CHO细胞的特性
功效有没有区别不知道。但是,二者的稳定性是有差别的。
CHO生产的应该是有翻译后修饰的,例如糖基化,而大肠杆菌生产的是翻译后修饰,也就是没有糖基化的,根据文献记载,二者的稳定性不同。CHO来源的能够容忍更大范围的温度变化和pH值变化。
CHO细胞表达体系及其特点
诞生于70年代末的基因工程药物因其具有其他药物无法比拟的优点,已迅速成为制药工业中一个引人瞩目的领域。1995年美国基因工程药物销售额约为48亿美元,1997年超过60亿美元,年增长率达20%以上。各国政府将其视为新的经济增长热点而给予了大力支持。
基因工程药物研究与开发的主要环节包括:①基因的克隆和基因工程菌的构造;②重组细胞的培养;③目的产物的分离纯化等。
针对这些主要环节,研究人员正致力于高效表达、培养工艺及下游分离纯化等方面的研究。随着基因工程技术的不断发展,目前已有多种表达系统可用于生产具有医疗价值的人或动物来源的蛋白质(表1)。大肠杆菌(E.coli)是使用最早的表达系统,其显著优点是易于操作,产量高,成本低,但由于用E.coli生产的蛋白质药物因缺乏糖基化而在人体内易被降解,因此它的药放大大降低。此外,它还存在易产生内毒素和包涵体的问题。真核细胞中CHO细胞是目前重组糖基蛋白生产的首选体系;因为与其他表达系统相比,它具有许多优点:
①具有准确的转录后修饰功能,表达的糖基化药物蛋白在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然蛋白分子;
②具有产物胞外分越功能,便于下游产物分离纯化;
③具有重组基因的高效扩增和表达能力;
④具有贴壁生长特性,且有较高的耐受剪切力和渗透压能力,可以进行悬浮培养,表达水平较高;
⑤CHO细胞属于成纤维细胞(fibroblast),很少分泌自身的内源蛋白,利于外源蛋白的启分离。
但CHO细胞培养成本高,条件难掌握,易污染,在一定程度上影响了它的广泛应用。 目前已有越来越多的药用蛋白在CHO细胞中获得了高效表达(表2),其中部分药物已投放市场,倒如EPO、GCSF等。
CHO细胞属于成纤维细胞,既可以贴壁生长。也可以悬浮生长。目前常用的CHO细胞包括原始CHO和二氢叶酸还原酶双倍体基因缺失型(DHFR-)突变株CHO。近年来,为降低生产成本和减少血制品带来的潜在危害性,动物细胞生产开始使用无血清培养基(SFM),但SFM往往导致细胞活力差,贴壁性差,分泌外源蛋白的能力差等缺点。另有研究者尝 试将类胰岛素生长因子IGF基因和转铁蛋白基因转入CHO细胞获得能自身分泌必需蛋白的“超级CHO”,无需在培养基中转铁蛋白和胰岛素,细胞可在SFM中生长良好。与其他表达系统相比,CHO表达系统具有以下的优点:
(1)具有准确的转录后修饰功能,表达的蛋白在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然蛋白分子;
(2)既可贴壁生长,又可以悬浮培养,且有较高的耐受剪切力和渗透压能力;
(3)具有重组基因的高效扩增和表达能力,外源蛋白的整合稳定;
(4)具有产物胞外分泌功能,并且很少分泌自身的内源蛋白,便于下游产物分离纯化;
(5)能以悬浮培养方式或在无血清培养基中达到高密度培养。且培养体积能达到1000L以上,可以大规模生产。
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http://www.genecool.com/bbs/viewthread.php?tid=8293&page=1#pid32161
CHO细胞虽可像微生物细胞一样,在人工控制条件的生物反应器中进行大规模培养,但其细胞结构和培养特性与微生物细胞相比,有显著差别: 动物细胞比微生物细胞大得多,无细胞壁,机械强度低,对剪切力敏感,适应环境能力差;倍增时间长,生长缓慢,易受微生物污染,培养时须用抗生素;培养过程需氧量少(氧传质系数kLa 大于10 h-1即可满足每毫升107 个细胞的生长);培养过程中细胞相互粘连以集群形式存在;原代培养细胞一般繁殖50 代即退化死亡;代谢产物具有生物活性,生产成本高,但附加值也高。
(Chinese Hamster Ovary,CHO) 中国仓鼠卵巢细胞
1957年美国科罗拉多大学Dr. Theodore T. Puck从一成年雌性仓鼠卵巢分离获得,为上皮贴壁型细胞,是生物工程上广泛使用的细胞系。
