流式固定破膜液
流式细胞胞固定破膜单用70%无水已醇吗
这个方法只限于用作PI单染的细胞周期实验，而且最好固定时间不超过半小时。固定如果不能立刻检测，建议更换溶液为PBS和10%BSA。细胞置于酒精时间过长，会出现大量碎片，影响实验结果。如果要使用抗体染胞内抗原，这个方法不好用。建议使用多聚甲醛加去垢剂来固定来透膜。
固定破膜后可以第二天再染色吗
固定破膜后可以第二天再染色。根据查询相关公开信息显示，先孵育胞膜表面的分子的流式抗体（尽可能的饱和表面分子，避免表面分子没有孵育充分进而和胞内该分子的抗体结合，影响结果），再在固定破膜后，孵育胞膜内分子的流式抗体。
请问流式细胞测人调节T细胞(Treg)用多聚甲醛固定和triton破膜可以...
测Treg最好用商品化的破膜剂，因为Foxp3不太好测；有文献说过这个破膜剂的配方，我记得里面至少含皂角素，而不是单纯的triton。
丝网脱膜液的使用方法
在室温下，用干净的无尘布沾取脱模剂并涂抹于模具表面（注：不可使用无纺布，因为脱模剂中的溶剂会溶解无纺布中的粘合剂）；1、先用干净的无尘布蘸满脱模剂，然后在模具表面均匀有序的涂抹，注意不能在刚擦完脱模剂的模具表面工作，需等脱模剂完全固化后才能做产品；2、一般需要涂2-3层底膜，每层底...
流式测细胞周期透膜液TritonX-100怎么使用
这个是用来染胞内，尤其是核内抗原要用到的。细胞先固定，然后透膜。所谓透膜，就是使用去垢剂破坏膜的完整结构，让抗体可以自由进入细胞膜内部。具体的浓度和作用时间需要根据不同的细胞还有实验条件来优化。建议你从文献提供的数据出发，先做一遍，然后根据得到的结果看看效果是否满意，再做调整 ...
Ki67荧光染色
现附上目前实验的步骤： 1、细胞用PBS清洗 2、4%多聚甲醛室温固定10min 3、PBS清洗5min 3次 4、0.3%TritonX-100室温破膜30min 5、吸去多余的破膜液，孵一抗4度过夜（一抗是用0.3%TritonX-100稀释，Santa Cruz公司Ki67，1：200） 6、PBS清洗5min 3次 7、0.3%Trito...
胎膜早破
1、早产儿:30%~40%早产与胎膜早破有关。早产儿易发生新生儿呼吸窘迫综合征、胎儿及新生儿颅内出血、坏死性小肠炎等并发症,围生儿死亡率增加。 2、感染:胎膜早破并发绒毛膜羊膜炎时,常引起胎儿及新生儿感染,表现为肺炎、败血症、颅内感染。感染程度与破膜时间长短有关,若破膜时间超过24小时以上,感染率将大大增加。
如何提升金属环,使液体薄膜破裂,金属环脱出液面?
1、使用吸盘装置：可以在金属环的下方放置一个吸盘装置，利用负压吸附在液体表面上。通过控制吸盘的吸附力度和移动速度，可以平稳地将金属环提升，使液体薄膜破裂，使金属环脱出液面。2、利用旋转力矩：可以使用机械臂装置将金属环固定在旋转轴上，慢慢地旋转轴并拉起，使金属环离开液面。在这个过程中，...
提取内皮祖细胞分离液分离后PBS洗两次转速多少
室温孵育30min，加入PBS洗涤一次，甲醛固定，加入破膜液混匀，冰上30min，PBS洗涤两次，500rpm，5min。PBS是磷酸缓冲液的简称，不仅伪狂犬病毒要用它稀释，一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。PBS是一种缓冲液，他的渗透压与一般细胞的相同，在做细胞试验或者活体组织实验中，一般就把PBS当做水来...
平谷区克赛回答： 这个方法只限于用作PI单染的细胞周期实验,而且最好固定时间不超过半小时.固定如果不能立刻检测,建议更换溶液为PBS和10%BSA.细胞置于酒精时间过长,会出现大量碎片,影响实验结果.如果要使用抗体染胞内抗原,这个方法不好用.建议使用多聚甲醛加去垢剂来固定来透膜.
