紫外吸收法测定dna纯度
试述两种测定DNA浓度的方法
1、紫外光吸收法:因为组成核酸的碱基,在260纳米处具有强吸收峰,所以通过测定260纳米的吸收峰,即可对DNA进行定量。但有时会因为所处溶液的pH值不同而导致吸光系数的不同,.因此,一般在中性pH值左右的环境中进行测定;2、溴化乙锭荧光强度法:当DNA含量很低而样品中杂质含量高时,会影响紫外光吸收值...
实验室中常用的DNA分子量的测定方法有哪些
1)紫外吸收法也就是测量OD(260)和OD(280)的吸收值,这样的方法其它的杂质对测量结果影响大一点,因为其它杂质在这两个吸收波长也有吸收.(2)荧光法,用PicoGreen荧光染料,测定DNA,RNA浓度比较灵敏,并且适合测量低浓度和微量DNA和RNA,并且受其它杂质的影响不大,缺点要有专门的荧光检测仪器,试剂比较昂...
如何用紫外吸收法测定DNA含量?
紫外吸收法测定DNA含量,组成核酸分子的碱基,均具有一定的吸收紫外线特性,最大吸收值在波长为250~270nm之间。核酸的最大吸收波长是260nm,这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。在波长260nm紫外线下,1OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg\/ml;单链DNA或RNA为20μg\/ml。可以次来计算核酸样品...
核酸含量的测定方法及原理都有哪些?
核酸定量常用方法及原理如下:1、光吸收法:核酸中碱基共轭结构在近紫外光波长260nm处有最大吸收,吸收强度与核酸浓度成正比,因此可以用于核酸定量。2、定P法:核酸中P含量约为9.5%,因此可以通过测定样品中的有机P量来进行核酸定量。核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,为生命的最基本物质之...
用紫外吸收法测定DNA含量,如何根据光吸收值求DNA的含量?
可以先利用已知各浓度的DNA的溶液测出其对应的吸光值,然后做出标准曲线。再测未知液的吸光值,对照标准曲线就可以求出未知液中的DNA浓度。DNA 的最大吸光值在波长260nm处
DNA制品可用哪几种方法测定其含量,试从原理,准确性方面加以比较_百度...
测定DNA浓度的方法有两种,即利用分光光度计法测定DNA的紫外光吸收值;另一种方法是测定样品中溴化乙锭发射的荧光的强度来计算核酸的含量.紫外光吸收法:因为组成核酸的碱基(G,A,T,C)在260nm处具有强吸收峰,所以通过测定260nm的吸收峰即可对DNA进行定量.但有时也会因为所处溶液的pH值不同而导致吸光...
除了紫外吸收的方法测定DNA.浓度外 还有哪些常用方法?
可采用荧光分光光度法. 试剂与仪器: 提取的质粒DNA,紫外分光光度仪. 操作步骤: 1) 分光光度计先用水在260nm和280nm两个波长下校零. 2) 取质粒DNA样品2μl,用水稀释100倍,转入分光光度计的石英比色杯中. 3) 在260nm和280nm分别读出样品光密度值.如果样品浓度单位为μg\/μl,则样品DNA浓度...
求解DNA与RNA含量的测定问题
(1)紫外吸收法也就是测量OD(260)和OD(280)的吸收值,这样的方法其它的杂质对测量结果影响大一点,因为其它杂质在这两个吸收波长也有吸收。(2)荧光法,用PicoGreen荧光染料,测定DNA,RNA浓度比较灵敏,并且适合测量低浓度和微量DNA和RNA,并且受其它杂质的影响不大,缺点要有专门的荧光检测仪器,...
如何用紫外吸收法测定DNA含量
首先,分光光度计测量的样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会准确些。它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算...
检测DNA和RNA检测方法有什么区别
您好!检测DNA的方法有:1.光密度测定。2.琼脂糖电泳凝胶检测法。3。二苯胺法。检测RNA的方法有:1.光密度测定。2.苔黒酚法。主要的嘧啶和嘌呤具有共轭双键,使碱基,核苷,核苷酸和核酸在240-290nm的紫外波段有一段强烈的吸收峰,因此核酸具有紫外吸收特性,在260nm,处是最大的紫外光吸收值,根据...
