caspase3检测
细胞凋亡试剂盒选择指南
但若需特定荧光,如绿色,需考虑荧光重叠,确保仪器兼容性。TUNEL细胞凋亡试剂盒: TUNEL法通过检测DNA断裂,尤其是3'-OH末端,对凋亡细胞进行精准标记。它适用于各种样本,包括冷冻切片和悬浮细胞,特别适合于检测极少量凋亡细胞。荧光显微镜和流式细胞仪是其常用检测手段。Caspase 3\/7活性检测试剂盒: 通过...
caspase是什么
caspases是一组存在于细胞质中具有类似结构的蛋白酶。它们的活性位点均包含半胱氨酸残基,能够特异性切割靶蛋白天冬氨酸残基后的肽键。因此caspases意为“天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶”。caspases负责选择性地切割某些蛋白质,切割的结果是使靶蛋白活化或失活,而非完全降解。
泛凋亡(panoptosis)的检测指标是什么?
在检测泛凋亡时,需要综合考虑细胞形态学、关键蛋白的检测、其他指标的评估等多方面信息。通过观察细胞形态,可以判断细胞是否发生焦亡、凋亡或坏死性凋亡。同时,检测焦亡、凋亡和坏死性凋亡相关的关键蛋白,如Caspase-1、Caspase-3、Gasdermins、AIM2\/Pyrin\/NLRP3等,是评估细胞是否参与泛凋亡的重要手段。其...
免疫组化能检测到“活化的caspase3”嘛?western blot检测活化的caspase3...
当然了,WB是定量的,免疫组化有一定的主观因素
光损伤的光损伤的机制
王萧等通过western blot法检测caspase-3蛋白水平的表达,结果在凋亡细胞出现比例最大的同时,才出现了激活的caspase-3蛋白。刘双珍等应用caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO对鸡的视网膜细胞凋亡的治疗中,发现注射Ac-DEVD-CHO的组别与未注射组相比凋亡率明显下降,且Ac-DEVD-CHO抑制视网膜细胞凋亡的作用随剂量的增大而增大。
做流式细胞,检测凋亡,必须要固定么
用流式检测细胞凋亡的方法很多种,有些需要固定,有些不能固定的。根据方法而定,不能一概而言。如果是测细胞内抗原的,比如抗体识别活化caspase-3, 那就要固定。其他检测功能的,比如caspas3-3活性的,就要活细胞来测试。
细胞凋亡的检测
3)细胞色素C的定位检测细胞色素C作为一种信号物质,在细胞凋亡中发挥着重要的作用。正常情况下,它存在于线粒体内膜和外膜之间的腔中,凋亡信号刺激使其从线粒体释放至细胞液,结合Apaf-1 (apoptoticprotease activating factor-1)后启动caspase级联反应:细胞色素C\/Apaf-1复合物激活caspase-9,后者再激活caspase-3和其它...
荧光生物探针——研究进展
5. **化学发光**:特拉维夫大学的Doron Shabat课题组设计的self-immolative聚合物,通过化学发光实现对特定环境的响应。6. **多光子成像**:浙江大学钱骏教授团队的红光AIE材料,用于实现全颅成像,提高信噪比和时空分辨率。7. **聚集诱导发光**:刘斌教授的探针能同时检测caspase-3和caspase-8活性,利用...
如何检测细胞凋亡?
二、Annexin V检测,是利用连接荧光染料的Annexin V与PS进行结合,检测细胞膜PS外翻,从而判定早期凋亡情况。三、检测凋亡激活蛋白,如Bcl-2、BAX、FASL\/TNFSF6、TNF-α,通过ELISA等方法,测定细胞内被激活的蛋白,以判断细胞是否处于凋亡状态。四、Caspase酶活性检测,细胞凋亡早期,Caspase被激活引发级联...
凋亡细胞的原位组织末端转移酶组织切片经水化后标记
3)细胞色素C定位检测 细胞色素C作种信号物质细胞凋亡发挥着重要作用情况存于线粒体内膜外膜间腔凋亡信号刺激使其线粒体释放至细胞液结合Apaf-1 (apoptoticprotease activating factor-1)启caspase级联反应:细胞色素C\/Apaf-1复合物激caspase-9者再激caspase-3其游caspase细胞色素C氧化酶亚单位Ⅳ(...
松北区征之回答: 目前有专用的试剂: 荧光染料和caspase-3的底物结合,加入细胞培养液,细胞可以自由摄入.进入细胞后,底物被活化的caspase3或者7降解后,释放的荧光染料进入细胞核,染色DNA. 流式细胞仪检测,只要是和阴性对照相比荧光信号增高的,就是有caspase激活的.荧光强度越高,酶的活性越强.这个试剂 life technology出的 CellEvent® Caspase-3/7 Green Flow Cytometry Assay Kit
羊荷14719463338问: 请教caspase - 3的检测方法问题?
