色谱法中保留时间越长越好吗
就是要他们不一样,这样才能分离。
这些物质在色谱柱里经过了吸附,因为他们的极性不一样,反相的话极性越小,出峰越晚。正相的话是相反的。经过了色谱柱分离之后,检测器检出才能出现一个一个独立的色谱峰。
从理论的角度讲,这些物质并不是一样的物质。官能团不一样,它们的极性也就不一样。色谱柱的填料是一个一个微孔颗粒,这些物质在里面进进出出,然后就会被吸附,然后再出来,反反复复就完成了分离。
简单地说,在就像是几个人,虽然体能看起来差不多,不过如果让他们去跑马拉松的话,肯定或多或少会有一点差距。那个进进出出的微孔颗粒就是为了加长长跑的距离,让它们分出一个一二三来。
流速越快保留时间越靠前,越慢越靠后。 升温速率越快,保留时间越靠前,越慢保留时间越靠后。 高沸点的化合物保留时间靠后,低沸点的化合物保留时间靠前。 色谱柱的极性越强,极性的化合物保留时间越靠后,非极性的化合物保留时间越靠前。
影响的因素很多,大致分为客观因素和主观因素。客观因素是:GC的载气流速,柱温,电路因素,色谱柱类型,分流比,采集频率,样品的性质,仪器的老龄化等。
主观因素:进样技术,采集与进样时间的差异。
但是,一般我们分析时看的相对保留时间,所以保留时间多少会有些差异也是正常的现象。
分析要考虑多方面因素:1,快速分析,就是时间问题。你如果一个样品运行两三个小时,那太影响效率了。2,准确度。样品保保留时间越短越不利于分离,但时间越长,样品在柱子里扩散越严重,越容易影响分析结果。3,成本。不只是上面说的时间成本,还要考虑人力成本,还有试剂,用电,仪器损耗等成本。尤其试剂,用乙腈做流动相,时间过长消耗肯定是非常大的。
所以说,做什么都有个度。那对于分离来说,什么是最优化呢?我个人觉得,如果说是理想的分离,那在所有的峰都分离的情况下,前后两个峰分离度都是2左右就是最好的了(药典要求是1.5),因为1.5的分离度刚好是基线分离,如果再大一点,对于分离还可以有个缓冲,所以选择了2。这样,也会使样品的扩散也最小,时间最快,成本也最低。当然这要求开发分析方法的时候,要用合适的条件,可能要通过实验选择好流动相和柱子,同时还可能要用梯度才能达到这样的效果。
在方法开发的时候就要考虑一些特殊的物质了。比如反相色谱时,如果检测的是胺基的盐酸盐,因为这类物质基本没太多的保留,色谱柱要选择尽大保留的C18,而不能用C8柱,流动相就可能要选择甲醇水系统,必要时可能要用离子对流动相。而另一些保留太大的物质,比如极性非常弱的苯或蒽,这类物质保留如果太大,可能通过用C8柱,洗脱能力强的流动相来把保留时间提前。
一般来说,在达到合适的分离的情况下,反相色谱主峰保持在3-20分钟内比较合适,最好是5-10分钟出峰。这也同相适合气相色谱。
但是要考虑到时间啊,保留时间过长做实验的时间也要相应延长,如果结果差不多就好了,没有必要做太久。
色谱分离中,计算某组分保留体积的重要依据是什么
色谱柱的填充因子:色谱柱的填充因子是指色谱柱中固定相的体积与色谱柱总体积的比值。它反映了色谱柱的填充情况,影响着组分的保留时间和保留体积。填充因子越大,意味着固定相的体积越大,组分在固定相中的扩散阻力越大,保留时间越长,保留体积也越大。因此,计算组分的保留体积需要考虑色谱柱的填充因子...
