10分离胶配方
聚丙烯酰胺凝胶电泳,但是样品只停留在浓缩胶和分离胶之间???我延长了...
这种情况一般是分离胶太浓了，或者说蛋白比胶孔大，进不去。你是说分离胶7%，浓缩胶4%吧？已经挺稀了，可能是蛋白沉淀了，凝聚成大块，所以进不去。这一般是样品太浓，变性时易沉淀。可以先稀释样品。也可能是配胶时有错误，比如缓冲液pH不对，储液挥发浓缩等等。如果Marker也进不去，就是胶的...
怎样制作硅橡胶?它的材料要说明白
工业上主要采用碱催化聚合法及酸催化聚合法生产硅橡胶。较多的采用KOH和暂时性催化剂[(CH3)4NOH、(n-C4H9)4POH]。 加工成型方法如图所示。一次硫化的目的是进行高分子链的交联反应；二次硫化的目的是进行补充交联、驱除硫化剂分解产物和其他挥发性化合物以稳定硫化胶的各项性能。常用的设备有开放式炼胶...
从腹水中纯化的抗体不溶解怎么办
收集腹水，每只小鼠可以收集几次，每次3～10ml不等，收集腹水至小鼠死亡。腹水中加入0.01%的叠氮化钠以防止长菌，再在12000rpm离心2次，保留上清。测定效价后，进行抗体的纯化，分装，－70°C保存。[注]：（1）在SDS-PAGE时，分离胶中加入300µl SDS，浓缩胶中加入200µl SDS，以确保...
明胶是怎么生产出来的?
将所得稀胶汁在600C左右用过滤棉、活性炭或硅藻土等作助滤剂，以板框式压滤机过滤，得澄清胶液，胶液再用离心机分离，进一步除去油脂等杂质。再将稀胶液放入减压浓缩罐中，控制温度65～700C进行蒸发浓缩，当胶液变浓时，可改为60～650C继续减压浓缩。根据胶液质量和干燥设备条件掌握胶液浓缩的浓度，...
琼脂糖凝胶电泳具体操作步骤是什么?需要注意什么事项?
2、凝胶浓度 对于琼脂糖凝胶电泳，浓度通常在0.5～2%之间，低浓度的用来进行大片段核酸的电泳，高浓度的用来进行小片段分析。低浓度胶易碎，小心操作和使用质量好的琼脂糖是解决办法。3、缓冲液 常用的缓冲液有TAE和TBE，而TBE比TAE有着更好的缓冲能力。电泳时使用新制的缓冲液可以明显提高电泳效果。4...
建筑801胶水生产配方及设备工艺要求
（2） 所作胶水的“胶浓度”，应事先设定如做7%胶浓度，20kg干聚乙烯醇，应得成品20+0.07≈286kg。（3） 在制作801胶水的甲醛聚合过程中，应不停搅拌，最好用调速搅拌机，或手电钻搅拌机搅拌。（4） 若在甲醇缩合过程中，由于工人不注意检查，出现甲醇聚合过度，呈胶团，胶水分离，不易再溶化的...
求教橡胶塑料是什么东西?
老化现象的防止,着重于正确的胶种选择及配方设计,外加严谨的生产理念。如此才可增加橡胶制成品的寿命,并发挥应有的特殊功能。 六、橡胶制品的基本特性: 1.橡胶制品成型时,经过大压力压制,其因弹性体所俱备之内聚力无法消除,在成型离模时,往往产生极不稳定的收缩(橡胶的收缩率,因胶种不同而有差异) ,必需经过一...
...各项都按说明来配,但电泳条带刚进入分离胶,就发生弥散
分离胶缓冲液的pH有问题。建议测量一下，应该在8.8左右，你的pH肯定低于8.8，如果不是你弄错了，就是你的pH计出问题了。如果一时找不到准确的pH计，建议使用pH试纸。
电泳法分离混合蛋白质的基本原理是什么
2、聚丙烯酰胺凝胶电泳:以聚丙烯酰胺凝胶为支持物,一般制成凝胶柱或凝胶板,凝胶是由相连的两部分组成(小的部分是浓缩胶,大的部分为分离胶),这两部分凝胶的浓度、缓冲液组分和离子强度、pH以及电场强度都是不同的,即不连续性。电泳时样品首先在不连续的两相间积聚浓缩而成很薄的起始区带,然后再进行电泳分离。 电...
如何清洁粘在衣服上的老鼠粘胶
方法有：1、利用胶的剥离强度随温度变化的特点，根椐衣服的面料定清洗的方法，把粘上胶的衣服在冰箱冷冻柜里放两个小时左右，就可以把胶从衣服上揭下来了。2、四周检查一下衣服上的老鼠胶视程度而定，轻者用少许香蕉水涂抹在胶上,稍候片，刻进行搓揉,反复进行就可清除胶。3、沾的多的胶先剪了，...