孛丁15828319850问： 流式测细胞周期透膜液TritonX - 100怎么使用 - ？
平谷区克赛回答： 这个是用来染胞内,尤其是核内抗原要用到的.细胞先固定,然后透膜.所谓透膜,就是使用去垢剂破坏膜的完整结构,让抗体可以自由进入细胞膜内部.具体的浓度和作用时间需要根据不同的细胞还有实验条件来优化.建议你从文献提供的数据出发,先做一遍,然后根据得到的结果看看效果是否满意,再做调整
孛丁15828319850问： 请教,用于流式细胞术的固定液 - ？
平谷区克赛回答： 这要看您做什么实验,如果是dna的pi,那么当然可以用75%或80%的冰乙醇. 但如果要做Annexin V or API等,那么就不能固定了,因为这样会影响表面的特异性分子,造成后期染色剂不能很好的固定到细胞表面.如果明天就可以修好流式,那么做API可以先染色,明天上机.如果做其他表面分子如Annexin V或cd的,只能重做了,因为固定后效果太差!
孛丁15828319850问： 做流式细胞仪用什么固定液 - ？
平谷区克赛回答： 流式细胞仪是通过流体聚焦的原理来让细胞逐一排队通过激光监测点的.这个就需要使用到所谓的鞘液.在流式细胞仪中,鞘液和样本都被加压,快速通过.但是鞘液的流速较快,而样本液的压力要稍高.鞘液环绕在样本液的周围,由于流速很快,而且是轴流形式,所以鞘液和样本并不混合.这也就是为什么可以用水来代替鞘液的原因所在. 一般机器鞘液的流速和压力是固定的,而可以通过样本的压力来控制样本的流速.样本流速,压力越高,会使样本中心轴流的直径越大,这样就会降低检测时的分辨率.所以在流式细胞仪检测的时候要使用高浓度,低流速
孛丁15828319850问： 流式细胞仪测定细胞倍性的溶液Otto1如何配制? - ？
平谷区克赛回答： 你就按照你写的那个配方加东西就可以了.柠檬酸应该是0.5 M citric acid monohydrate, 0.5% Tween 20.很简单啊
孛丁15828319850问： 做流式细胞仪之前,如何固定细胞? - ？
平谷区克赛回答：[答案] 一 般来说都是将细胞悬液离心并弃上清后加入固定液,我们加的是70%的冰乙醇,加的量根据你细胞的多少.你这个涉及的测蛋白,那么加多聚甲醛的量和时间可能 要控制得严一些才能保证最低限度不破坏a-SMA的结构.如果单测细胞凋亡和周期的话...
孛丁15828319850问： 流式细胞仪流式管里的液体要多少 - ？
平谷区克赛回答： 1. 收集细胞{数目约(1~ 5)*10 6个/ml},500 ~ 1000 r/min离心5min ,弃去培养液. 2. 3ml pbs洗涤1次. 3. 离心去pbs,加入冰预冷的70% 的乙醇固定,4℃,1—2小时. 4. 离心弃去固定液,3mlpbs重悬5 min. 5. 400目的筛网过滤1次,500—10 00r/min离心5min,弃去pbs. 6. 用1ml pi染液染色,4℃避光30 min……欢迎采纳!!
孛丁15828319850问： 流式细胞术是不是只能检测细胞表面蛋白 - ？
平谷区克赛回答： 还可以检测细胞内的蛋白.需要:1、收集细胞;2、多聚甲醛溶液固定细胞;3、细胞打孔(破膜);4、封闭;(此步有时候可省略);5、孵育抗体;6、上机检测;其中2和3有时可同时进行.
孛丁15828319850问： 用流式细胞仪作植物倍性鉴定这个实验时,所用植物叶片能否提前摘下保存吗?做实验时在取出用 - ？
平谷区克赛回答： 最好是当天用当天取吧,放4°C冰箱里应该也可以.
孛丁15828319850问： 测细胞周期做流式前期一定要酒精固定吗 - ？
平谷区克赛回答： 测细胞周期就可以用PI单独染色,也可以用PI加上BrdU/EdU.不论何种方法,都需要固定细胞.使用BrdU还要做细胞膜和核膜的通透,以利于抗体的进入.一般常见的,只用PI染色的方法,都是使用酒精固定.优点是快速.而BrdU的方法则可以使用多聚福尔马林.
