在用高效液相色谱柱测定中药材供试品溶液时，为什么要取续滤液？
如果你对HPLC方法比较熟悉，只是没有做中药材和制剂的经验，需要注意的主要是样品的前处理。以反相为例：
1.中药材的成分比较复杂，首先是提取，采用适合的溶剂，超声、回流等，使目标物有较高的回收率；其次是要将与目标物极性差异较大的杂质除掉，可以用萃取、过柱、固相萃取等；然后浓缩或稀释到适合的浓度，经过滤或离心除去机械杂质。
2.制剂一般已经经过了提取，杂质要少一些，但可能增加了辅料，所以还要考虑除去辅料的干扰。
遵照下面的要求选择合适的方法，HPLC法外标、内标两种，检测器一般UV即可。
含量测定分析方法验证的可接受标准简介
摘要：本文介绍了在对含量测定所用的分析方法进行方法学验证时，各项指标的可接受标准，以利于判断该分析方法的可行性。
关键词：含量测定 分析方法验证 可接收标准
在进行质量研究的过程中，一项重要的工作就是要对质量标准中所涉及到的分析方法进行方法学验证，以保证所用的分析方法确实能够用于在研药品的质量控制。为规范对各种分析方法的验证要求，我国已于2005年颁布了分析方法验证的指导原则。该指导原则对需要验证的分析方法及验证的具体指标做了比较详细的阐述。但是文中未涉及各具体指标在验证时的可接受标准，国际上已颁布的指导原则中也未发现相关的要求。另一方面，大多数药品研发单位在进行质量研究时，已逐步认识到分析方法验证的必要性与重要性，大都也在按照指导原则的要求进行分析方法验证，但验证完后却因没有一个明确的可接受标准，而难以判断该分析方法是否符合要求。本文结合国外一些大型药品研发企业在此方面的要求，提出了在对含量测定方法进行验证时的可接受标准，供国内的药品研发单位在进行研究时参考。
1．准确度
该指标主要是通过回收率来反映。验证时一般要求分别配制浓度为80％、100％和120％的供试品溶液各三份，分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率。
可接受的标准为：各浓度下的平均回收率均应在98.0%-102.0%之间，9个回收率数据的相对标准差（RSD）应不大于2.0%。
2．线性
线性一般通过线性回归方程的形式来表示。具体的验证方法为：
在80％至120％的浓度范围内配制6份浓度不同的供试液，分别测定其主峰的面积，计算相应的含量。以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归分析。
可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于0.998，Y轴截距应在100％响应值的2％以内，响应因子的相对标准差应不大于2.0%。
3．精密度
1）重复性
配制6份相同浓度的供试品溶液，由一个分析人员在尽可能相同的条件下进行测试，所得6份供试液含量的相对标准差应不大于2.0%。
2）中间精密度
配制6份相同浓度的供试品溶液，分别由两个分析人员使用不同的仪器与试剂进行测试，所得12个含量数据的相对标准差应不大于2.0%。
4．专属性
可接受的标准为：空白对照应无干扰，主成分与各有关物质应能完全分离，分离度不得小于2.0。以二极管阵列检测器进行纯度分析时，主峰的纯度因子应大于980。
5．检测限
主峰与噪音峰信号的强度比应不得小于3。
6．定量限
主峰与噪音峰信号的强度比应不得小于10。另外，配制6份最低定量限浓度的溶液，所测6份溶液主峰的保留时间的相对标准差应不大于2.0%。
7．耐用性
分别考察流动相比例变化±5％、流动相pH值变化±0.2、柱温变化±5℃、流速相对值变化±20％时，仪器色谱行为的变化，每个条件下各测试两次。可接受的标准为：主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰与杂质峰必须达到基线分离；各条件下的含量数据（n=6）的相对标准差应不大于2.0%。
8、系统适应性
配制6份相同浓度的供试品溶液进行分析，主峰峰面积的相对标准差应不大于2.0%，主峰保留时间的相对标准差应不大于1.0%。另外，主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰与杂质峰必须达到基线分离，主峰的理论塔板数应符合质量标准的规定。
就是为了纯净和含量稳定。
使用高效液相色谱法用检查仪器的精密度,稳定性,
在色谱柱为洁净的状态下，而且配合以90%的甲醇溶液做为流动相在泵的作用下导入高效液相色谱仪中，连续运行十分钟后带色谱基线稳定后，读取基线的电压值，通过计算基线电压值的相对标准偏差进行对液相色谱仪的稳定性进行考核，在稳定十分钟后在流动相中加入一定量的乙氰溶液，观察色谱图形和峰值电压信号的...
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一、在高效液相色谱法系统适用性试验中，有常用的四个内容：分离度、柱效、重复性和拖尾因子。1、分离度（resolution，R）——相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率，表示相邻两峰的分离程度。R≥1.5称为完全分离。2、柱效：色谱柱是色谱仪最重要的部件（心脏）。柱子内径一般为1～6...
