双荧光素酶检测波长
双荧光素酶报告基因实验原理?
4、荧光素酶报告基因的内参控制：实验中通常会同时转染一种稳定表达的荧光素酶基因（如Renilla荧光素酶基因），用作内参。这是为了校正在不同样本中可能存在的转染效率等差异。5、荧光检测仪读数：使用荧光检测仪对加入细胞含有荧光素底物的溶液进行读数。由于两种荧光素酶产生荧光的波长不同，可以使用不同...
都发光的生物有??
这类发光过程包括加氧、激发与转移，如海萤的发光：它在自身分开的腺体中分别合成荧光素和荧光素酶，当把两者同时喷进水里时就会在水中反应而发光。波长460纳米，光色为蓝色。细菌 它的反应机制与前三种不同。底物在催化循环中会形成还原型核黄素磷酸盐和醛化合物，当遇到荧光素酶和氧时，就会形成一种...
skanlt荧光素酶激发波长
光的波长越小，光子能量越大。荧光是由激发光激发的。激发光的光子打到荧光物质上，经过一系列变化，激发出荧光。
什么是发光细菌?
概括的说就是,细菌生物发光反应是由分子氧作用,胞内荧光酶催化,将还原态的黄素单核苷酸(FMNH2)及长链脂肪醛氧化为FMN 及长链脂肪酸,同时释放出最大发光强度在波长为450-490nm处的蓝绿光。其中三步反应产生三种中间产物,寿命极短,很难分离出来。 荧光素酶是生物体内催化荧光素或脂肪醛氧化发光的一类酶的总称,细菌...
荧光素受到激发后,决定荧光颜色的是
荧光素受到激发后,决定荧光颜色的是发射波长。荧光素含义 萤光素是一个通用名称，泛指所有 在生物中发现，能产生生物光的化合物。萤光素一般透过由一种酶作催化的氧化过程，令化合物进入激发态的中间体，然后当衰变回到其基态时以可见光的形式放出能量。有关合物可能同时也是萤光素酶与发光蛋白的基质。...
归纳概括细菌检验方法
3、在荧光计数仪上测定荧光的量。根据测定已知不同数目细胞的荧光量作出标准曲线,根据标准曲线可得到各孔中的活细胞数。八、三磷酸腺苷检测法(ATP法):1、ATP反应液(Bio-Orbit)是粉末状混合物,含有荧光素、荧光素酶、0.5mmol醋酸镁、50mg BSA和0.1μmol无机焦磷酸。在4℃可以保存1个月。用前用10ml含2mmol\/L ...
化学发光剂的常用发光剂
鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行，通常以0.1mol\/L pH8.6Tris缓冲液作底物液。要注意是:首先,鲁米诺和H2O2在无HRP催化时也能缓慢自发发光，而在最后光强度测定中造成空白干扰，因而宜分别配制成2瓶试剂溶液，只在用前即刻混合;其次, HRP发光增强剂如某些酚试剂（如邻－碘酚）或萤火虫荧光素酶可...
荧光显微镜怎么看绿色荧光
抗光漂白能力强，因此适用于定量测定与分析。由于GFP荧光的产生不需要任何外源反应底物，因此GFP作为一种广泛应用的活体报告蛋白，其作用是任何其它酶类报告蛋白无法比拟的。但因为GFP不是酶，荧光信号没有酶学放大效果，因此GFP灵敏度可能低于某些酶类报告蛋白，比如萤火虫荧光素酶等。
光波在透镜前和透镜后有什么不同?
首先,荧光素酶催化荧光素的氧化。换言之,荧光素与氧发生化学结合,生成氧化荧光素。这种反应也会产生光,通常在光谱的蓝色或绿色区域。有时,荧光素与一种被称为光蛋白的大结构中的催化蛋白和氧结合。当离子(通常是钙)加入到光蛋白中时,它会氧化荧光素,导致光活性和不活跃的氧化萤光素。 在海洋生物中,生物发光...
luminescenceg与fluorescence的区别
Luminescence：化学发光，这种形式的光，来自于酶学反应提供的能量，所以如果你的试剂盒中，提供了底物，而你的样品可以表达荧光素酶，则需要用这个模块进行检测。因为这种模式下，没有任何外源的光信号，完全是靠样品和检测试剂的反应发光，所以这个检测模式下，仪器的检测灵敏度更高。Luciferase是通过这个部分...
