测定水中微生物(包括细菌真菌等)数量的方法

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水中细菌真菌会传播到空气中吗~

水中细菌真菌会传播到空气中吗,
细菌和真菌孢子都很容易漂浮,平流层都有。
有由于空气中缺乏营养物及适当的温度,细菌不能繁殖,且常因阳光照射和干燥作用而被消灭。只有抵抗力较强的细菌和真菌或细菌芽胞才能存留较长时间。室外空气中常见产芽胞杆菌、产色素细菌及真菌孢子等;室内空气中的微生物比室外多,尤其是人口密集的公共场所、医院病房、门诊等处,容易受到带菌者和病人污染。如飞沫、皮屑、痰液、脓汗和粪便等携带大量的微生物,可严重污染空气。某些医疗操作也会液成空气污染,如高速牙钻修补或超声波清洁牙石时,可产生微生物气溶胶;穿衣、铺床时使织物表面微生物飞扬到空气中,清扫及人员走动尘土飞场也是医院空气中微生物的来源。室内空气中常见的病原菌有脑膜炎奈瑟氏菌、结核杆菌、溶血性球菌、白喉杆菌、百日咳杆菌等。空气中微生物污染程度与医院感染率有一定的关系。空气细菌卫生检查有时用甲型溶血性链球菌作为指示菌,表明空气受到人上呼吸道分泌物中微生物的污染程度。

细菌在人体的分布
(一)正常菌群的含义
人自出生后,外界的微生物就逐渐进入人体。在正常人体皮肤、粘膜及外界相通的各种控道(如口腔、鼻咽腔、肠道和泌尿道)等部位,存在着对人体无害的微生物群,包括细菌、真菌、螺旋体、支原体等。它们在与宿主的长期进化过程中,微生物群的内部及其与宿主之间互相依存、互相制约,形成一个能进行物质、能量及基因交流的动态平衡的生态系统习惯称之为正常菌群(Normal flora)。正常菌群大部分是长期居留于人体的又称为常居菌,也有少数微生物是暂时寄居的,称为过路菌。
(二)人体正常菌群的分布
皮肤上的细菌 往往与个人卫生及环境情况而有所差异。最常见的是革兰氏阳性球病,其中以表皮葡萄球菌为多见,有时亦有金黄色葡萄球菌。当皮肤受损伤时,可引起化脓性感染,如疖、痛。在外阴部与肛门部位,可找到非致病性抗酸性耻垢杆菌。
口腔中的细菌,口腔温度适宜,含有食物残渣,是微生物生长的良好条件。口腔中的微生物有各种球菌、乳酸杆菌、梭形菌、螺旋体和真菌等。
胃肠道的细菌,因部位而不同,胃酸的杀菌作用,健康人的空肠常无菌。若胃功能障碍,如胃酸分泌降低,尤其是胃癌时,往往出现八叠球菌、乳酸杆菌、芽胞杆菌等。成年人的空肠和回肠上部的细菌很少,甚至无菌,肠道下段细菌逐渐增多。大肠积存有食物残渣,又有合适酸硷度,适于细菌繁殖,菌量占粪便的1/3。大肠中微生物的种类繁多,主要有大肠杆菌、脆弱类杆菌、双歧杆菌、厌氧性球菌等,其他还有乳酸杆菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、变形杆菌、真菌等。
呼吸道的细菌,鼻腔和咽部经常存在葡萄球菌、类白喉杆菌等。在咽喉及扁桃体粘膜上,主要是甲型链球菌和卡他球菌占优势,此外还经常存在着潜在致病性微生物如肺炎球菌、流感杆菌、乙型链球菌等。正常人支气管和肺泡是无菌的。
泌尿生殖道的细菌,正常情况下,仅在泌尿道外部有细菌存在,如男性生殖器有耻垢杆菌,尿道口有葡萄球菌和革兰氏阴性球菌及杆菌;女性尿道外部与外阴部菌群相仿,除耻垢杆菌外,还有葡萄球菌、类白喉杆菌和大肠杆菌等。阴道内的细菌随着内分泌的变化而异。从月经初潮至绝经前一般多见的为阴道杆菌(乳酸杆菌类);而月经初潮前女孩及绝经期后妇女,阴道内主要细菌有葡萄球菌、类白喉杆菌、大肠杆菌等。
机体的多数组织器官是无菌的,若有侵入的细菌未被消灭,则可引起传染。因而在医疗实践中,当手术、注射、穿刺、导尿时,应严格执行无菌操作,以防细菌感染

