免疫荧光共染步骤
DNA荧光组织化学染色的方法
一步双染色法先将两种荧光标{己抗体按适当比例混合(A+B)，按直接法进行染色。二步双染色法先用TRITC标记的A抗体进行免疫荧光染色，再用FITC标记的B抗体染色，根据两种抗体的动物种属不同，可用直接法也可用间接法，结果A抗原呈现橘红色荧光，而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中，常用的方法是免疫荧光组织...
急求间接免疫荧光双染实验步骤
FITC：操作步骤 将纯化的IgG抗体对PH9～9.5碳酸盐缓冲液透析过夜，透析后抗体液移入小烧杯中 ↓ 称取适量IFTC，加入二甲亚砜(DMSO)(FITC～1mg\/1ml DMSO)使终浓度为1mgFITC／1mlDMSO FITC／IgG比例:如IgG浓度为1mg／ml，FITC／IgG比例约为50μgFITC／mgIgG；如IgG为5～10mg／ml，则比例为25μg...
荧光色染发操作方法
一、zo-1的免疫荧光，步骤如下：1. 细胞在盖片上生长融合到95%-100%时，从孵箱中取出。2. 用预温的1×PBS洗3次，每次10分钟。3. 4%的甲醛室温固定20-30分钟。4. 1×PBS洗3次，每次10分钟。5. 0.2%Triton X-100透化2-5分钟。6. 1×PBS洗3次，每次10分钟。7. 5%BSA室温...
免疫荧光染色怎么做的
让我们通过一个激光共聚焦显微镜下的荧光图像来实践。首先，打开图像并选择单通道（Image-Color-Split Channels），如果是RGB格式，记得进行通道分离。对于高精度的16-bit或32-bit图像，可以直接进行阈值调整，但要保留尽可能多的信号信息，避免损失。接着，使用Image-Adjust-Threshold设定阈值，选择默认值以...
超全攻略 !一文理清免疫荧光实验步骤、技巧及疑难问题
染色步骤：封闭样本，一抗和二抗孵育，洗涤后加入DAPI染色并封片。实验中需注意的问题包括对照实验设计、细胞密度控制、荧光信号强度、背景干扰和非特异性染色。选择合适的对照样本，保持适宜的细胞密度，优化荧光标记和洗涤过程，以避免这些问题。ABclonal提供了丰富的细胞器和亚细胞结构标志物抗体列表，帮助实验...
免疫荧光免疫荧光技术的实验步骤
免疫荧光技术的实验步骤分为直接免疫荧光法测抗原和间接免疫荧光法测抗体两部分，以下是详细步骤:1. 直接免疫荧光法:① 将0.01mol\/L, pH7.4的PBS滴于标本片上，保持湿润10分钟后弃去。② 滴加适当稀释的荧光标记抗体，覆盖标本，保温30min（如需）。③ 清洗玻片，用0.01mol\/L, pH7.4的PBS...
巨详细免疫荧光实验操作步骤实操分享
首先，进行细胞固定和透化过程：将含有细胞的盖玻片放入1 × PBS中，连续冲洗3次，每次3分钟。 接着，用4%的多聚甲醛固定盖玻片15分钟，再用1 × PBS清洗3次，每次3分钟。如果细胞膜上没有表达抗原，此步骤可省略。 使用0.5% Triton X-100（用1× PBS稀释）在室温下对细胞膜进行15分钟的通透...
什么是免疫荧光染色诊断
2. 操作过程：诊断过程中，样本首先经过特定的预处理，然后应用荧光标记的抗体进行孵育。一旦抗原与抗体结合，通过荧光显微镜观察，可以看到特定的荧光信号，这些信号的位置和强度可以反映样本中特定抗原的分布和数量。这种检测方法具有极高的灵敏度和特异性。3. 应用领域：免疫荧光染色诊断广泛应用于医学诊断...
免疫荧光染色注意事项 | 附零失误封片技巧
揭秘免疫荧光染色的秘籍，零失误封片技巧大公开！首先，确保切片的无痕脱蜡至关重要！延长二甲苯脱蜡步骤，每个阶段30分钟，共三次，让组织与玻片紧密结合。别忘了在脱蜡后烤片1小时，提升效率，避免展片不充分导致的皱褶问题，皱褶区域易引发脱片困扰！血清封闭：时间就是黄金 常规的1小时封闭时间，不妨...
