克隆和扩增的区别
表达载体和克隆载体一样吗?有什么区别?实验室常用有哪些?
1.不一样 2.载体的分类 按功能分成：（1）克隆载体:都有一个松弛的复制子,能带动外源基因,在宿主细胞中复制扩增.它是用来克隆和扩增DNA片段（基因）的载体.（2）表达载体 :具有克隆载体的基本元件（ori,Ampr,Mcs等）还具有转录\/翻译所必需的DNA顺序的载体.3各自特点 克隆载体：大多是高拷贝的载体...
PCR片段直接测序和PCR片段经克隆后测序的结果有何区别?
而PCR片段经克隆后测序是测定了某一个分子的DNA序列。在几十个循环的PCR扩增过程中，很难保证某一个分子的任何点都不发生错配。因此，PCR片段经克隆后的测序结果，往往存在着一些错配的序列，和PCR片段直接测序的结果相比有些碱基会有所不同。这种错配现象的多少取决于PCR扩增时使用的DNA聚合酶的保真...
PCR扩增的X基因片段与克隆载体连接
已经得到扩增的目的基因片段和克隆载体→对两者分别进行酶切（选要相同的限制性内切酶对两者进行切割）→酶切产物经琼脂糖凝胶电泳回收→克隆载体和目的基因进行连接（一般选用T4连接酶）→大肠杆菌感受态细胞的制备（常见的有氯化钙法）→转化（将重组载体导入感受态细胞中）→将上一步得到的大肠杆菌进行涂板...
PCR扩增的介绍
聚合酶链式反应简称PCR（Polymerase Chain Reaction） (又称：多聚酶链式反应) PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火（复性）及适温延伸等反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸...
克隆载体和表达载体的区别
二、要求不同 1、克隆载体：能在宿主细胞中复制繁殖，而且最好要有较高的自主复制能力；容易进入宿主细胞，而且进入效率越高越好；容易从宿主细胞中分离纯化出来， 这才便于重组操作。2、表达载体：常用细菌质粒进行构建，构建过程中运用限制性核酸内切酶切割出与目的基因相合的末端（多为黏性末端，也有平...
克隆载体和表达载体的区别在哪里?
克隆载体一般有较强的复制能力，利于基因的保存和扩增，而且提供丰富的酶切位点等等。它不必有强启动子，因为不重于表达。表达载体是基因克隆结束后，为了在特定细胞内表达而构建的。他重点在于表达，有各种各样的启动子适应于不同种类的细胞，并且有各种各样，如诱导等可控的表达调控方式。
分子克隆知识
NLS 具有与核输出信号 nuclear export signal (NES) 相反的功能，后者针对细胞核外的蛋白质。Tm值与退火温度：PCR产物纯化的方法 在PCR扩增完成后，反应体系中除了DNA片段，还存在离子、dNTP、引物及聚合酶等物质，这些物质会对后续的实验（克隆、测序等）产生不利的影响，需要对产物进行纯化回收。 回收...
Pcr克隆基因与一般DNA的克隆有什么异同
由此可知，PCR克隆与DNA克隆区别不大，唯一不同时DNA克隆中的目的DNA是自然状态下的双链DNA，比如说构建基因组文库中产生的克隆就属于这一类；而PCR克隆则是由单链DNA作为模板，扩憎后得到的双链DNA（同时，根据扩增时采用的酶不同，可以得到不同末端的双链DNA），用于不同特性的克隆构建中。
做pcr,rtpcr和做克隆基因的引物有何不同
不同点很多。最简介回答，是目的不同，侧重点也不同：普通pcr。只考虑能不能扩增出来就行。rtpcr。上荧光的话，对引物质量要求高，得做个hplc或者page纯化；其次对引物设计要求高，考虑得率，特异性等因素。克隆引物。考虑加入常见酶切位点，导入何种目的载体，碱基密码子偏好性等。
什么是双克隆
经过扩增便能得到大量的细菌或噬菌体,从中可以分离出所需基因的DNA片段。 应用与前景 建立和使用基因文库是分离基因,特别是分离高等真核生物基因的有效手段。如果一个哺乳动物的基因组是 3×109碱基对,直接从细胞中提取并分离出某一特定基因的 DNA片段在技术上是很困难的。但是在基因文库中,不同的 DNA片段都...
秦都区麝香回答： 有以下优点:1.可大批量2.量/价格比很高3.方便下游的工作,比如连接,突变等等,好操作.4.便于保存序列.5.质粒便于运输.