苯并(a)芘的高效液相色谱法测定
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高效液相色谱法可以对环境中哪些污染物进行分析检测
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如何监测反应的进行程度(薄层色谱,高效液相色谱)
Rf 值测定：利用Rf值（移动距离与溶剂前行距离之比）来衡量斑点的移动程度。反应物和产物的Rf值可能不同，可以通过这种方式推测反应进度。高效液相色谱监测反应进程：取样和进样：从反应混合物中取样，使用自动进样器或手动注射器将样品注入到高效液相色谱仪中。分离和检测：样品混合物通过色谱柱，在不同...
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在高效液相色谱中色谱柱的长度是10-50厘米。高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般...
高效液相色谱原理
高效液相色谱（HPLC）的原理：以高压下的液体为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱对样品的适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中，可用气相色谱分析的约占20%，而80%则需用高效液相色谱来分析。高效液相...
在高效液相色谱中,提高柱效的途径有哪些
高效液相色谱（HPLC）是目前常用的一种分离和分析技术，其分离效果和分离速度主要依赖于色谱柱。提高色谱柱的效率是HPLC分离的关键，以下是提高柱效的几种途径。选择合适的柱填料 色谱柱的填料是影响分离效果的重要因素之一，选择合适的柱填料可以提高柱效。一般来说，小粒径的柱填料比大粒径的柱填料更容易...
如何分析高效液相色谱图
基线漂移可能是由于温度变化、流动相组成变化等原因引起的，而噪音则可能是由于检测器的不稳定或电磁干扰引起的。杂峰可能来自样品中的杂质或色谱柱上的残留物。在分析HPLC图时，需要仔细识别这些干扰因素，并采取相应的措施进行排除。通过以上步骤，我们可以对高效液相色谱图进行全面的分析，从而获取关于样品...
屠颖头孢： 就是为了纯净和含量稳定.
长葛市13843735105： 高效液相色谱法在中药分析中的应用 - ？
屠颖头孢： 主要是两方面:定性分析和定量分析,其中定量分析是最为主要的.因药物分析主要是药物含量及杂质的分析,均属于微量分析,只有借助高效液相等微量分析仪器才能够很好完成.
长葛市13843735105： 高效液相色谱法测定中药材应注意哪些问题 - ？
屠颖头孢： 1. 中药材的成分比较复杂,首先是提取,采用适合的溶剂,超声、回流等,使目标物有较高的回收率;其次是要将与目标物极性差异较大的杂质除掉,可以用萃取、过柱、固相萃取等;然后浓缩或稀释到适合的浓度,经过滤或离心除去机械杂质.2. 制剂一般已经经过了提取,杂质要少一些,但可能增加了辅料,所以还要考虑除去辅料的干扰.
长葛市13843735105： 高效液相色谱法测定中药含量采用的方法有哪些 - ？
屠颖头孢： 采用反向高效液相色谱250 nm 紫外检测使用梯度洗脱,6 种原单糖12苯基232甲基252吡唑啉酮衍实现良离并具良峰形单糖组定量测定进行考察,建立单糖组析数据析,并用所建立糖单糖组进行析,获良重复性
长葛市13843735105： 高效液相色谱法应用于中药定量分析常用的定量方法有哪些 - ？
屠颖头孢： 外标 内标 标准曲线法
长葛市13843735105： 怎样用高效液相色谱法测黄芩中黄芩甙的含量? - ？
屠颖头孢： 含量测定: 照高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定.色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水-磷酸(47:53:0.2)为流动相;检测波长为280nm.理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500.对照品溶液的制备 精密称...
长葛市13843735105： 中药高效液相含量测定设定多长时间才无杂质 - ？
屠颖头孢： 没有峰面积是不可能计算出含量的.你现在就是要弄清楚为什么这个色谱峰没有积分.两个原因,一个是忘了积分了,那就手动积分,然后用峰面积去计算.一个是这个峰太小了,在限度范围外.比如杂质,限度是0.05%,那么低于这个限度的就不用积分了.到时候就说:这个杂质未检出.
长葛市13843735105： 在用高效液相色谱柱测定供试品溶液时,为什么要取续滤液 - ？
屠颖头孢： 不需要保持一致,对照平是用来定峰的,如果你要计算就必须一致,不一致不会造成拖尾,可能与色谱柱有关
长葛市13843735105： 连翘的性状是什么样子? - ？
屠颖头孢： 你已经把性状写得很详细了,还要什么啊 本品为木犀科植物连翘Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl的干燥果实.秋季果实初熟尚带绿色时采收,除去杂质,蒸熟,晒干,习称“青翘”;果实熟透时采收,晒干,除去杂质,习称“老翘”...
长葛市13843735105： 如果用高效液相色谱分离一种中药醇提总提物的不同化合物 - ？
屠颖头孢： 一般色谱柱是根据化合物极性进行色谱分离的,如在反性柱中,理论上糖苷极性大先出峰,甾体的极性较小,出峰在整个色谱图的后端.但是也有交叉,所以不能完全区分那一部分是哪类成分,只能在检测器允许条件下,大致分离出各个成分.这种体现全部成分特征的图谱也叫高效液相指纹图谱.
