荧光探针和荧光染料的区别
探针法和染料法pcr的 b-actin一样吗
1.荧光定量PCR探针法:探针法即除了引物外另外设置一个探针,在探针的两端分别带上发光集团和淬灭集团,这个时候,两个平衡不发光,但是当DNA通过引物合成的时候,探针被折断,释放出发光集团和淬灭集团,两个距离较远,发光集团产生荧光,被机器收集到信号,从而检测基因的量 2、荧光定量PCR SYBR Green ...
荧光定量PCR技术荧光定量PCR的方法
荧光定量PCR技术主要依赖于两种荧光化学物质:荧光探针和荧光染料。方法上分为特异性和非特异性两大类。特异性方法,如使用基因特异寡核苷酸探针,通过标记荧光染料在PCR反应中检测产物,具有较高的特异性,但过程较为复杂。而非特异性方法则是通过在PCR体系中添加过量荧光染料,如SYBR Green I,当染料掺入...
荧光定量PCR技术的荧光定量PCR的方法
荧光定量PCR所使用的荧光化学可分为两种:荧光探针和荧光染料。而荧光定量 PCR 的方法相应的可分为特异类和非特异类两类,特异性检测方法是在PCR反应中利用标记荧光染料的基因特异寡核苷酸探针来检测产物;而非特异性检测方法是在在PCR反应体系中,加入过量荧光染料,荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射...
荧光定量 PCR 方法:探针法 VS 染料法?
在进行荧光定量 PCR 时,从技术和产品来说,我们往往会有许多选择,尤其是方法的选择,对最终结果的准确性至关重要。荧光定量 PCR 从方法上来说可以分为染料法和探针法两种。一、染料法 在国内,染料法一般采用 DNA 染料 SYBRGreenⅠ,染料法使用简单,成本也相对较低,因此会有很多国内研究者会选择使...
实施荧光定量PCR的原理及使用方法
荧光定量PCR所使用的荧光化学可分为两种:荧光探针和荧光染料。原理: PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性将探针...
荧光定量PCR—荧光篇
荧光定量PCR技术是一种高效且实时的定量分析方法,它通过在PCR反应中加入荧光化学物质,监测PCR过程中的荧光信号变化,实现对目标模板的精确计数。技术上,分为荧光染料法和荧光探针法两种。荧光染料法利用荧光染料SYBR GreenⅠ,染料与DNA双链结合时产生荧光信号,PCR扩增过程中,荧光信号强度随产物增加而增强...
荧光探针的化学性质
荧光定量PCR所使用的荧光化学制剂可分为两种:荧光探针和荧光染料。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解...
干货分享||荧光定量PCR的原理、流程及结果分析
荧光定量PCR,简称qPCR,是一种利用荧光信号实时监测PCR扩增反应的技术。其核心原理是通过荧光探针或荧光染料,对每次扩增循环产生的荧光信号进行检测,以此进行模板的定量分析。荧光探针法如Taqman探针,通过标记的荧光发射基团和淬灭基团,随着PCR扩增,探针被降解,荧光信号逐渐释放。SYBR Green I染料则通过...
荧光PCR法与PCR荧光探针法有何不同?
实时定量PCR是通过产物发出荧光,根据荧光强度来定量的。激发荧光的方式有荧光染料法和探针法。荧光探针比荧光染料更具特异性,可检测特定序列的扩增产物的量。荧光染料可以检测PCR中获得的全部双链DNA,但不能区分不同的双链DNA。可以说荧光PCR包括探针法和染料法 ...
合适的内参选择,精准的荧光PCR定量
实时荧光定量PCR是基于PCR扩增反应中加入荧光基团,实时检测每一个循环产物的荧光信号,从而对未知模板进行定量分析的方法。它通过两种主要原理进行工作,即荧光探针法和荧光染料法。在荧光探针法中,一对引物和一个特异性荧光探针加入到反应体系,探针两端标记报告荧光基团和猝灭荧光基团。在PCR扩增过程中,Taq...