免疫荧光原理
直接法的操作流程是：首先将标记的特异性荧光抗体直接添加到抗原样本上，经过适当的温度和时间处理，然后用清水清洗掉未参与反应的抗体，待样本干燥后，封片并进行镜检观察。间接法则是针对未知抗原的检测。首先，用未标记的特异抗体（第一抗体）与样本反应，随后去除未反应的抗体。接着，使用标记的抗抗体（...
延边朝鲜族自治州环磷回答： FITC:操作步骤 将纯化的IgG抗体对PH9~9.5碳酸盐缓冲液透析过夜,透析后抗体液移入小烧杯中↓称取适量IFTC,加入二甲亚砜(DMSO)(FITC~1mg/1ml DMSO)使终浓度为1mgFITC/1mlDMSOFITC/IgG比例:如IgG浓度为1...
广咐19668416691问： 免疫荧光的方法有什么注意环节 - ？
延边朝鲜族自治州环磷回答： 1、冰冻切片制备:建议用新鲜组织,否则组织细胞内部结构破坏,易使抗原弥散.选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等,防止裂片和脱片严重. 2、组织切片固定:切好片风干后立即用冰丙酮等固定液进行固定 5-10 min,尤其要较长...
广咐19668416691问： 荧光色染发操作方法 - ？
延边朝鲜族自治州环磷回答： 免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合来显示目的蛋白,主要包括蛋白和一抗结合,其次是带有荧光基团的二抗识别并结合一抗,荧光显微镜下即可观察到荧光,下文主要列举了三种细胞免疫荧光染色的实验步骤.一、zo-1...
广咐19668416691问： L - 多聚赖氨酸包被细胞爬片免疫荧光步骤 - ？
延边朝鲜族自治州环磷回答： 第一天:1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次,每次3min;2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min, PBS浸洗玻片3次,每次3min;3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤);4. PBS浸洗...
广咐19668416691问： 细胞免疫荧光怎么封片 - ？
延边朝鲜族自治州环磷回答： 细胞免疫荧光的详细操作步骤 1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍.注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心. 2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍. 3,0.2%Triton X 100通透10分钟,PBS洗三遍. 4, 与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,PBS洗三遍. 5.,一抗4度湿盒内过夜,也可37度2小时,感觉前者效果好,PBS洗三遍. 6,二抗室温2小时,或者37度1半小时,PBS洗三遍. 7,最好用DAPI染核,然后直接照荧光片. 8,蒸馏水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周.
广咐19668416691问： 细胞免疫荧光同来源一抗可以染吗 - ？
延边朝鲜族自治州环磷回答： 细胞免疫荧光同来源一抗可以染 细胞膜和细胞浆表达,如果实现免疫荧光染色,能不能双染要看具体的目的 如果是 co-localization 证明两种蛋白在同一个细胞中表达是可以双染的 如果想进一步呈现两种蛋白在一个细胞中不同的亚细胞分布定位,这个取决于两个因素,第一是蛋白本身的表达是否有明显的亚细胞定位特征.第二需要高分辨率的显微镜,能有助于区别两种蛋白在一个细胞中不同的亚细胞定位 所以细胞膜和细胞浆表达,如果实现免疫荧光染色,能不能双染要看具体的目的
广咐19668416691问： 免疫组织化学染色法的检查过程 - ？
延边朝鲜族自治州环磷回答： 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法,称荧光抗体法.用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法,称荧光抗原法.免疫荧光组织化学分直接法、间接法和补体法.一、直接法(1) 检查抗原方法这是最简便、快速的方法,用已...
广咐19668416691问： 求助:细胞膜蛋白免疫荧光染色问题 - ？
延边朝鲜族自治州环磷回答： 细胞膜蛋白免疫荧光染色问题 1、问:用免疫荧光方法做组织切片和培养细胞内的蛋白,两者操作过程有哪些不同? 参考见解:只是固定方法不同.细胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛,而染色方法是一样的. 2、问:近期要做免疫荧光双标...
广咐19668416691问： 我的荧光免疫染色出了什么问题 - ？
延边朝鲜族自治州环磷回答： 你好,细胞生物学产品专家齐氏生物很高兴为您解答,以下是荧光免疫染色常见的5个问题:1、问:用免疫荧光方法做组织切片和培养细胞内的蛋白,两者操作过程有哪些不同?参考见解:只是固定方法不同.细胞固定用甲醇,切片固定用多聚...
广咐19668416691问： 基质胶上怎样做细胞免疫荧光试验 - ？
延边朝鲜族自治州环磷回答： 免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种.它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术. 操作步骤: 1.细胞铺板:将细胞以合适的密度(注意:一般情况下...