松北区征之回答: 博凌科为生物科技-为你解答:种方法都有自己的优缺点,关键是根据实验目的选择适合的方法.检测mRNA水平的表达,RT-PCR是广泛应用的比较好的方法;检测蛋白水平的表达,可以选择免疫细胞化学,Westen-Blot等,前者可以在细胞内定位但定量效果不佳,后者操作比较复杂,如想在较高水平杂 志发表论文最好选择此方法.检测Caspase-3活性还可以选用流式细胞仪来做,且可同时测定Caspase-8等的活性(多通路).
羊荷14719463338问: caspase是什么 - ?
松北区征之回答: caspases是一组存在于细胞质中具有类似结构的蛋白酶.它们的活性位点均包含半胱氨酸残基,能够特异性切割靶蛋白天冬氨酸残基后的肽键.因此caspases意为“天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶”.caspases负责选择性地切割某些蛋白质,切割的结果是使靶蛋白活化或失活,而非完全降解.
羊荷14719463338问: 阿霉素作用细胞后检测细胞凋亡 - ?
松北区征之回答: 你用caspase-3底物携带DNA染料的那种.染料和底物结合,进入细胞,如果细胞没有凋亡,就不染色.凋亡细胞caspase-3激活,降解底物,释放出DNA染料,使细胞核被染,上流式检测就可以了.这个染料是FITC通道,不和阿霉素有交叉.试剂盒是Life Technology出的.CellEvent Caspase-3/7 Green Flow Cytometry Assay Kit (C10427)
羊荷14719463338问: western blot 检测caspase - 3遇到问题,求解答 - ?
松北区征之回答: 定量的话肯定是选ELISA. Western blot只是一个半定量的实验方法.检测误差的话...楼主一是一定要选好合适的内参,比如可以测目标蛋白/总蛋白,则内参是总蛋白量,如果使用目标蛋白/总组织重量,则很不准确,因为抽提过程的效率不稳定,即每克组织能够提取出来的蛋白量不固定,而且每个组织含水/含不相干的组织量也不同.建议楼主参考相关文献来选择内参.二是最普通的查验误差的办法,每个试样多测几个孔.一般至少两个,三个更好.确定每个孔读数一致或非常相近,则知道结果比较可信.
羊荷14719463338问: 比活力的定义及计算公式 ?
松北区征之回答: 1、在特定条件下,单位重量(mg)蛋白质或RNA所具有的酶活力单位数.2、比活... 4、Caspase-3 以及蛋白酶测试.5、cAMP的结合位点测试.6、IMAP激酶测试(激酶...
羊荷14719463338问: 免疫组化能检测到“活化的caspase3”嘛?western blot检测活化的caspase3是不是更准确? - ?
松北区征之回答: 当然了,WB是定量的,免疫组化有一定的主观因素
羊荷14719463338问: 流式检测细胞周期都有哪些染色方法 - ?
松北区征之回答: 从分类上来说,一般有两类:第一类是只染DNA.这类方法比较简单,用酒精固定细胞后,直接加含有RNA酶的荧光染料,比如PI等,然后就可以直接上机. 第二类另外加了一个步骤,在细胞培养液中加入核苷酸的模拟物,比如BrdU或者EdU.细胞新合成的DNA上就会有这些物质.在不同时间点收集细胞,用DNA染料染DNA的同时,还以用抗体或者化学发光法染核苷酸模拟物也发荧光.这个方法的有点就是不仅可以像第一类方法一样,看到处于细胞周期各个期的百分率,另外还可以看到有多少DNA是新合成的.是一个动态的过程.
羊荷14719463338问: 细胞凋亡检测都有哪些方法?我自己做了流式,感觉做不好,想咨询下哪些公司可以做. - ?
松北区征之回答: 流式检测凋亡的方法有很多种,不同的方法适用于不同的细胞类型.目前一个很大的误区就是滥用annexin V +PI来检测各种细胞的凋亡.这个方法是为了检测悬浮细胞,比如白细胞而设计的.贴壁培养,或者直接从组织分离得到的细胞不适合用这个方法检测.因为在处理细胞的时候回造成大量的假阳性. 贴壁细胞可以采用检测caspase活性的方法来反应凋亡,而且方法很简单.目前有caspase底物结合的荧光染料.直接加到细胞培养液里面.细胞摄取后,如果处于凋亡期,细胞内的caspase-3/7激活.,降解了底物,荧光染料释放后进入细胞核,染色DNA,这个细胞在流式检测时就是阳性细胞. 这种试剂盒Invitrogen出的,有好几种颜色可选