电泳点样量一般是多少

作者&投稿:锁试 (若有异议请与网页底部的电邮联系)

跑电泳时为什么看不到结果 连点样口都没有任何东西 Marker出来了 但颜 ...
跑电泳时看不到结果可能有以下原因:1. 样品问题:样品可能没有充分提取或者制备过程中出现了问题,导致无法在电泳中显示出条带。同时,如果样品中没有任何DNA或RNA,或者样品中含有的DNA或RNA数量较少,也可能导致无法看到结果。2. 电泳操作问题:如果在操作过程中出现错误,如加样时漏掉、点样量过少...

...右一时Marker,大家帮我分析一下,如产生拖带和点样孔有东西的原因...
1 首先你的上样量太大,可能早晨有些拖尾现象;2 点样孔有东西,可能是有蛋白质污染,可以用酚氯仿抽提纯化看看还有没有;3 右起第二个样品,可能是RNA没有除干净,有RNA污染,可以用RNase处理一下;4 最左边一个样,DNA明显发生部分降解,有拖带。

电泳点样时点在醋酸纤维薄膜的毛面还是光面
由于醋酸纤维薄膜亲水性比纸小,浸泡30 min 以上是保证膜片上有一定量的缓冲液,并使其恢复到原来多孔的网状结构。是让漂浮于缓冲液的薄膜吸满缓冲液后自然下沉,这样可将膜片上聚集的小气泡赶着走。点样时,应将膜片表面多余的缓冲液用滤纸吸去,以免缓冲液太多引起样品扩散。但也不能吸得太干,太...

DNA电泳后点样孔处很亮是为什么啊?
。但是你的marker居然也这样。那么可能是第二个原因。2,你的DNA胶的浓度配错了??胶的孔隙过小,不在分辨你的DNA样品的范围内?这样,理论上,样品确实可能滞留于点样孔。3,你的点样孔有杂质,阻碍了DNA的泳动。 可能是你的梳子没洗干净。这个错误是我犯过的。个人意见,你参考参考。

如果样品电泳后很久都没有跑出点样孔,有哪几方面的原因
点样之后放置时间过长,样品已经和电泳液混合起来了,因此,上样量变小,甚至没有,自然就跑不出来。

在pH是7.5的缓冲液中,样品是组氨酸,精氨酸,谷氨酸,电泳后它们的迁移情...
并且,在等电点以上的任一PH,氨基酸带净负电,因此在电场中向正极移动。在一定PH的范围内,氨基酸溶液的PH离等电点越远,氨基酸所携带的净电荷量越大。然后看用什么方式电泳了,不同的电泳会有不同的迁移情况。但分析的原理是一样的。亮氨酸PI是5.9,精氨酸等电点在10左右,pH6.8的体系亮氨酸...

血清蛋白电泳时,为什么点样处不能接触电桥?
成分简介:血清含有各种蛋白质,其等电点均在pH7.5以下,若置于pH8以上的缓冲液电泳时均游离成负离子,再向正极移动。由于其等电点,分子量和分子形状各不相同,其电泳速度就不同。故可将血清中蛋白质区分开来。分子量小,带电荷多者,泳动速度最快。按其游动速度顺序把血清蛋白粗略分为清蛋白,α...

跑胶跑到一半怎么都不往下跑
8. 点样量过大,这可能会导致样品在凝胶中的浓度过大,从而影响电泳的效果,导致跑胶跑到一半不往下跑。9. 电极不干净或接触不良,这可能会导致电泳的效果不稳定,从而影响跑胶的结果,导致跑胶跑到一半不往下跑。需要根据实际情况进行排查,如果仍然无法解决问题,建议咨询相关人士或专业机构寻求帮助。

色谱法 有什么意义?
薄层扫描定量测定应保证供试品斑点的量在线性范围内,必要时可适当调整供试品溶液的点样量,供试品与对照品同板点样、展开、测定和计算。 (二)高效液相色谱法 (high performance liquid chromatography, HPLC) 高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。注入的供...

如何处理双向电泳的样本
总蛋白的双向电泳,考染显色,跑出来的效果不太好,蛋白点不多,各点之间分得也不太开,我的上样量是不是偏少,第一向等点聚焦是不是不完全或者是样品不纯?个人认为急需整理各种组织的高效的处理方法,酚抽法麻烦耗时有时效果却不见得比TCA丙酮好,着实让人郁闷。植物组织样品处理一般情况下用...

