dna磁珠比例分选片段大小
磁珠纯化的原理(NGS测序文库构建)
XP磁珠采用固相可逆固定化技术(Solid-phase reversible immobilization,SPRI): (1)反应体系中,较高浓度的PEG和NaCl导致DNA分子水化层脱去,DNA胶体热力学稳定性破坏,构象也随之改变,带负电荷的磷酸基团大量暴漏在外面; (2)带电荷的磷酸基团通过Na+与羧基形成“离子桥”,使得DNA被特异吸附...
磁珠法通用核酸提取的操作步骤有哪些?
3. 取1.5mL离心管,加入0.2mL 裂解液、20μL 消化液,再加入0.2mL样本,振荡混匀,65℃温育10 分钟。4. 冷却到室温,加入0.2mL异丙醇,充分混匀。再加入20μL磁珠复合液(每次使用前须充分混匀),振荡混匀3min(注意不要颠倒混匀,以防磁珠粘附于管盖内壁)。5. 将离心管置于磁力架上放置...
细胞凋亡的检测
由于融合蛋白Annexin V-EGFP,EGFP与PS 的结合比例为1:1,还可进行定量检测。除此之外,还提供生物素偶联的Annexin V,可通过常用的酶联显色反应来检测。另外,MACS公司将磁珠包被Annexin V,可采用磁分选方法筛选凋亡细胞。2)细胞内氧化还原状态改变的检测:这反应了细胞凋亡研究中相对较新的趋势,研究什么样的氧化还原环...
[资源循环科学与工程概论] 资源循环科学与工程概论下载
珠的方法大致可分为干法机械分选和湿法机械分选两大类。 干式机械分选流程为: 湿式机械分选微珠国内多用浮选、磁选、重选等多种选法的组合流程。 漂珠的密度小于水,因此可利用漂珠与其他颗粒间密度的差异,以水为介 质用浮选将漂珠与其他颗粒分离。(浮选) 粉煤灰中的磁珠是锅炉高温燃烧过程中,煤中含铁矿物在碳及...
流式细胞仪亚二倍体凋亡峰怎么分析
Protein)及Annexin V-FITC,灵敏度高,可作为FACS(流式细胞分选)方法筛选凋亡细胞的基础。由于融合蛋白Annexin V-EGFP,EGFP与PS 的结合比例为1:1,还可进行定量检测。除此之外,还提供生物素偶联的Annexin V,可通过常用的酶联显色反应来检测。另外,MACS公司将磁珠包被Annexin V,可采用磁分选方法筛选凋亡细胞。2)细胞...
神经元凋亡检测怎么做
由于融合蛋白Annexin V-EGFP,EGFP与PS 的结合比例为1:1,还可进行定量检测。除此之外,还提供生物素偶联的Annexin V,可通过常用的酶联显色反应来检测。另外,MACS公司将磁珠包被Annexin V,可采用磁分选方法筛选凋亡细胞。2)细胞内氧化还原状态改变的检测:这反应了细胞凋亡研究中相对较新的趋势,研究什么样的氧化还原...
休宁县小儿回答: 有胶回收和磁珠回收两种方法,一般胶回收的优点是能够回收你想要的片段大小,因为是先跑分离电泳胶然后切取胶的DNA片段的,但是回收率比较低,磁珠回收的有点是效率高,对DNA能够特异性吸附,但是缺点是想要获得片段大小的范围会比较大,比如你想要500bp的片段,他会把400到600的片段范围都吸附了.
自马18073503917问: 提取基因组DNA的方法有哪些?各有何优缺点? - ?
休宁县小儿回答: 1、苯酚氯仿抽提法 优点是采用了实验室常见的试剂和药品,做起来成本比较低廉. 缺点是由于使用了苯酚、氯仿等试剂,毒性较大,长时间操作对人员健康有较大影响,而且核酸的回收率较低,损失量较大,由于操作体系大,不同实验人员操...
自马18073503917问: 如何鉴定DNA提取磁珠? - ?
休宁县小儿回答: 你好!希望下面的内容能够帮到您. 1,磁珠的概念 磁珠是生物磁珠的简称,是生物化学与材料学的有效结合,磁珠兼具液体流动性和固体磁性材料的特点,在外磁场的作用下可以定向移动和集中,当外磁场撤去后,稍加振荡或抽吸即可均匀分...
自马18073503917问: 磁珠回收dna效率与敏感度与哪些因素有关 - ?
休宁县小儿回答: 1、溶液体系酸碱度. 2、磁珠粒径大小. 3、磁珠磁灵敏度. 4、磁珠表面官能团密度与官能团种类. 5、吉恩特磁珠回收DNA效率高,片段完整性高.
自马18073503917问: DNA提取试剂盒与苯酚氯仿提取DNA法的异同 - ?
休宁县小儿回答: 酚-氯仿方法是提取核酸的经典方法,主要原理是利用核酸、蛋白等杂质在水相和有机相中溶解度不同而重新分配. 试剂盒原理是在特定溶液环境下(高盐、低pH)使核酸吸附在固相介质(一般是硅胶膜)上,洗涤去除杂质后,再改变溶液环境...
自马18073503917问: 454 测序中,如何保证每个微磁珠 只连接一个DNA分子? 希望哪位大侠解救下小弟,这个问题困扰了我很久了 - ?
休宁县小儿回答: 调整磁珠和DNA的浓度比,在实验时需要进行预实验.使454测序仪上的磁珠数量大于DNA片段的数量,然后加入带有特异性片段的磁珠,与454测序仪上带有的DNA片段特异性结合,然后进行洗脱,将454测序仪上未与DNA片段结合的磁珠洗脱,这样每个磁珠就只连接一个DNA 片段了.不知道说清楚了木有.
自马18073503917问: 如何回收50bp 的dna片段 - ?
休宁县小儿回答: DNA片段回收有两个方式,一个是使用电泳胶切胶回收,一个是用磁珠纯化,相对来说磁珠纯化会比较好一点,回收率较高.
自马18073503917问: 磁珠法dna检测1.770E 8大于5.000E 0.1怎样有事吗? - ?
休宁县小儿回答: 1.770E8表示DNA的复制率达到1.77乘以10的8次方.意味着该病毒在你体内复制率高,具有传染性.建议进行抗病毒治疗的同时使用保肝护肝的药物,定期检查.
自马18073503917问: 干细胞磁珠分选和流式分选的区别 - ?
休宁县小儿回答: 应管理员要求,我来比较一下流式分选和磁珠分选的优缺点,本来想列一个表,但表格可能表述不清楚,还是用通俗的语言写啊,个人体会欢迎拍砖.简单说一下原理:现在流式分选一般都是电荷式分选,即对感兴趣的目标细胞所在的液滴充...
自马18073503917问: 求教cDNA制备的一般方法 - ?
休宁县小儿回答: 参考:http://baike.baidu.com/view/60324.htm 一、制备用于克隆cDNA的mRNA1.Oligotex mRNA Kits (QIAGEN)法2.磁珠法分离mRNA注意:一般需要做mRNA完整性的检测(检查mRNA在无细胞翻译体系指导合成高分子量蛋白质的能力、...