wb一抗二抗原理
WB一抗二抗是乙肝病毒感染的免疫学检测方法。WB是Western Blotting的缩写,即蛋白印迹技术,可以检测人体内是否存在抗乙肝病毒的抗体。一抗是指检测乙肝表面抗原(HBsAg)的抗体,二抗是指检测乙肝表面抗体(HBsAb)的抗体。
一抗检测原理:将待测血清与乙肝表面抗原(HBsAg)结合,形成抗原-抗体复合物。然后使用特定的抗体与这个复合物结合,这个特定的抗体被标记上了一种检测信号,如荧光素或酶。如果待测血清中存在HBsAg的抗体,则会与这个特定的抗体结合,形成一个新的复合物,这个复合物可以被检测信号识别出来。
二抗检测原理:将待测血清与乙肝表面抗体(HBsAb)结合,形成抗原-抗体复合物。然后使用特定的抗体与这个复合物结合,这个特定的抗体被标记上了一种检测信号,如荧光素或酶。如果待测血清中存在HBsAb,则会与这个特定的抗体结合,形成一个新的复合物,这个复合物可以被检测信号识别出来。
通过检测一抗和二抗的结果,可以确定乙肝病毒感染的状态,以及是否存在免疫保护力。
免疫组化中一抗与二抗有什么要求?谢谢!
比如一抗是鼠抗人,二抗必须是×抗鼠的。×表示可以是羊,兔,马等。一抗是单抗,二抗是多抗,是抗一类同种异型的Ig,带有特殊的可产生发光现象的标记。条件允许尽量选择进口,一抗abcam,Santa,CST等值得信赖,二抗的话国产的就行了。源性一抗如果需要做共定位,那么就需要不同源性的且要能够用于...
一抗和二抗结合不上
特异性问题、浓度或比例不合适。1、特异性问题:一抗和二抗是针对不同的抗原或抗体,无法识别相同的表位。这是因为两者的特异性不同,无法形成有效的结合。2、浓度或比例不合适:一抗和二抗的浓度或比例不适当,也会导致结合失败。浓度过高或过低,或者两种抗体的比例不匹配,都回导致无法形成稳定的复合...
人的石蜡组织如何选择一抗二抗
一抗选择实验类型的种属,二抗选择种属来源。一抗确定你的实验类型,Elisa,WB,IHC,ICC,还是FACS,确定实验样本的种属,Human,Mouse,还是Rat。二抗主要根据一抗种属来源来决定购买二抗来源,如一抗是小鼠来源,那二抗就买抗小鼠的即可。一抗二抗是指非抗体性抗原和能和抗体结合,即抗体的抗体。全称第...
如何选择二抗
选择合适的二抗是实验成功的关键因素,主要依赖于一抗的特性和实验需求。首先,确保二抗与一抗的匹配性。如果一抗是单克隆抗体,通常需要与相同类别或亚类的二抗结合,如小鼠IgM对应抗小鼠IgM或抗小鼠IgG。对于未知类别的一抗,抗IgG是一个通用选择。二抗的选择取决于其特异性:全抗体(H+L):如anti-...
westernblotting中的一抗和二抗有什么用
一抗特异性识别目的蛋白~二抗特异性识别一抗~
酶联免疫反应中为什么要用二抗来标记一抗呢
二抗上有特殊的能与某种物质反应显色的部位,当二抗与一抗结合后,只需要检测二抗就可以知道一抗是否与抗原结合。
用于小鼠的一抗二抗可以用于大鼠实验吗
抗体-抗原有着严格的耦合性,小鼠的用在大鼠实验中,理论上是可行的,不过实验结果还是有待验证。比如剂量问题,有没有效果,甚至会不会有免疫反应,都要进行严格验证。谢谢!
免疫组化中一抗与二抗有什么要求
当然有.比如一抗是鼠抗人,二抗必须是×抗鼠的.×表示可以是羊,兔,马等.一抗是单抗,二抗是多抗,是抗一类同种异型的Ig,带有特殊的可产生发光现象的标记.
什么是酶标二抗?为什么要用二抗而不是一抗在EILSA检测法中
使用二抗也只是能部分结合在一抗上面进行识别,而一炕上的标记物是只要一抗结合上了,就一定会有标记物能将其识别出来,而且其信号放大效果要比使用二抗方法好的多!