平泉县白加回答： 10%的分离胶:蒸馏水40.5ml;1.5Mtris 25ml(pH8.8);10%SDS 1ml;acr/bis 33.25ml 20%的分离胶按此比例加倍即可. 如果是小分子蛋白分离,建议最好用专门走小分子蛋白的胶(例如Tricine-SDS-PAGE等)
卜龙19832485989问： 求SDS - PAGE 配方 分离胶 7.5% 浓缩胶 4% - ？
平泉县白加回答： 5ml 7.5%分离胶: H2O 2.35ml 30%丙烯酰胺溶液 1.25ml 1.5M Tris(pH8.8) 1.3ml 10%SDS 50ul 10%APS 50ul TEMED 4ul5ml 4%浓缩胶: H2O 3ml 30%丙烯酰胺溶液 670ul 0.5M Tris(pH6.8) 1.25ml 10%SDS 50ul 10%APS 50ul TEMED 4ul
卜龙19832485989问： 如何配制20%的SDS - PAGE分离胶? - ？
平泉县白加回答： A液20/3mL,B液2.5mL蒸馏水(7.5-20/3)mL,10%过硫酸铵50uL,TEMED5uL.
卜龙19832485989问： 求SDS - PAGE 配方 分离胶 7.5% 浓缩胶 4% - ？
平泉县白加回答：[答案] 5ml 7.5%分离胶: H2O 2.35ml 30%丙烯酰胺溶液 1.25ml 1.5M Tris(pH8.8) 1.3ml 10%SDS 50ul 10%APS 50ul TEMED 4ul 5ml 4%浓缩胶: H2O 3ml 30%丙烯酰胺溶液 670ul 0.5M Tris(pH6.8) 1.25ml 10%SDS 50ul 10%APS 50ul TEMED 4ul
卜龙19832485989问： 聚丙烯酰胺凝胶制备 - ？
平泉县白加回答： (1)30%丙烯酰胺溶液 取丙烯酰胺60g与亚甲基双丙烯酰胺1.6g,加水至 200ml,滤纸滤过,避光保存. (2)分离胶缓冲液 取三羟甲基氨基甲烷36.3g、加水70ml,用盐酸调节pH值至8.8,加水至100ml. (3)浓缩胶缓冲液 取三羟甲基...
卜龙19832485989问： 在做聚丙烯酰胺凝胶电泳时为什么分离胶可以凝固,但浓缩胶很长时间都凝固不了 - ？
平泉县白加回答：[答案] 主要可能是TEMED和AP的量的问题,你可以参考一下我的配方: 分离胶12.5%(SDS),10ml体系 分离缓冲:2.5ml 贮胶:4.167ml 纯水:3.233ml 10%SDS:0.1ml 10%AP:100微升 TEMED:5微升 ———————————————————————— ...
卜龙19832485989问： 凝胶酶谱的SDS聚丙烯酰胺凝胶和western中的配制方法有什么区别? - ？
平泉县白加回答： 凝胶酶谱的SDS-PAGE含0.1%明胶 配方: 分离胶 ddH2O 4.5ml 30%储备胶(0.8%甲叉+29.2%丙烯酰胺) 1.5mol/l Tris(PH 8.8) 10% SDS 10%过硫酸铵 TEMED 1%明胶(1g明胶-->100ml,37°C水浴溶解)0.5ml浓缩胶 ddH2O 30%储备胶 1mol/...
卜龙19832485989问： SDS胶浓度怎么计算,比如怎么配置10%,12%,16%的分离胶,丙烯酰胺的量怎么确定,各个含量咋确定 - ？
平泉县白加回答：[答案] 按的是你丙烯酰胺和双丙烯酰胺的总质量 与 胶总体积 的质量体积比(m/V) 首先你要将上述药品粉末按照19:1或29:1的比例用水配置成母液(一般为30%,也是m/V) 而10%,12%,16%你自然也就知道应该用多少的母液去配制了.相信如何配胶你是...
卜龙19832485989问： 如何选择分离胶浓度 - ？
平泉县白加回答： western blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白 而因为western blot的膜应该是完全覆盖SDS PAGE的凝胶,所以不用太担心条带在凝胶上位置偏上活偏下 所以western blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量 具体可以参考下表
卜龙19832485989问： SDS - page怎么配制 - ？
平泉县白加回答： 如果说你要具体的配方的话,我觉得你给的条件少了. 13%指的是丙烯酰胺的终浓度.尽管你给了29:1这个比例,但是你没有说你所配的丙烯酰胺的浓度.丙烯酰胺储液一般有30%和40%的.对于相同的浓度的胶来说,29:1和37.5:1这个比例不会影响到你所需要的储液的量,只有储液的浓度才关系到胶的%.譬如说10ml的胶,我加入1ml的40%的凝胶储液,那么他的浓度就为40%*1/10=4%. tris-hcl给的是终浓度,自己折合下应该加多少buffer就行了.另外SDS你多打了个L. 觉得你把胶配好了应该多看点书,不要光要个答案而不知所以然.
