addgene
质粒系列之限制性克隆--restriction cloning
2. 质粒骨架 p后面接上质粒骨架名称， pBACKBONE-XXXX 。质粒骨架中包含promoter等等重要信息，一旦你对这个骨架熟悉，通过名称则很快能推测出质粒元件。addgene有专门的Vector Database可供查阅许多已发表或商业化的质粒空骨架信息。3. 插入的基因名 ， pBACKBONE-hGene ，可以看到h在这里的意思是...
为什么质粒天然存在?
百度百科，对于和DNA、蛋白、微生物打交道的同学来说，质粒是相当常见的东西，如定义所说，质粒是一种小型环状DNA分子。质粒常用于搭载外源基因，导入受体菌种，进行蛋白表达。老簏见过或者听说过的质粒没有100 也有80，而实际用过的只有10来种。在目前Addgene质粒数据库中，已经收藏了大约45000种质粒，...
韩春雨是谁?韩春雨事件是怎么回事
韩春雨，男，1974年1月11日出生于河北石家庄，中国协和医科大学理学博士。现任河北科技大学生物科学与工程学院生命科学系副教授，硕士研究生导师。韩春雨事件是韩春雨在顶级学术杂志发表了论文，后面实验结果因为无法重复被质疑，韩春雨主动撤回论文，接受调查的一些列事件：2016年5月2日，韩春雨作为通讯作者在国际...
神奇的基因开关——四环素调控系统
南模生物作为这一领域的佼佼者，他们在四环素诱导模型的构建上积累了丰富的经验。通过这个系统，科学家们能够深入探索基因功能的复杂性，如在cMyBP-C功能研究中，pTRE-cMyBP-C小鼠实验验证了其功能的动态变化。参考资料：<\/[1] IGEM Bielefeld-Germany[2] Addgene Tet-Cycline[3] Das et al., Curr ...
质粒图谱怎么看
1.第一步，看箭头：大多数质粒都会有箭头，箭头有两种解释。一种是转录方向，转录方向主要是由启动子开始的一个大箭头，是启动子启动序列的顺序。另一种是复制起始位点的方向，复制起始位点就是该质粒在大肠杆菌等细菌或真菌中DNA复制的一个方向。还需要提到的是F1启动子（图上的f1 ori）代表的是噬菌...
如何在NCBI上查找质粒序列,比如pET28?
Vector Database For addgene http:\/\/www.addgene.org\/pgvec1?f=v&cmd=listvecinfo I think this website is what you want. In order to query out the pET28 squence in NCBI, you can use blast tool in NCBI with the similar vector sequence from the vector site.I query it for ...
拟南芥转化技巧
它可能需要6-8周，从转化日期到有一个可分析的转基因手，所以这是非常重要的是，使这一过程是正确的，第一次。我会在这里列出一些指导方针。一个详细的转换协议，以及用于增长的协议。 拟南芥 也可获得( Weigel和Glazebrook，2002年 ).在Addgene找到植物质粒资源 选择合适的表达载体是构建转基因拟南芥...
crispr基因点突变是怎么做
研究人员可以采用一种 Cas 的变体，即 Cas9，这种酶来自于一种链球菌，由 RNA 进行指引，能无需其他蛋白的帮助而切割 DNA （Science, 337:816-21, 2012）。Cas9 既能切断与 gRNA 结合的 DNA 链，也能切断其互补链。目前可以从 Addgene 购买 Cas9 质粒（65 美元），将其直接转染入细胞。
如何看限制性内切酶的酶切结果
这说明已经把这个质粒给切好了。第四条到第五条泳道，这两条是单酶切的片段，跑得最慢，有的时候，我们仅仅需要单酶切就行了，此时就看它与原始质粒的对照，比原始质粒跑得慢，就可能判断被切开了。参考资料：https:\/\/blog.addgene.org\/plasmids-101-how-to-verify-your-plasmid ...