器材及培养

 材料和试剂
蒸馏水, 自来水, 取自儿童公园的湖水, 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基.
仪器或其他用具
灭菌三角烧瓶, 灭菌带玻璃塞瓶, 灭菌培养皿, 灭菌吸管, 灭菌量筒.
 研究方法
采用平板菌落记数技术测定水中细菌总数.

 水样的采取
 自来水
先将自来水水龙头用火焰灼烧3 min 灭菌, 再开放水龙头5 min 后, 以灭菌三角烧瓶接取水样, 以待分析.
 公园的湖水
应取距水面10~ 15 cm 的深层水样, 先将灭菌的带玻璃塞瓶, 瓶口向下浸入水中, 然后翻过来, 除去玻璃
塞, 水即流入瓶中, 盛满后, 将瓶塞盖好, 再从水中取出, 最好立即检查, 否则需放入冰箱中保存.
 细菌总数的测定

 

  •  自来水
    Step 1 用灭菌吸管吸取1 mL 水样, 注入灭菌培养皿中. 共做两个平皿.
    Step 2 分别倾注约15 mL 已溶化并冷却到45 e 左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基. 并立即在桌上做平面
    旋摇, 使水样与培养基充分混匀.
    Step 3 另取一个空的灭菌培养皿, 倾注肉膏蛋白胨琼脂培养基15 mL, 作对照.
    Step 4 培养基凝固后, 倒置与37 e 温箱中, 培养24 h, 进行菌落记数.


 

  • 公园的湖水
    Step 1 稀释水样, 取三个灭菌空试管, 分别加入9 mL 灭菌水. 取1 mL 水样注入第一管9 mL 灭菌水
    内, 摇匀, 再自第一管取1 mL 到下一管灭菌水内, 如此稀释到第三管, 稀释度分别为10- 1 , 10- 2 , 10- 3 .
    Step 2 自最后三个稀释度的试管中各取1 mL 稀释水加入空的灭菌培养皿, 每一稀释度共做两个培养皿.
    Step 3 各倾注15 mL 已溶化并冷却到45 e 左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基并立即在桌上摇匀.
    Step 4 凝固后倒置于37 e 恒温恒湿培养箱中培养24 h.


 菌落记数方法
1) 计算相同稀释度的平均菌落数. 若有大片菌苔生长时, 弃用; 以无片菌苔生长的培养皿记数. 若片状菌
苔大小不到培养皿的一半, 其余一半分布均匀, 将此一半计数@ 2.
2) 选择平均菌落数在30~ 300 之间的平板. 只有一个符合此范围时, 以该平均菌落数@ 稀释倍数. 有两
个在30~ 300 之间时, 按两者菌落总数比值决定, 比值小于2, 取平均; 比值大于2, 取较小的菌落数.
3) 若所有稀释度的平均菌落数均大于300, 则应按稀释度最高的平均菌落数@ 稀释倍数.
4) 若所有稀释度的平均菌落数均小于30, 则按稀释度的平均数@ 倍数.
5) 若所有稀释度的平均菌落数均不在30~ 300 之间, 则以最近30 或300 的平均菌落数@ 稀释倍数.

 

 

微生物的含量能否反应水的营养化程度?

能 

 

 

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用五点取样法 测定 能反应水的营养化程度

菌落计数 GB 4789.2-2010


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