免疫组化实验原理(Vector kit)
IHC整个过程除了洗,我们加的试剂有SP6000(vector)、5%NGS(goat)、Avidin、Biotin、一抗、二抗、A+B complex、DAB。下面说一下试剂的作用原理。SP6000是Vector公司出的试剂,用于封闭内源性的过氧化氢酶。由于二抗后面偶联的HRP就是一种过氧化氢酶,如果内源性过氧化氢酶太多,...
弋缪复合: WB即是指WesternBlot印迹方法,又称为免疫印迹,是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙,烯酰胺凝胶电泳,对不同分子量的蛋白质进行分离,并通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持物(NC膜或PVDF膜)上,用抗靶蛋白的非标记抗体(一抗)与转印后膜上的靶蛋白进行特异性结合,再与经辣根过氧化物酶标记(偶联)的二抗结合,最后用E,CL超敏发光液试,剂检测.如果转印膜上含有靶蛋白,经X光片曝光、显影,后,则会在X-光片上出现特异性蛋白,条带,详情可以咨询菩禾生物.
公主岭市17164216777: 谁知道ELISA,Western Blot,免疫组化 这三个比较有什么区别,越详细越好!谢谢了,我给加分 - ?
弋缪复合: 免疫组化 是融合了免疫学原理(抗原抗体特异性结合)和组织学技术(组织的取材、固定、包埋、切片、脱蜡、水化等),通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素)显色,来对组织(细胞)内抗原进行定位、定性...
公主岭市17164216777: 急切求解WB,RT - PCR,IHC生物学专业名词的详细解释,拜托! - ?
弋缪复合: WB: whole blood 全血(即未经任何方式分部分离的血液) Western Blot,“Western免疫印迹法”.是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的...
公主岭市17164216777: sp法中一抗、二抗指的是什么? - ?
弋缪复合: 一抗、二抗一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体.即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体.第一抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合.第二抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体.主要用于检测抗体的存在.e.g....
公主岭市17164216777: 什么是Westernblot? - ?
弋缪复合: Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测.对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测. 一、原理与Southern或Northern杂交方法类似,但...
公主岭市17164216777: 什么是wb实验? - ?
弋缪复合: WB实验是通过聚丙烯酰野中胺凝胶电泳(PAGE)将混合蛋白质样品分离后,利用特殊虹吸或电场装置印迹至固相介质(例如PVDF膜)上,再以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原. 与相对应的第一抗体特异性结合,之后再与酶或同位素标...
公主岭市17164216777: 蛋白电泳WB中的重复利用问题 - ?
弋缪复合: 电泳液和转膜液都可重复利用3次左右 考马斯亮兰染液也可以重复用.新配的染液10分钟即可,重复3次后要染30分钟. 一抗二抗可以重复利用,但是注意要在5%milk中加入0.2% sodium azide ,并且用完以后放入4度保存,我的经验重复使用4-5次是肯定没有问题的.如果保存不当,就会污染微生物,只能丢弃.
公主岭市17164216777: western blot 的工作原理 - ?
弋缪复合: 原理:先制备蛋白质样品,再利用SDS-PAGE原理,分离不同的蛋白质,再将分离的蛋白质进行转膜,以便固定在新膜上进行抗原-抗体结合.用固定在膜上的蛋白质作为抗原与对应的非标记抗体(一抗)结合.由于此过程中,可能有未结合到抗原的抗体遗留,故需要清洗,以便保存特异性结合的抗原-抗体结合物.抗原抗体结合物暴露出一个Fc片段,相应的二抗可以结合到这个片段上,形成抗原-一抗-二抗结合物,再用相应的过氧化物酶或碱性磷酸酯酶标记到二抗上,由于加入的标记物相对质量分子很大,可以用离心作用将其沉淀下来,如果抗原与抗体结合,便可以一起沉淀下来,最后通过显色反应或放射自显影法便可检测凝胶中的蛋白成分了.
公主岭市17164216777: western blotting 中的ECL什么意思 - ?
弋缪复合: electrochemiluminescence 化学发光试剂, 一般是WB的最后一步,加入1:1的1号溶液和2号溶液,覆盖pvdf膜,可以显色 原理是ECL中含有发光的底物,二抗上连接着酶(一般是HRP),使ECL底物发光.
公主岭市17164216777: western blot的实验原理(详细的) - ?
弋缪复合: Western Blot与Southern印迹杂交或Northern印迹杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗. 经过PAGE分离的蛋白质样品(跑PAGE 胶的原理你懂吧~~~),转移到固相载体(硝酸纤维素膜NC膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变(这个过程就是转膜). 以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分.该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达.