在哪里可以找到各种载体的序列啊?
ncbi有数据库 ，zmbl也可以。载体（Vector） ，指在基因工程重组DNA技术中将DNA片段（目的基因）转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。在实际生活中，胰岛素就可以通过使用载体将已插入胰岛素基因片段的质粒放入大肠杆菌内。经过插入基因片段的质粒就...
萝北县田可回答： 我们直接从addgene公司买的,对发展中国家,这个公司只收取运费和准备质粒的费用,我们当时买的时候每个质粒收取了10美元质粒费用和相应的运费,只需在对应质粒的网页上有一项是MTA,申请后公司会给你回复,你再根据回复办理相应的入关手续,但手续比较麻烦,需要在相应入境口岸卫生厅办理申请,最后从检疫检验局获得入关许可证就可以了.你可以咨询一下当地的卫生厅.
党虎13980867678问： 如何查找质粒图谱 - ？
萝北县田可回答： 方法一:使用Vector NT 软件做分子实验,经常和不同的质粒打交道,了解各种质粒的图谱信息是必需的,invitrogen公司的这款软件绝对是分子生物学虫子们的福音,要想对质粒图谱了解更直观,安装这款软件是非常必要的.这款软件的软件...
党虎13980867678问： 含音素/ad/单词 - ？
萝北县田可回答： adobe、address、addition、addgene、addict、adidas、adjust、adjustment、adlock、admit、admire、bad、dead、fade
党虎13980867678问： 为什么从addgene上买的质粒扩增不出来 - ？
萝北县田可回答： 质粒和PCR产物需要拿去测序有2个目的,一是验证插入序列的DNA序列是否无误.第二是看插入的方向和位置是否正确.如果做定量PCR用到质粒的话,一般是用来做标准曲线的. 聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子...
党虎13980867678问： 如何查找质粒图谱之我见 - ？
萝北县田可回答： 经常在坛子里看到一些人求助质粒图谱,很多时候我发现其实有些质粒图谱还是很容易找到了,刚开始帮忙查找了下,还公布了一些查找质粒图谱比较好的网站,后来看得多了,很多时候,这样的帖子直接跳过了.今天又看到几个求质粒图谱的...
党虎13980867678问： 如何利用CRISPR来开展全基因组筛选 - ？
萝北县田可回答： 十年前,当研究人员开始解析细菌和古细菌中一个称为CRISPR结构的时候,他们并没有预料到这会给基因编辑世界带来一场风暴.在过去的这一年半时间里,CRISPR方法已迅速席卷了整个动物王国,成为DNA突变和编辑的一种“马上”技术...
党虎13980867678问： 要做目的基因过表达的质粒转染,想在公司买质粒,请问哪家公司比较好?另外公司需要哪些信息啊 - ？
萝北县田可回答： 这个好像直接买不好哟,一般要订做,克隆模板可以买,或者全基因合成.但是关建技术是是要包成慢病毒或者腺病毒转染细胞效果才好.威斯腾生物可以做,你可以百度一下,询问他们/
党虎13980867678问： P201G Cas9 载体可以在大肠杆菌中繁殖吗?？
萝北县田可回答： 可以去查质粒图谱的网站上,例如snapgene,addgene等,查到质粒图谱.看他的简介,里面就会说他是那种载体.也可以直接用这个载体名字当关键词搜索论文,看别人是不是在大肠杆菌中繁殖的.
党虎13980867678问： pET28 载体如何设计插入片段?是否需要对读码框? - ？
萝北县田可回答： pET28载体具有T7噬菌体的启动子和终止子,因此不需要额外添加启动子,除非你做多启动子.你的ATG前可具有若干碱基,也可以没有,并且可以不符合读码框.因为启动子后区域到终止子都是被转录的,而阅读框只是在对翻译过程有影响....
党虎13980867678问： 做crispr需要测靶基因序列嘛吗 - ？
萝北县田可回答： CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制.在细菌及古细菌中,CRISPR系统共分成3类,其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白(Cas蛋白)共...