该细胞具有不死性,可以传代百代以上,是生物工程上广泛使用的细胞。另外CH0细胞在基因工程使用中还有一个优点,该细胞属于成纤维细胞(fibroblast),是一种非分泌型细胞,它本身很少分泌CHO内源蛋白,因此对目标蛋白分离纯化工作十分有利。可形成有活性的二聚体(如白介素2),具有糖基化的功能(如EPO),CHO为表达复杂生物大分子的理想宿主。
由于该细胞存在遗传缺陷,无脯氨酸合成基因,不能将谷氨酸转变为谷氨酸--半醛,培养过程中需在培养基中添加L-脯氨酸才能生长。并且由于该细胞已经霍乱毒素适应,形态学有所改变。最初细胞为贴壁型细胞,经多次传代筛选后,也可悬浮生长。
工业生产上应用较多的是CHO-K1细胞,为转化细胞系,细胞染色体分布频率是2n=22,系亚二倍体细胞。ATCC保存CHO-K1细胞株,编号为CCL-61,被广泛地用于重组DNA蛋白的表达。
CHO细胞简介: 1957年美国科罗拉多大学Dr. Theodore T. Puck从一成年雌性仓鼠卵巢分离获得,为上皮贴壁型细胞,是目前生物工程上广泛使用的细胞系。
该细胞具有不死性,可以传代百代以上,是目前生物工程上广泛使用的细胞。另外CH0细胞在基因工程使用中还有一个优点,该细胞属于成纤维细胞(fibroblast),是一种非分泌型细胞,它本身很少分泌CHO内源蛋白,因此对目标蛋白分离纯化工作十分有利。可形成有活性的二聚体(如白介素2),具有糖基化的功能(如EPO),CHO为表达复杂生物大分子的理想宿主。
由于该细胞存在遗传缺陷,无脯氨酸合成基因,不能将谷氨酸转变为谷氨酸--半醛,培养过程中需在培养基中添加L-脯氨酸才能生长。并且由于该细胞已经霍乱毒素适应,形态学有所改变。最初细胞为贴壁型细胞,经多次传代筛选后,也可悬浮生长。
工业生产上应用较多的是CHO-K1细胞,为转化细胞系,细胞染色体分布频率是2n=22,系亚二倍体细胞。ATCC保存CHO-K1细胞株,编号为CCL-61,被广泛地用于重组DNA蛋白的表达
异位骨化是什么
1.1病理HO早期局部肌肉坏死、大量炎症细胞浸润,伴大量纤维母细胞增生,少量纤维组织形成。成熟HO与周围软组织分界清,切面呈白色光泽,出现典型的分层现象:内层的核心是能被X线穿透的软组织,包含大量增生未分化的间质细胞,这些梭型细胞染色质丰富,细胞核呈多形性,有时可见到有丝分裂像,但细胞形态正常;中层有大量骨样组...
ho是什么意思
HO是血红蛋白氧合酶的缩写,是一种在人体红细胞中催化氧与血红蛋白结合的酶。它在人体的氧气运输过程中起着关键作用。此外,HO也与一些医学术语相关,如HO抑制剂等,这些术语在特定的医疗环境中使用。三、其他领域的含义 ho在不同领域有不同的含义。例如,在建筑领域,它可能代表一种高度的缩写;在物...
红细胞(RBC) 5.72和红细胞压积(HCT)51.3偏高,请问是有影响么?会不会...
回答:病情分析: 成人体内大约有2~3×10的13次方个红细胞(女性大约为4~5百万\/微升血液,男性为5~6百万\/微升血液)。ho红细胞压积正常值:男:0.40-0.50L\/L (40%一50%)。女:0.37-0.45L\/L (37%--45%)。女性比男性少的原因,是因为生理出血造成的现象。另外睾丸酮也具有刺激红细胞生成激素制造红...
PEG是什么?生物的.
聚乙二醇。高中中主要用于诱导细胞融合。它能改变各类细胞的生物膜结构,使细胞发生融合,从而形成杂种细胞,培养该杂种细胞可以获得一些特殊的杂种植株。
“HEK”代表什么意思?
此外,科学家还研究了汉坦病毒在人胚肾和肺细胞中的增殖特性,以及镉对人胚肾细胞中HO-1表达的影响,表明镉可能引发细胞凋亡。HEK作为缩写词,虽然源于英文,但其在科学界的广泛应用使得它成为理解人类胚胎肾脏相关研究的重要工具。总的来说,HEK不仅仅是一个缩写,它代表了一种重要的研究工具,对于理解...
什么是pqq?
PQQ是吡咯喹啉醌,是一种类维生素物质。1、PQQ的作用:PQQ广泛存在于各种水果、蔬菜、谷物和饮品中,特别是在纳豆和太岁肉灵芝中含量较高。PQQ具有很强的清除过氧化物的能力,可以有效地清除“HO·”和“O2·–”,体现在保护线粒体免受氧化损伤、保护细胞免受氧化应激等方面。此外,PQQ也被认为是一种...