盍质13587015941问: 电泳试验中,点样量的多少对分离结果可能会产生怎样的影响 -
市辖区东药回答:[答案] 以1.5mm的板子来计,点样量一般也就20-30ul,在样品浓度适中的情况下,点样量越大,蛋白条带越粗,条带之间容易发生重叠,分辨率下降,点样量少的话,肯定就是条带模糊了.当然了.上述都是理论上的极端情况,实际操作中,只要控制样品浓...

盍质13587015941问: 电泳时具体的加样量的多少急求 -
市辖区东药回答: 电泳加样量是随着你的加样槽的大小来定的,一般加样5-6ul已经足够了,还有的小样孔只能加2ul左右的. (仅供参考)

盍质13587015941问: 电泳时蛋白质上样量是多少 -
市辖区东药回答: 这个一般要根据你的蛋白浓度而定.蛋白浓度1mg/mL时,一般上样20uL.

盍质13587015941问: pcr产物电泳一般需几微升点样?2微升的时候没有条带是否说明就没p出来呢? -
市辖区东药回答: 一般2ul上样,如果你怀疑的话,可以再5ul跑一回,其实主要是看你下游干什么,如果是测序的话,2ul上样没有条带,就算5ul上样量能跑出条带,说明P出来了,浓度太低,产量也不够测序的,如果你是做Genescan的话,2ul上样没条带还有有必要5ul再跑一下的,因为Genescan得分辨率要高很多

盍质13587015941问: 琼脂糖电泳能检测50bp的DNA吗?
市辖区东药回答: 没有问题,我就跑过.2%-2.5%的琼脂糖,电泳100V,35-40分钟左右,不要跑太长,90分钟肯定跑出去了. 点样前先测一下你的样本浓度,DNA上样总质量小于50ng肯定看不到,50bp的样本质量很小,所以需要高浓度样本. 其次,电泳前在胶下端缓冲液再均匀加入5ul左右二溴乙锭,由于ethidium bromide带有少量正电荷,在电泳时移向负极,刚好与移向正极的DNA结合,可以增加X光下的荧光强度. 再有,电泳和琼脂糖的质量关系很大,我在国内做实验的时候有幸体会过国产的琼脂糖有多垃圾,所以......换点儿好的琼脂糖用.祝你成功,如果还有问题,我可以给你上我的实验照片...

盍质13587015941问: western blot电泳时内参上样量怎么确定 -
市辖区东药回答: 内参一般情况下的定义是正常样品中本来就有的相对更为稳定存在分子. 所以,你做好实验的“阳性对照”、“阴性对照”,然后保持与“试验处理样品”同样的样品上样量,再然后对pvdf膜进行剪切以及分别的抗体(内参抗体、目标蛋白的特异性抗体)孵育就可以很放心地做后续分析了.

盍质13587015941问: 电泳时加样量与DNA浓度的关系?
市辖区东药回答: 一般电泳要想跑出可见条带的话,至少需要上样50ng,而DNA的浓度可以用分光光度计测得,所以根据DNA浓度可以知道加样量至少需要多少才行.但是也不是越多越好,加样量适合才会跑出漂亮、清晰的条带.

盍质13587015941问: 请教分子标记SSR标记(STMS)原理和步骤 -
市辖区东药回答: SSR:微卫星DNA又叫简单重复序列,指的是基因组中由1~6个核苷酸组成的基本单位重复多次构成的一段DNA,广泛分布于基因组的不同位置,长度一般在200bp以下.研究表明,微卫星在真核生物的基因组中的含量非常丰富,而且常常是随...

盍质13587015941问: 电泳点样为什么点不进去啊? -
市辖区东药回答: 点样的时候不往下沉是因为密度太小,一般是loading buffer太稀.6乘的buffer理论上用量应该不小于样品的1/5,可以多用一些,比如1/3.如果你是估计的体积,可能估计不准.

盍质13587015941问: 跑凝胶电泳如何确定每个孔的上样量? -
市辖区东药回答: 凝胶电泳每个孔的加样量都是一致的,如果不一致,需要换算,marker按照需求添加. 有条件的话留一道空白的,注意别飘样就可以了. 欢迎追问,求采纳


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