沙河口区小牛回答： 双荧光素酶报告基因载体 报告基因检测被广泛应用于研究基因表达及外部刺激下原核和真核细胞的反应.luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统.可以极其灵敏、高...
蓟受17513235097问： 如何使用多功能酶标仪检测双荧光素酶 - ？
沙河口区小牛回答： 报告基因检测被广泛应用于研究基因表达及外部刺激下原核和真核细胞的反应.Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统.可以极其灵敏、高效地检测基因的表达.但...
蓟受17513235097问： 怎样检测 双荧光素酶报告基因检测试剂盒 - ？
沙河口区小牛回答： (1) 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点.(2)设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段,将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒(pGL3-basic)中.(3)筛选阳性克隆,测序.扩增克隆并提纯质粒备用.
蓟受17513235097问： luminescenceg与fluorescence的区别 - ？
沙河口区小牛回答： Luminescence:化学发光,这种形式的光,来自于酶学反应提供的能量,所以如果你的试剂盒中,提供了底物,而你的样品可以表达荧光素酶,则需要用这个模块进行检测.因为这种模式下,没有任何外源的光信号,完全是靠样品和检测试剂的反应发光,所以这个检测模式下,仪器的检测灵敏度更高.Luciferase是通过这个部分检测的. Fluorescence:这是荧光.这种可检测的光是来自于外源光提供的能量.所以通常试剂盒中会有荧光染料,并会要求调节仪器的激发光和发射光.如果试剂盒里面根本没提激发波长和发射波长的信息,多半不需要这个检测模块.GFP,RFP是用这个模块检测的.
蓟受17513235097问： 怎样构建荧光素酶报告基因载体 - ？
沙河口区小牛回答： pGL3-basic是检测启动子的荧光报告载体,当然是将miR的启动子序列构建上去. 内切酶按照你基因和多克隆位点的序列来选择.
蓟受17513235097问： 普通酶标仪测定时为什么选择双波长测定 - ？
沙河口区小牛回答： 酶标仪判读结果是每个孔吸光度的值,所以一般可以分为单波长和双波长测量,用单波长测量时,96孔微板会留一个空白孔.因为孔的吸光度值包括了孔壁+实验体,为了得出实验体的值,必须留一个空白孔测试出孔壁值,结果扣减.但由于每个孔不可能完全一样,科学来讲不能用一个孔吸光度值代表所有的,所以酶标仪才有了双波长.双波长的意思是,会有两次不同波长来测总值,第二个波长只测孔壁吸光度值,结果每个孔各自扣减得出结果.理论上结果更为科学和准确.市面上单波长仪器有Hebe酶标仪,进口的有sunrise酶标仪.
蓟受17513235097问： 如何用双通道荧光定量PCR检测SNP？
沙河口区小牛回答： 第一、你需要确定你的双通道的荧光定量PCR仪是否支持你所标记的这两种荧光燃料,就是它们的激发波长是否正好是你的PCR仪的滤光片检测波长; 第二、确保你的引物之间扩增片断不要太大,最好是控制在200BP以内; 第三、Taq酶最好是选择一种耐热性能更好的酶,因为这种反应对酶的质量要求更高一些,至于各种离子浓度,满足一般PCR反应的要求就是了. 第四、就是注意荧光信号采集的时间,可以在退火温度上再加一个相同的时间用来采集荧光信号.
蓟受17513235097问： 酶标仪上的OD值有两个450nm是什么意思?3ABC - ELISA实验中用到的OD值到底应该是多少? - ？
沙河口区小牛回答： 是450nm和630nm,一个是检测波长,一个是参比波长.
蓟受17513235097问： 荧光素酶检加入检测液后荧光肉眼能看到吗 - ？
沙河口区小牛回答： 这要看你荧光量和环境亮度了.
蓟受17513235097问： cy5激发波长和发射波长 ？
沙河口区小牛回答： cy5激发波长最大650nm,发光波长最大670nm.在氪氩灯647nm下它们可被激发出98%的荧光,在氦氖灯下633nm为63%.Cy5可以和很多其他的荧光基团一起用在多标记的实验中.由于它的最大发射波长在670nm,Cy5很难用裸眼观察,而且不能用汞灯作理想的激发.通常观察Cy5时采用具有合适激发光和远红外检测器的共聚焦显微镜.在水相封片剂中应当加入抗淬灭剂.使用传统的表面荧光显微镜时,不推荐使用Cy5.
