用不同限制酶处理原因

作者&投稿:孔邰 (若有异议请与网页底部的电邮联系)

为什么可以用不同的限制酶来切目的基因和载体
而采用不同限制酶的原因是:载体上可用到的位点较少,确定载体需要的位点之后,再观察目的基因,但是载体上可用的酶可能在目的基因内部有酶切位点。- - - - - 请采纳~

为什么用限制酶切割目的基因时候需要使用两种以上不同的限制酶进行切割...
为了防止目的基因和运载体自身环化。为保证目的基因正序插入运载体,防止反向连接。限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列,并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。

为什么要两种酶才能切割基因(两端要不同的限制酶),不能是同一种吗?
用不同限制酶切割的目的是:保证目的基因和质粒(运载体)的准确连接,避免无效连接过多。可以用不同限制酶切割相同序列的原理:虽然一种限制酶只能识别一种特定的氨基酸序列,但两种限制酶识别的序列可以相包含,例:酶A识别GGATCC序列,酶B识别GATC序列,则GGATCC序列就可以被两种限制酶切割。同步双酶切 ...

为什么可以用不同的限制酶来切目的基因和载体?例如用EcoR 1和Alu 1切...
而采用不同限制酶的原因是:载体上可用到的位点较少,确定载体需要的位点之后,再观察目的基因,但是载体上可用的酶可能在目的基因内部有酶切位点,例如你举得例子,在目的基因内部具有SmaI的位点,因此不能用这个酶,这时我们可以寻找SmaI的同尾酶,这样就可以进行特异性的酶切与连接了,在例子中举例的Sm...

不同限制性内切酶处理的dna片段之间可以进行连接吗?为什么
不同限制性内切酶处理的DNA片段可以进行连接,这是因为限制性内切酶在DNA双链的骨架上特异性地切割,产生具有粘性末端的DNA片段,这些片段可以通过配对互补的粘性末端进行连接。不同限制性内切酶切割的DNA片段可能会产生不同的粘性末端,但是只要这些粘性末端是互补的,就可以通过连接酶将它们连接在一起。这种...

为什么用两种不同的限制酶切目的基因和运载体,就能防止运载体本身、基...
两种不同的限制性内切酶识别并切割的序列是不同的,也就是两种酶分别切割了基因和载体时,产生了两个切口,这两个切口不是粘性末端,不能互补配对,所以不可能连接在一起,如果用一种酶来切那么这样基因中或者是载体上就会有相同的粘性末端,这样基因本身除了切下来的那段之外,剩下的部分在连接酶作用下...

既然一种限制酶是能识别一种特定的氨基酸序列 那为什么在剪切目的基 ...
目的基因—目的基因连接物、质粒自身环化等)过多。可以用不同限制酶切割相同序列的原理:虽然一种限制酶只能识别一种特定的氨基酸序列,但两种限制酶识别的序列可以相包含,例:酶A识别GGATCC序列,酶B识别GATC序列,则GGATCC序列就可以被两种限制酶切割。哪里不明白请追问,满意请采纳,希望对你有帮助~

限制性核酸内切酶有哪几种类型?哪一种类型的限制酶最适合于基因工程,为 ...
Ⅰ类和Ⅲ类限制性核酸内切酶由于切割序列是随机的,与识别序列不统一,因此在基因工程中没有什么价值。[考点]限制性内切酶的类型及特点。按限制酶的组成、与修饰酶活性关系,切断核酸的情况不同,分为三类:Ⅰ类限制性核酸内切酶由3种不同亚基构成,兼具有修饰酶活性和依赖于ATP的限制性内切酶活性,它能...

在构建基因表达载体时,常用两种不同的限制酶切割目的基因和质粒,获得不...
(1)用限制酶切割DNA后,可能产生黏性末端,也可能产生平口末端.若要在限制酶基因工程中,往往采用同种限制酶切割目的基因和质粒以产生相同的黏性末端,再用DNA连接酶使其直接进行连接.(2)RNA聚合酶识别和结合的部位是启动子.将目的基因导 ...