为什么可以利用色谱峰的保留值进行色谱定性分析
答:因为在相同的色谱条件下,同一物质具有相同的保留值,当用已知物的保留时间与未知祖坟的保留时间进行对照时,若两者的保留时间相同,则认为两者是相同的化合物。色谱又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利用不同溶质(样品)与固定相和流动相之间的作用力(分配、吸附、离子交换等)的差别...
柱色谱法的分离原理是什么?
它是纯化和分离有机或无机物的一种常用方法。其中固定相极性大于流动相的色谱为正相色谱,相反的为反相色谱。根据相似相溶原理:混合物中在固定相中溶解度大的物质后出柱,保留时间长,难被洗脱。色谱法按固定的状态可分为柱色谱、平板色谱和棒色谱三种,而实验室中最常用的是柱层析和薄层层析,以及...
为什么在高效液相色谱中保留时间是考核操作条件优化的参数
正确说应该是相对保留时间 及保留时间-死时间 因为物质在色谱中的色谱行为决定着他的保留时间 所以一个物质的在相同的条件下是可以重复出峰的,而判断是否是同一物质最简单的就是看保留时间了,保留时间的长短同时也决定你一个样品分析的时间长短,所以要求优化 ...
高校液相色谱分离原理是什么?
对于反相色谱,极性越小的物质,流动相的极性越大,保留时间越长。极性越小的物质,流动相的极性越小,保留时间越短。对于极性大的物质来说,流动相的极性对其保留时间影响较小,而正相色谱正好相反。高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \\ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱...
高效液相保留时间越小分子量越大吗
你好,高效液相是指流动相为液相的色谱分离方法,有许多中分离机制,比如反相,正相,体积排阻,离子交换,等等。同样大小的分子在不同类型的分离方法中保留时间都是不一样的。楼主要尽量详细描述你的液相色谱方法才能做出推断哦。 希望采纳。
气相色谱法检测物质,怎样把出峰时间提前与把基线信号值降低?
出峰时间退后:即保留时间变长,组分在色谱柱中呆的时间长了,可能原因,载气实际流速下降,或柱固定相对组分保留能力变强 基线越来越高:可能是柱流失加剧,即柱子不行了,也可能是气体纯度有问题,包括载气、氢气或空气。个人想法,供参考!
色谱法的色谱理论
关于保留时间的理论保留时间是样品从进入色谱柱到流出色谱柱所需要的时间,不同的物质在不同的色谱柱上以不同的流动相洗脱会有不同的保留时间,因此保留时间是色谱分析法比较重要的参数之一。保留时间由物质在色谱中的分配系数决定:tR = t0(1 + KVs \/ Vm)式中tR表示某物质的保留时间,t0是色谱系统...
表面活性剂在色谱柱上保留时间会提前吗
不是的.这要具体情况具体分析.分析要考虑多方面因素:1,快速分析,就是时间问题.你如果一个样品运行两三个小时,那太影响效率了.2,准确度.样品保保留时间越短越不利于分离,但时间越长,样品在柱子里扩散越严重,越容易影响分析结果.3,成本.不只是上面说的时间成本,还要考虑人力成本,还有试剂,用电,仪器...
高校液相色谱分离原理是什么?
容量因子的物理意义:表示一个组分在固定相中停留的时间(t'R)是不保留组分保留时间(t0)的几倍。k=0时,化合物全部存在于流动相中,在固定相中不保留,t'R=0;k越大,说明固定相对此组分的容量越大,出柱慢,保留时间越长。容量因子与分配系数的不同点是:K取决于组分、流动相、固定相的...
廖牵永瑞: 在液-固吸附色谱,,液-液分配色谱这两种液相色谱中才涉及到正相色谱及反相色谱.液-固吸附色谱(固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相是吸附作用差异来分离的.吸附作用越强,K值越大,保留时间越长)液-液分配色谱(是将固定...
呼伦贝尔市18870556386: 影响气相色谱中保留时间的因素有什么 - ?
