dmso冻存液配制方法

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比便15395445786问： 冻存液中的DMSO用什么配置?是用双蒸水吗?浓度是10%吗? - ？
埇桥区依他回答：[答案] 是纯的DMSO,通常在整个冻存液中的比例为10% 通常冻存液的配置方法是20%血清,10%DMSO,70%培养液 我一般用90%血清+10%DMSO,这个方法复苏后细胞的存活率非常高,推荐试一下.

比便15395445786问： 细胞复苏不好怎么办 血清浓度 - ？
埇桥区依他回答： 细胞冻存时候需要细胞状态在对数生长期,冻存液的配比是 DMSO:血清:培养基=1:2:7, 但一般偷懒的方法就是直接用带血清的培养基与DMSO成9:1的配方配制. 冻存时需要程序降温,如果有条件使用程序降温盒比较好,可以达到1度每分钟. 有的细胞不适合冻存使用,一冻存就失去性质或者活性,比如原代细胞等,必须在一定时间内做完该做的试验. 复苏细胞的时候需要快速稀释,这样对细胞损伤最小.

比便15395445786问： 简述用二甲基亚砜冷冻保存造血干细胞及使用前的处理方法?简述用二 ？
埇桥区依他回答： 用二甲基亚砜(DMSO)冷冻保存造血干细胞及使用前的处理方法如下: ①按配方将 保护剂配好后放置于4°C冷藏箱中保存备用; ②将采集到的干细胞浓度调整到(5-...

比便15395445786问： 求细胞冷冻保存方法和注意事项 - ？
埇桥区依他回答：[答案] 博凌科为生物科技-为你1、欲冷冻保存之细胞应在生长良好(log phase) 且存活率高之状态,约为80 90 %致密度.2、冷冻... (2)配制冷冻保存溶液(使用前配制):将DMSO 加入新鲜培养基中,最后浓度为5-10%,混合均匀,置于室温下待用.(3...

比便15395445786问： 实验室做单克隆抗体备用的骨髓瘤细胞如何保存 - ？
埇桥区依他回答： 正常传代或者和其它肿瘤细胞系采用相当的方法保存.即收集离心细胞,去掉上清,加入冻存液(10%DMSO+90%胎牛血清,这个配方最好,也可以用10%DMSO+90%养过骨髓瘤细胞的细培养上清,其它条件的冻存液我们觉得都不好),然后重悬,4度放半小时,-20度放一小时,-80度三小时以上,再转入液氮长期保存,一般来说十年是没有问题的.关于单抗制备更多技术,建议你看看中国免疫学实验网.

比便15395445786问： 细胞冻存的操作步骤 - ？
埇桥区依他回答： 细胞冻存 1.预先配制冻存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存预冷; 2.用胰酶对细胞进行消化:倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基,PBS冲洗两次,用胰酶消化细胞(尽可能温和); 3.再次用完全培养液悬浮细胞,将预冷的冻存液加入消化完全的细胞中,用滴管轻轻吹打混匀. 4.在每支冻存管中加入1ml细胞液,密封后标记冻存细胞名称和冻存日期. 5.冻存步骤的细致直接关系到细胞复苏时的活力,如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐)最好;或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐.这是我实验中用的protocol,希望能够帮到你~

比便15395445786问： 细胞培养的具体步骤和要求以及注意事项 - ？
埇桥区依他回答： 一、 复苏 1. 把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动.液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里. 2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁...

比便15395445786问： 细胞冻存融化怎样操作?为什么? - ？
埇桥区依他回答： 细胞冻存融化的原则是缓冻速融细胞冻存(慢) 1.预先配制冻存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存预冷; 2.用胰酶对细胞进行消化:倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基,PBS冲洗两次,用胰酶消化细胞(尽...

比便15395445786问： 标本冻存后对细胞计数会影响吗 - ？
埇桥区依他回答： 标本冻存后对细胞计数会影响 原代细胞冻存基本技术 1、选用原代细胞生长状态好(90-95%),生长数量大于5*105进行冻存.2、原代细胞冻存24小时,须换液新鲜原代细胞培养液一次.3、贴壁的原代细胞需常规用0.25%胰酶消化,将消化后的...

比便15395445786问： 乙酰丁香酮在 - 20度冰箱保存析出结晶如何解决? ？
埇桥区依他回答： 是-20度,不用避光

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