...要获得相同的黏性末端,可以用不同种的限制性核酸内切酶处理”为 ...
例如:-G↓GATCC- 是BamHI酶切位点 -↓GATC- 是BfuCI酶切位点 虽然两种酶的酶切识别位点不同,但是切割后,所得的黏性末端中-GATC部分是相同的

蒋澜18616761323问: 为什么用限制酶切割目的基因时候需要使用两种以上不同的限制酶进行切割? -
信丰县坤复回答: 为了防止目的基因和运载体自身环化.为保证目的基因正序插入运载体,防止反向连接. 限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列,并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶. 扩...

蒋澜18616761323问: “要获得相同的黏性末端,可以用不同种的限制性核酸内切酶处理”为什么? -
信丰县坤复回答:[答案] 例如: -G↓GATCC- 是BamHI酶切位点 -↓GATC- 是BfuCI酶切位点 虽然两种酶的酶切识别位点不同,但是切割后,所得的黏性末端中-GATC部分是相同的

蒋澜18616761323问: 为什么用两种不同的限制酶切目的基因和运载体,就能防止运载体本身、基因本身连起来?我们老师说是因为DNA有极性,但是我画了个图,还是拼起来了 -
信丰县坤复回答:[答案] 两种不同的限制性内切酶识别并切割的序列是不同的,也就是两种酶分别切割了基因和载体时,产生了两个切口,这两个切口不是粘性末端,不能互补配对,所以不可能连接在一起,如果用一种酶来切那么这样基因中或者是载体上就会有相同的粘性...

蒋澜18616761323问: 在什么情况下,切割目的基因和载体时使用不同种限制酶 -
信丰县坤复回答: 如果要获得互补的缺口用于连接,而载体或目标片段上又有多个酶切位点,如果有同尾酶的话就可以使用.一般情况下切割载体和目的基因需要使用相同的酶,偶尔也会使用不同的同尾酶.

蒋澜18616761323问: 基因工程 目的基因和质粒是否要用同一限制酶进行切割?为什么第一节说要用不同的限制酶切割,而第二节又说用同一限制酶切割?到底是什么呢? -
信丰县坤复回答:[答案] 目的基因和质粒要[同时]用同一种限制性核酸内切酶切割,不然就没法连了.但最好用不同的限制酶切两端(切目的基因是不是应该切两下么),防止载体自连或目的基因自连.啊啊,这道题.这题是这样的,你仔细看一下质粒,若用酶...

蒋澜18616761323问: 为什么有题目上说用两种不同限制性核酸内切酶切好 -
信丰县坤复回答: 对的呀、 用两种不同限制性核酸内切酶 就意味着 切的是 两个不同的 碱基序列、 如果用一种 就会造成 自身的环节、也就是 自己刚切完 就又自己连上…… 所以 最好用 两种不同的酶.

蒋澜18616761323问: 为什么用两种限制酶切有两种不同的目的基因(产生两种粘性末端) -
信丰县坤复回答: 因为不同的限制性内切酶会主动识别不同的切点,不同的切点处在不同的碱基处.所以用两种内切酶会产生两种不同的粘性末端.550为您回答.^_^

蒋澜18616761323问: 限制酶可以切到目的基因中间吗 -
信丰县坤复回答: 为什么可以用不同的限制酶来切目的基因和载体? - - - 我们首先要明白酶切的目的是什么!其实就是把质粒切开一个缺口,好让目的基因进入!而采用不同限制酶的原因是:载体上可用到的位点较少,确定载体需要的位点之后,再观察目的基因,但是载体上可用的酶可能在目的基因内部有酶切位点. - - - - - 请采纳~

蒋澜18616761323问: 老师说 基因工程中获取相同的目的基因为什么可以用不同的限制酶 为什么 -
信丰县坤复回答: 酶起催化剂作用而已,只是提取基因,就不用考虑生理机能了.

蒋澜18616761323问: 必须用相同的限制性核酸内切酶剪切目的基因和质粒 -
信丰县坤复回答: 通常情况下,是这样,但如二楼所说,只要切口互补即可,有时会用两种不同的限制酶一起切割目的基因和质粒,为的是防止目的基因和质粒自身环化.


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