吃什么有利于伤口愈合不留疤
收缩期:伤口细胞成熟,伤口开始收缩,相互靠拢而慢慢地愈合,并形成瘢痕。所以身体受伤后很快愈合,这是身体对自己的一种保护机制。 bn sw ho细胞源营养含人体所需21项必须营养元素。补充术后伤口愈合期所需特殊营养素和微量元素,以满足营养需求并为伤口愈合和组织修复提供必要的构建块。为新组织的生成和沉积提供能量。
请问用ho\/PI双染检测贴壁细胞,直接在孔版中加染色液,请问加染色液之前是...
博凌科为解答::需要吸出培养液。用PBS洗2次后再加入染料。Ho染色30-45min,PI染色5-10min左右。PBS洗后可以上机观察
HO是什么物质?其相关性质
元素名称:钬 Ho元素原子量:164.9元素类型:金属体积弹性模量:GPa40.2原子化焓:kJ \/mol @25℃301热容:J \/(mol· K)27.15导电性:10^6\/(cm ·Ω )0.0124导热系数:W\/(m·K)16.2熔化热:(千焦\/摩尔) 12.20汽化热:(千焦\/摩尔) 241.0原子体积:(立方厘米\/摩尔) 18.7 三价...
什么是ho2?
HO2是指过氧化氢。过氧化氢是一种无机化合物,其化学式为HO2。它也是一种重要的氧化物,是氧元素的二聚形态。在化学性质上,过氧化氢具有极强的氧化能力,可以与许多化学物质发生反应。由于其不稳定性,它在常温下会缓慢分解,释放出氧气和水蒸气。下面详细解释HO2的相关知识。过氧化氢在自然界中...
尘钟生化: 这里的CHO细胞是指DHFR缺陷型的细胞,不含二氢叶酸还原酶基因,不能合成核酸,必须在含有HT的培养基里生长. 当转染的目的基因连有dhfr基因时,阳性细胞也就获得了dhfr基因.MTX是二氢叶酸还原酶的抑制剂,可阻碍其作用.当细胞培养基内含有MTX时,二氢叶酸还原酶被抑制,通过反馈调节.使得该基因自我扩增,连带其上下又100-1000kb的基因都会扩增.如此目的基因也得到扩增,即可提高目的蛋白的表达量.
西峡县14773943246: 什么cho成语 - ?
尘钟生化: (Chinese Hamster Ovary,CHO) 中国仓鼠卵巢细胞的缩写. CHO细胞虽可像微生物细胞一样,在人工控制条件的生物反应器中进行大规模培养,但其细胞结构和培养特性与微生物细胞相比,有显著差别: 动物细胞比微生物细胞大得多,无细胞壁
西峡县14773943246: - CHO的性质?
尘钟生化: CHO细胞表达体系及其特点 诞生于70年代末的基因工程药物因其具有其他药物无法比拟的优点,已迅速成为制药工业中一个引人瞩目的领域.1995年美国基因工程药物销售额约为48亿美元,1997年超过60亿美元,年增长率达20%以上.各国...
西峡县14773943246: cho是什么意思啊 ??
尘钟生化: 首席忽悠官
西峡县14773943246: 细胞系细胞的根本特点是染色体明显改变和_____ -- ?
尘钟生化:[答案] 细胞系细胞的根本特点是染色体明显改变和(接触抑制丧失,容易传代培养). 如Hela细胞系、BHK21细胞系、CHO细胞系等
西峡县14773943246: CHO细胞和HEK293细胞哪个用来转染好?谢谢啦!! - ?
尘钟生化: HEK293是很好转的细胞了,你可以用RFect的试剂盒,效果挺好的.
西峡县14773943246: CHO细胞是什么细胞?全称是什么? - ?
尘钟生化: 注射用重组人促红素(CHO细胞)【药品名称】注射用重组人促红素(CHO细胞)【规格】3000IU/瓶【适应症】肾功能不全所致贫血,包括慢性肾功能衰竭进行血液透析、腹膜透析治疗和非透析病人.【用法用量】本品应在医师指导下使...
西峡县14773943246: 长期接触cho细胞有害吗? - ?
尘钟生化: CHO细胞就是中国仓鼠卵巢细胞,其来源于中国仓鼠卵巢的建株纤维母细胞,是哺乳动物表达系统常用的宿主细胞.只是培养细胞的话不会有任何问题,这和培养细菌什么的不一样.就算你将CHO细胞吃下去都不会有什么大问题,你需要担心的是怎么样防止污染.