sgRNA是什么东西
本文系以Fox模型为兰本而设计的一种建立5S RNA二级结构的微型计算机方法。将5S RNA分子的核苷酸顺序作为信息输入,经Z—80微型计算机处理约4分钟后,即可建立在仅考虑二级相互作用的情况下,相当于Fox模型的具有最低自由能的二级结构。 本方法获得的结果与同样以Fox模型为兰本的其它方法所得到的结果相符。本方法简便、快速和费用低廉,易于推广应用。
sgrna是single guide RNA（单导向RNA）的缩写。在CRISPR/Cas9系统中sgRNA与gRNA是一个概念。
CRISPR（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats）是原核生物基因组内的一段重复序列，是生命进化历史上，细菌和病毒进行斗争产生的免疫武器，简单说就是病毒能把自己的基因整合到细菌，利用细菌的细胞工具为自己的基因复制服务。
细菌为了将病毒的外来入侵基因清除，进化出CRISPR-Cas9系统，利用这个系统，细菌可以不动声色地把病毒基因从自己的基因组上切除，这是细菌特有的免疫系统。
扩展知识：
功能特点：
CRISPR是生物科学领域的游戏规则改变者，这种突破性的技术通过一种名叫Cas9的特殊编程的酶发现、切除并取代DNA的特定部分。这种技术的影响极其深远，从改变老鼠皮毛的颜色到设计不传播疟疾的蚊子和抗虫害作物，再到修正镰状细胞性贫血等各类遗传疾病等等。
该技术具有非常精准、廉价、易于使用，并且非常强大的特点。
CRISPR来自微生物的免疫系统，这种工程编辑系统利用一种酶，能把一段作为引导工具的小RNA切入DNA，就能在此处切断或做其他改变。以往研究表明，通过这些介入，CRISPR能使基因组更有效地产生变化或突变，效率比TALEN（转录激活因子类感受器核酸酶）等其他基因编辑技术更高。
虽然CRISPR有许多优点，在人类癌细胞系列中，它也可能产生大量“误伤目标”，尤其是对不希望改变的基因做修改。
shRNA是short hairpin RNA 的缩写。翻译为“短发夹RNA”。shRNA包括两个短反向重复序列，中间由一茎环（loop）序列分隔的，组成发夹结构，由pol Ⅲ启动子控制。随后在连上5-6个T作为RNA聚合酶Ⅲ的转录终止子。在活体中输送“小干扰RNA”（siRNA）的一种办法是，将siRNA序列作为“短发夹”克隆进质粒载体中。当送入动物体内时，该发夹序列被表达出来，形成一个“双链RNA”（shRNA），并被RNAi通道处理。然而，对成年小鼠肝脏中shRNA的表达的长期效应所做的一项研究为我们敲响了警钟。该研究结果表明，很多shRNA在小鼠中表达时是有毒的。这种经常是致命的毒性似乎是由shRNA与内生微RNA之间为与Exportin-5结合所展开的竞争造成的。Exportin-5是一个参与将分子输送出细胞核的因子。人们对开发基于shRNA的疗法非常感兴趣，而此前几乎没有证据表明shRNA在活体中有很强毒性。
体内表达shRNA（短发夹RNA）的设计
shRNA
1. 克隆到shRNA表达载体中的shRNA包括两个短反向重复序列，中间由一茎环（loop）序列分隔的，组成发夹结构，由pol Ⅲ启动子控制。随后再连上5-6个T作为RNA聚合酶Ⅲ的转录终止子。
2. 两个互补的寡核苷酸两端须带有限制性酶切位点。
3. Stratagene发现29个寡核苷酸较之原先推荐的23个寡核苷酸可以更有效地抑制目的基因。
4. 在启动子下游的酶切位点下方紧连一个C，使插入片段和启动子有一定空间间隔以确保转录的发生。
5. ShRNA目的序列的第一个碱基必须是G以确保RNA聚合酶转录。如果选择的目的序列不以G开头，必须在紧连正义链的上游加一个G。
6. shRNA插入片段中的茎环应当靠近寡核苷酸的中央。不同大小和核苷酸序列的茎环都被成功的运用过。其中包含一个独特的限制性酶切位点的茎环利于检测带有shRNA插入片段的克隆。在比较了众多不同长度和序列的茎环，5'TCAAGAG3'序列最为有效。
7.5-6个T必须放置在shRNA插入片段尾部以确保RNA聚合酶III终止转录。
8.在正义链和反义链序列上不能出现连续3个或以上的T。这可能导致shRNA转录的提前终止。
祝顺利!有问题,请追问.有帮助,望采纳.