巧胆13290519545问： 基因载体与基因表达载体的区别? - ？
秦都区麝香回答： 在基因工程中,携带目的基因进入宿主细胞进行扩增和表达的工具称为copy载体,载体实际上是具有运载能力的DNA.依据功能,载体可以分为克隆载体和表达zhidao载体.克隆载体用于在宿主细胞中克隆和扩增外援片段;表达载体则用于在宿主细胞中获得外援基因的表达产物.
巧胆13290519545问： 表达载体和克隆载体一样吗?有什么区别?实验室常用有哪些? - ？
秦都区麝香回答：[答案] 1.不一样 2.载体的分类 按功能分成: (1)克隆载体:都有一个松弛的复制子,能带动外源基因,在宿主细胞中复制扩增.它是用来克隆和扩增DNA片段(基因)的载体. (2)表达载体 :具有克隆载体的基本元件(ori,Ampr,Mcs等)还具有转录/翻译...
巧胆13290519545问： DNA分子杂交为什么不属于分子水平克隆技术? PCR为什么属于?转基因技术与DNA重组技术的区别? - ？
秦都区麝香回答： 我在这里就不跟你用专业术语解释了,用专业术语解释你都能自己找到,我就用最简单的方式跟你说.首先,你要搞清楚什么叫做克隆.克隆,在分子生物上其实就是“无性繁殖”,可能我这么说欠妥,但是你就可以这么理解.DNA分子杂交为...
巧胆13290519545问： 基因克隆的步骤是什么? - ？
秦都区麝香回答： 不知道大家对基因克隆方面的技术了解多少,经过较长时间的总结和实践,有了一些自己的体会,拿出来与大家分享一下,给大家做一个抛砖引玉的作用吧. (1)是酶切位点的选择.我的实验室有三种常用的酶,在设计PCR产物的酶切位点之前...
巧胆13290519545问： PCR与DNA分子克隆 - ？
秦都区麝香回答： 这个有多方面的原理: 一个:PCR有错误,虽然这个错误率很低,普通的酶大概在千分之一,而高保真的在百万分之一,但毕竟有. 二个:基因保存的问题:PCR产物当然也可以保存,但保存时间长了会不会出问题?能保存几年?克隆进质粒就不一样了,这个基本可以保存很久,哪一天想要这个基因,拿出来摇一小瓶就可以了. 三个:单克隆性,PCR片断可能有长有短(还有突变),而质粒就不一样了,可以挑单克隆,测序正确后就认为这是我们想要的基因. 四个:做基因表达时连接方便.如果PCR产品上没有酶切位点,克隆载体上有,切下来可以连到表达载体上. 象有些人做基因库时,都是克隆到载体上,肯定是这样有很多优点的.
巧胆13290519545问： PCR扩增产物的克隆的原理及应用 - ？
秦都区麝香回答： PCR在扩增的过程中可能会出现突变的情况,测序结果中就可能会出现套峰之类的情况,而克隆之后测序理论上每个单克隆里面只会出现一种PCR产物的插入片段,可以挑选不同的克隆进行测序,直到找到自己想要的那个.
巧胆13290519545问： 普通基因扩增和PCR的区别 - ？
秦都区麝香回答： 区别: 对未知序列进行测序,可以通过PCR把整段基因都扩增出来,但是因为现在测序的技术限制,DNA片段两端的序列是测不出来的,直接PCR产物测序的结果只能获得基因中间部分序列.所以利用细菌的T载体进行TA克隆,把基因整合到质粒上扩增,然后用质粒上的引物再PCR,让整个目的基因成为新一轮PCR产物的中间部分,这样再测序就能够获得整个目的的全长序列. 另外,PCR扩增平均每1000个碱基就有两个错误,保真性远不及菌体内复制.
巧胆13290519545问： 增殖,克隆和分裂有什么不同? - ？
秦都区麝香回答： 细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖.单细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的个体.多细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的细胞,用来补充体内衰老和死亡的细胞;同时,多细胞生物可以由一个受精卵,经过细胞...
巧胆13290519545问： 扩增基因的两种途径的区别是什么呢,如下 - ？
秦都区麝香回答： RT-PCR法优点是可以获得cDNA克隆,缺点是提取总RNA比较困难(因RNA很容易降解). 从基因组DNA扩增优点是可以基因组DNA可以很容易地获取,但缺点是真核生物的基因一般由外显子和内含子构成,所以如果直接PCR扩增基因组DNA,只能获得含有内含子的目的基因片段.这这也是两种方法根本区别. 一般来说如果分离原核生物基因直接PCR扩基因组DNA,如果要获得真核生物目的基因就要提取总RNA后进行RT-PCR.