广昌县天麻回答:[答案] 实时定量PCR是通过产物发出荧光,根据荧光强度来定量的.激发荧光的方式有荧光染料法和探针法.荧光探针比荧光染料更具特异性,可检测特定序列的扩增产物的量.荧光染料可以检测PCR中获得的全部双链DNA,但不能区分不同的双链DNA. 可以...
项牵19362233890问: 荧光探针的化学性质 - ?
广昌县天麻回答: 荧光定量PCR所使用的荧光化学制剂可分为两种:荧光探针和荧光染料.PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团.探针完整时,报告基团发射...
项牵19362233890问: 荧光pcr探针室温放置会降解吗 - ?
广昌县天麻回答: 实时定量PCR是通过产物发出荧光,根据荧光强度来定量的.激发荧光的方式有荧光染料法和探针法.荧光探针比荧光染料更具特异性,可检测特定序列的扩增产物的量.荧光染料可以检测PCR中获得的全部双链DNA,但不能区分不同的双链DNA. 可以说荧光PCR包括探针法和染料法 不建议这么做,pcr产物的话大部分的都会降解的,我有一次把pcr产物放在-20度里四天都有降解的情况.建议跑胶回收纯化后保存.
项牵19362233890问: 请告诉我判断细胞死活的方法. - ?
广昌县天麻回答: 鉴定细胞死活的方法 死活细胞的鉴定在生物学和医学上具有很重要的意义.细胞培养过程中要随时记录细胞的生长情况,需要经常测定细胞的存活率;在肿瘤细胞的研究中,为了检验各种药物对肿瘤细胞的杀伤力,也需要测定肿瘤细胞的存活率...
项牵19362233890问: 什么是实时荧光定量PCR?有什么应用领域?与传统PCR有什么区别? - ?
广昌县天麻回答: .荧光共振能量传递 (FRET) 某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光,当另一屏蔽基团与其距离合适时,原发射光将会被屏蔽基团所吸收,并转化为其他波长的发射光或热能,称之为FRET.2.荧光化学:荧光定量PCR所使用的荧...
项牵19362233890问: 高三化学:“绿色荧光蛋白”可降解吗? - ?
广昌县天麻回答: 可以,所有蛋白都有自己的代谢周期,即可被合成及降解.
项牵19362233890问: 荧光颜料与荧光染料的区别 - ?
广昌县天麻回答: 我是做荧光颜料,只能回答颜料是粉状固体不透明,用于油墨,油漆涂料,塑胶橡胶等染料是液体透明,用于纺织类较多吧(这类不太清楚)其它不明.
项牵19362233890问: 荧光染料的科研应用 - ?
广昌县天麻回答: 荧光染料,由于灵敏度高,操作方便,逐渐取代了放射性同位素作为检测标记,其广泛应用于荧光免疫,荧光探针,细胞染色等.包括特异性的DNA染色,用于染色体分析、细胞周期、细胞凋亡等相关研究.另有很多核酸染料在多色染色系统中是非常有用的复染剂,可作为背景对照,标记细胞核使细胞内结构的空间关系一目了然. 核酸荧光染料对细胞核染色后定量测量细胞所发出的荧光强度,就可以确定细胞核中DNA、RNA的含量,并可以对细胞周期和细胞的增殖状况进行分析.有多种荧光染料可以对细胞中的DNA或RNA染色,常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst 33342等,RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等.
项牵19362233890问: 光敏剂与荧光染料有什么区别? - ?
广昌县天麻回答: 荧光染料本身是在一定波长照射下会发射出荧光,光敏剂又可以称为增敏剂,可以增加染料对光的反应的敏感性,可以使染料在较低的光强或者原本不能发光的波长下发射荧光.
项牵19362233890问: real - time pcr与普通pcr有什么区别 - ?
广昌县天麻回答: 最大的差别在于Real-time PCR体系中多了荧光探针或者荧光染料,可实时检测荧光信号;这个在百度或者其他搜索网站可以搜索到很详细的对比资料,这里就不赘述了.