Single guide RNA，CRISPR基因编辑中所用到的单一序列的向导RNA。可通过体外转录方式合成，以及化学合成方式获得。sgRNA的品质是影响CRISPR/Cas9系统的编辑效果成败的关键因素之一，sgRNA的纯度（即品质）不好，对编辑的效率会产生很大影响，同时也会影响细胞的活性。化学合成相较体外转录方式合成的sgRNA具有几大优势，其中最主要的优势是在化学合成过程中对sgRNA 进行不同的化学修饰。包括通过在sgRNA的3’和5’端进行甲基（M）和/或甲基硫代（MS）修饰来提高sgRNA在体内的稳定性，防止其被体内的核酸外切酶降解，从而提高编辑效率；同时可以通过包括甲基膦酸脂（MP）在内的修饰提高编辑的特异性、降低脱靶效应；除此之外，化学合成的sgRNA纯度更高，转染后细胞的活性相较体外转录的sgRNA在转染后的细胞活性更高。
sgRNA（Small Guide RNA），即称为小向导RNA，是CRISPR基因敲除、敲入系统中的重要组成部分，早先发现的guide RNA由两部分组成——tracRNA和crRNA,两部分融合表达后，即sgRNA也能很好的行使guide的功能，与cas9蛋白结合，引导cas9酶靶向基因组DNA进行剪切。
single guide RNA 单导向RNA
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siRNA和guideRNA是同一种东西么?
gRNA分子是能通过正常的碱基配对途径，或通过G—U配对方式与mRNA上的互补序列配对，编辑前的mRNA分子中删除A，由gRNA和mRNA形成了一个杂合分子，可以为插入U提供模板，这样被删除的A又重新插入杂合分子中的mRNA部分。完成后，guideRNA解离，mRNA用作翻译模板。
scramblesiRNA什么东西?涉及了哪些生物技术
gRNA分子是能通过正常的碱基配对途径,或通过G—U配对方式与mRNA上的互补序列配对,编辑前的mRNA分子中删除A,由gRNA和mRNA形成了一个杂合分子,可以为插入U提供模板,这样被删除的A又重新插入杂合分子中的mRNA部分.完成后,guideRNA解离,mRNA用作翻译模板.
大脑中的记忆储存在RNA中吗?
其实意识是一种集合效应，就像蜜蜂社会中的个体并不知道他每天忙碌采蜜筑巢的意义，但是一群蜜蜂却可以分工作业精确的造出完美的结构！我们造的计算机也是一样，每个与非门电路只知道通过电子后输出高低电平，但是上亿个门电路在“程序”的控制下却可以输出复杂的运算结果！大脑中的记忆或意识也一样，是整体...
植物的遗传密码可不可以修改?
“基因敲除”就是植物密码修改的技术之一，它是指将一定的基因从基因组中删除。在植物中，敲除某个基因后会产生外表形状的变化，通过表型可以分析某个基因与某种性状或功能是否有关系。同时，基因敲除也为定向改造生物，培育新型生物提供了重要的技术支持。
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说说经典的语言,名句
4 To reform a man, you must begin with his grnadmother.--Victor Hugo 要改造一个人，你得从他的祖母开始。－－维克多·雨果 5 To give up one's freedom is to give up one's qualification of being a man--Rousseau 放弃自已的自由，等于放弃自已的做人的资格。－－卢梭 6 Gratitude ...
RNA的提取方法
2、甲酰胺解聚法：破碎细胞同上，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，再透析获得DNA可得DNA200kb左右。3、玻璃棒缠绕法：用盐酸胍裂解细胞，将裂解物铺于乙醇上，然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅，DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。4、异丙醇沉淀法：基本同1法，仅用二倍容积异丙醇替代乙醇...
为什么我的手柄在NBA2008中用不了?
步骤，打开JOYTOKEY设置好手柄与键盘对应的键。不要关闭他，进去游戏。不要进去频道 ，再ALT+ESC，找到篮球文件中Program Files\\街头篮球\\HackShield中的EGRNAPX2.dll文件，就是这个东西把手柄给锁定了。右击他用UNLOCKER解锁JOYTOKEY。再进游戏，就可以了。 或者你窗口化游戏一边设置一边打。这样就可以设置...