翠云区美立回答:[答案] 您好! ① 1个OD260相当于50ug/ml DNA. ② 紫外吸收法测定DNA含量,OD260/OD280=1.8-2.0之间时,DNA纯度较好;<1.8说明有蛋白污染,>2.0说明有RNA污染,此时测定的OD260值不能用来定量. 百度教育团队【海纳百川团】为您解答. 感谢...
郅闻18773732577问: 如何使用简单的实验方法检测DNA纯度 - ?
翠云区美立回答: 实验原理DNA/RNA在260nm处有最大的吸收峰,蛋白质在280nm处有最大的吸收峰,盐和小分子则集中在230nm处.因此,可以用260nm波长进行分光测定DNA浓度,OD值为1相当于大约50μg/ml双链DNA.如用25px光径,用 H2O稀释DNA/...
郅闻18773732577问: DNA含量的测定方法 - ?
翠云区美立回答: 那要看你用什么方法测定DNA和RNA: (1)紫外吸收法也就是测量OD(260)和OD(280)的吸收值,这样的方法其它的杂质对测量结果影响大一点,因为其它杂质在这两个吸收波长也有吸收. (2)荧光法,用PicoGreen荧光染料,测定DNA,RNA浓度比较灵敏,并且适合测量低浓度和微量DNA和RNA,并且受其它杂质的影响不大,缺点要有专门的荧光检测仪器,试剂比较昂贵. 纯化DNA可以买试剂盒,主要有膜吸附法,磁珠分离法,都很方便.
郅闻18773732577问: 测定DNA含量用什么方法? - ?
翠云区美立回答: 组成核酸分子的碱基,均具有一定的吸收紫外线特性,最大吸收值在波长为250~270nm之间.核酸的最大吸收波长是260nm,这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础. 在波长260nm紫外线下,1OD值的光密度相当于双链DNA...
郅闻18773732577问: 检测核酸纯度方法 - ?
翠云区美立回答: 紫外吸收检测DNA浓度与纯度2007年11月13日 星期二 11:40目的: 了解紫外吸收检测DNA浓度与纯度的原理,掌握测定方法.原理: 核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml...
郅闻18773732577问: 如何判断提取质粒DNA的纯度 - ?
翠云区美立回答: 可以通过紫外吸收检测. 因为核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml,单链寡核苷酸的含量为30μg/ml,可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm得OD...
郅闻18773732577问: 电泳法和紫外分光光度法检测DNA的浓度和纯度,哪种方法更好 - ?
翠云区美立回答:[答案] 两种方法各有优劣. 电泳法更直观,如果你有DNA Maker,并且知道Maker的浓度,就可以使用一维条带分析软件如Quantity One分析样品中DNA的含量,而且可以很直观地了解目的DNA的纯度、大小等特性. 但是,由于电泳中染色特异性很强,对...
郅闻18773732577问: 为什么用OD260/OD280评定核酸纯度 - ?
翠云区美立回答:[答案] 紫外吸收检测DNA浓度与纯度2007年11月13日 星期二 11:40目的: 了解紫外吸收检测DNA浓度与纯度的原理,掌握测定方法.原理: 核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50...
郅闻18773732577问: 测定DNA含量可以用什么方法? - ?
翠云区美立回答: 外分光光度计 OD260/280比值,如果浓度够大的话可以适当稀释,是OD260在0.1到1之间最好. OD260值为1时,双链DNA一般为50ng/ul.单链DNA一般为40ng/ul,需要具体测的话还是用荧光定量DNA检测试剂盒,用多功能酶标仪检测. 还有一种就是跑电泳,根据已知浓度条带的亮度对比你提的DNA亮度,这个需要分析软件,肉眼是无法正确比较的.
郅闻18773732577问: 紫外分光光度计法测DNA纯度纯度偏小的原因? - ?
翠云区美立回答:[答案] 1.DNA发生了损失,比如降解(虽然很少) 2.溶解DNA的溶液影响,水溶液的吸光低于tris中的吸光