廖牵永瑞: 流速越快保留时间越靠前,越慢越靠后. 升温速率越快,保留时间越靠前,越慢保留时间越靠后. 高沸点的化合物保留时间靠后,低沸点的化合物保留时间靠前. 色谱柱的极性越强,极性的化合物保留时间越靠后,非极性的化合物保留时间越靠前. 影响的因素很多,大致分为客观因素和主观因素.客观因素是:GC的载气流速,柱温,电路因素,色谱柱类型,分流比,采集频率,样品的性质,仪器的老龄化等. 主观因素:进样技术,采集与进样时间的差异. 但是,一般我们分析时看的相对保留时间,所以保留时间多少会有些差异也是正常的现象.
呼伦贝尔市18870556386: 液相色谱中流动相、固定相和保留时间的关系是怎样的 - ?
廖牵永瑞:[答案] 一般极性大的样品用反相色谱柱,流动相极性大于固定相极性,样品极性越小,保留时间越长.极性小的样品用正相色谱柱,流动相极性小于固定相极性,样品极性越大,保留时间越长.当然如果有其它保留机理,如氢键等,波流时间会变...
呼伦贝尔市18870556386: 色谱峰的保留时间与进样量大小有关么 - ?
廖牵永瑞: 对于同一样品,进样量大小在其他色谱条件不变的条件下,保留时间不会变,而进样量大小改变的是的峰高及峰面积大小. 但实际操作中,如色谱条件两天之间做的可能会有一定大小的变化时,比如压力大小有波动,但流动相、流速不变的时候,可能会影响保留时间,但这种压力变化引起的保留时间变化不大.
呼伦贝尔市18870556386: 高效液相色谱分析法中如果组分保留时间太长,可采取什么措施调节 - ?
廖牵永瑞: 可以适当提高流速,来缩短目标物被固定相吸附的保留时间.也可以改变一下流动相的比例或梯度洗脱的比例,通过调整流动相的极性来缩短目标物被固定相的吸附时间.
呼伦贝尔市18870556386: 想问问在气相色谱中为什么相同的物质有不同的保留时间? - ?
廖牵永瑞: 一般情况下,相同的物质在相同的色谱条件下有相同的保留时间.但是如果色谱条件,如柱长、固定相种类、载气流速不同的情况下,相同的物质也具有不同的保留时间.另外,如果样品基体十分复杂的情况下,由于基体干扰可能也会使相同的物质具有不同的保留时间,但是一般差异不会很大的
呼伦贝尔市18870556386: 为什么在高效液相色谱中保留时间是考核操作条件优化的参数 - ?
廖牵永瑞: 正确说应该是相对保留时间 及保留时间-死时间因为物质在色谱中的色谱行为决定着他的保留时间 所以一个物质的在相同的条件下是可以重复出峰的,而判断是否是同一物质最简单的就是看保留时间了,保留时间的长短同时也决定你一个样品分析的时间长短,所以要求优化
呼伦贝尔市18870556386: 被测组分在色谱仪中的保留时间有何决定 - ?
廖牵永瑞: 这个问题问的过于宽泛.不同的色谱中组分的保留时间依据不同的条件决定.但以下几个方面是相同的: 1,流速.流速越大保留时间越短. 2,温度.温度越高保留时间越短. 不同的方面主要是流动相的比例,比如用的最多的反相色谱流动相中有机相越多,样品出峰越快.林林总总,需要什么请自行根据说明书材料查询
呼伦贝尔市18870556386: 高效液相色谱:如果所检测的物质保留时间为6分钟,那么分析时间设多少合适?7分钟可以吗? - ?
廖牵永瑞: 肯定太短,标准品的保留时间6分钟出峰,那最好方法要走18分钟. 一般实验的话,我觉得10分钟是要的.
呼伦贝尔市18870556386: 气相色谱法中 什么是保留时间? 在定性分析中有着怎样的意义? - ?
廖牵永瑞: 保留时间差不多就是样品在柱中停留的时间吧,也就是出峰的时间.同一样品保留时间相同,保留时间不同,样品肯定不同,保留时间相同,样品可能相同,