茹熊康尔： 信使RNA存在范围和性质mRNA存在于原核和真核生物的细胞质及真核细胞的某些细胞器(如和)中
云安县17715256040： wps模板 - wps文字怎么把两个模板合成一?wps文字怎么把两个模板合成一个 ？
茹熊康尔： 你好,将两个文件合成一个. 可以在WPS文字中,打开其中一个文档,选择“插入”选项卡“对象”命令中的“文件中的文字”命令,找到另一个文档插入. 这样的办法是不能把其它要素插入,可以把两个文档全打开,在其中一个文档中全选,使用复制命令.然后到另一个文档中,使用粘贴命令.
云安县17715256040： 吃精液能美容吗? - ？
茹熊康尔： 楼上所谓蛋白质:首先明确表态你肯定没学好生物.高中生物书告诉我们,精子没有细胞质细胞膜,只有细胞核,也就是说几乎只含脱氧核糖核酸(英文缩写为DNA),而不含其他任何东西.精液中除了精子之...
云安县17715256040： 小孩把积木吃到肚子了请问能拉出来?小孩把积木吃到肚子了请问能拉出 ？
茹熊康尔： 你好,首先说这种情况要根据手链形状以及大小综合考虑.如果没有棱角,而且比较细的话,大多数可以通过肠道排出体外. 鉴于这种情况可以做腹透看一下,如果宝宝出现呕吐严重伴有,腹胀腹痛的话要及时的手术.
云安县17715256040： 每月定期存350元十年后整取连本带利可以拿多少? ？
茹熊康尔： 看你的意思是零存整取,按现在人民银行规定零存整取最长存期为5年,5年零存整取的现行利率为3.5%. 你现在每月定期存350元,5年后可得利息1868.13元,本息合计为22868.13元. 如果5年后维持现行利率不变(如果有变,现在谁也没法计算!) 22868.13元再存5年定期,到时本息为: 22868.13*(1+5.5%*5)=29156.87(元) 另外你仍然月存350元的5年零存整取,再过5年后可得本息合计为22868.13元. 29156.87+22868.13=52025(元). 十年后整取连本带利可以拿52025元.
云安县17715256040： 需要所有临床上药品名称的缩写 ？
茹熊康尔： 英文缩写 药品名称5Fu 5-氟脲嘧啶 6MP 6-巯基嘌呤 ADR 阿霉素 APC 复方阿斯匹林 ... SD 磺胺嘧啶 SFZSIZ 磺胺二甲异恶唑 SG 磺胺脒 SDM 磺胺邻二甲氧嘧啶 SM2 磺胺...
云安县17715256040： 设置红绿灯有什么意义? ？
茹熊康尔： 走在马路上,在每一个十字路口都会有红绿灯,它叫交通指示灯,如 果你看到红灯亮了,你所在的方向的行人和车辆就要停下来等一等,你看 到绿灯亮了,就可以走过去了,这时,另一个方向的行人和汽车都在等待. 这是最基本的交通规则,为什么要遵守红绿灯的规则呢?设置红绿灯是为了给我们创造一个更加有秩序的交通环境.现在汽车 很多、很拥挤,如果有的车不看红绿灯随便走,很容易造成交通堵塞甚至 交通事故.如果每辆车、每个人都听红绿灯的指挥,堵车状况就会减轻很多, 交通也会更有秩序.如果在红灯时穿过马路,这时很容易发生交通事故.在交通法规中,闯红灯的人即使被撞,也要承担主要责任.
云安县17715256040： 民生银行金积存计划交易是什么? ？
茹熊康尔： 1.民生金积存计划交易业务是指民生银行为拥有民生网银的境内个人客户提供的以人民币为交易结算货币的实物黄金投资业务.我行以上海黄金交易所报价为基础对境内个人客户报价,在此报价基础上,为客户提供实物金申购服务、赎回服务以及实物金提取服务.客户购买的民生金记入客户民生金账户,可在产品服务时段内赎回或在柜台网点转化为实物金. 2.基本特点:为实盘交易,不允许进行透支买卖;投资方式多样化;资金交割和清算在交易当日完成.
云安县17715256040： 如何防止博客的照片被别人使用?如何加上新浪网的水印啊 ？
茹熊康尔： 可以你自己设计一些有性格的水印,把水印加到照片上,这样即是别人复制,也带着你的名字. 也许会出现这样情况,但得看你的照片是否有利用价值,如果你不放心的话最好不要传个人生活照片. 当然,有可能你传以后会一炮走红,也说不定啊,现在靠博客出名的人很多呢,比如“芙蓉姐姐”(开个玩笑,莫介意哦) 新浪博客目前没有这方面的保护.
