可以这么检测定量的,比如买来的抗体就会提供OD280的数值来计算浓度.实际中常用的几种蛋白定量是将蛋白或氨基酸的溶液与某些化学物质反应(如bca法、Broadford法等)后在上紫外分光光度计测量OD值,用标准蛋白如BSA做一个标准曲线,再将未知蛋白测得的OD与标曲进行比较测得准确的浓度,在一定的浓度范围内,这些方法的准确性很高.
令溥17086858313问： 测定蛋白质含量时,为什么在5分钟到1小时测吸光值为宜 - ？
虎林市奥勃回答： 常用紫外分光光度法测定蛋白质含量. 以下引用: 6种方法测定蛋白质含量 一、微量凯氏(kjeldahl)定氮法 样品与浓硫酸共热.含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸氨.经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液...
令溥17086858313问： 测定DNA浓度时A230/A260代表什么意思 - ？
虎林市奥勃回答： 1,A260nm:是核酸最高吸收峰的吸收波长. 最佳测量值的范围为0.1至1.0.如果不在此范围,稀释或浓缩样品,使之在此范围内;如果吸光度小于0.05,检查是否存在操作因素(如移液不准确,样品内有悬浮物等)影响.DNA样品的A260 吸...
令溥17086858313问： 紫外吸收法测定蛋白质含量时含有核酸类杂质应怎样校正? - ？
虎林市奥勃回答： 因为核酸在260nm处的光吸收比280nm更强,但蛋白质却恰恰相反,因此可利用280nm及260nm的吸收差来计算蛋白质的含量. 常用下列经验公式计算: 蛋白质浓度(mg/mL)=1.45A280-0.74A260(A280和A260分别为蛋白质溶液在280nm和260nm处测得的吸光度值) 还可以通过下述经验公式直接计算出溶液中的蛋白质的含量: 蛋白质浓度(mg/mL)=F*A280*D*1/d
令溥17086858313问： 怎样用T6新世纪紫外分光光度计测蛋白质的含量 - ？
虎林市奥勃回答： 四种紫外吸收法: 1. 280nm的光吸收法 用标准曲线法进行测定.标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0 mg/mL.常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA). 标准曲线的测定: 取6支试管,按下表编号并加入BSA(1.0 mg/mL)0、1.0、2.0、3.0、4.0...
