植物组织培养中 灭菌的方法主要有哪些

植物组织培养中灭菌的方法主要有哪些~

1.湿热灭菌法
通过加压提高蒸汽温度,用高压蒸汽灭菌,穿透力强,温度高,灭菌效果最好.
注意事项：1.完全排除高压灭菌器内的冷空气.有冷空气存在时,在同一表压下所达到的温度值要低,而冷空气排出越少,温度就低得越多.在高压蒸汽灭菌时,为保证达到规定的温度,必须将冷空气完全排除.否则,虽然压力达到,而温度达不到规定的要求,灭菌就不彻底.
2.紫外线 杀菌谱广,但穿透力弱,影响因素多,杀菌效能受到一定限制.
紫外线消毒效果与紫外线强度、照射时间、温度与湿度等因素有关.
我国规定紫外灯照射强度距离1m处不低于70μw/cm2.一般紫外灯使用超过100h,则应更换.表面有尘土,降低灭菌效果.紫外灯杀菌的温度以20~40℃,相对湿度40%~60%为宜.
3干热灭菌法.灼烧与火焰灭菌：灼烧主要是用于工具灭菌,在火焰上灼烧即可达到彻底灭菌,火焰灭菌通常用于无菌操作中,将试管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反复通过火焰数次,利用火焰对管口等进行灭菌,阻止管口污染,作为无菌操作过程中的辅助灭菌手段.
4干烤灭菌：利用热辐射及干热空气进行灭菌.一般将待检灭菌的物品如金属、玻璃、陶瓷制品包装后,均可在烤箱内干热灭菌.通常加热至160℃,保温2h可完全灭菌.但不宜超过170℃,玻璃量具易变形.降温过速,骤冷易引起玻璃器皿炸裂.干热灭菌时装入干烤箱内的物品切勿紧密,应有空隙,利于热空气流动,过密,致使温度不均,部分物品灭菌不彻底

对人的手臂消毒：70%的酒精
对培养皿消毒：高温高压蒸汽灭菌
对外植体消毒：9%~10%的次氯酸钙溶液处理5~30分钟
对空气消毒：打开的超净工作台上接种或在酒精灯火焰附近接种

1.湿热灭菌法
通过加压提高蒸汽温度，用高压蒸汽灭菌，穿透力强，温度高，灭菌效果最好。
注意事项：1.完全排除高压灭菌器内的冷空气。有冷空气存在时，在同一表压下所达到的温度值要低，而冷空气排出越少，温度就低得越多。在高压蒸汽灭菌时，为保证达到规定的温度，必须将冷空气完全排除。否则，虽然压力达到，而温度达不到规定的要求，灭菌就不彻底。
2.紫外线 杀菌谱广，但穿透力弱，影响因素多，杀菌效能受到一定限制。
紫外线消毒效果与紫外线强度、照射时间、温度与湿度等因素有关。
我国规定紫外灯照射强度距离1m处不低于70μw/cm2。一般紫外灯使用超过100h，则应更换。表面有尘土，降低灭菌效果。紫外灯杀菌的温度以20~40℃，相对湿度40%~60%为宜。

3干热灭菌法。灼烧与火焰灭菌：灼烧主要是用于工具灭菌，在火焰上灼烧即可达到彻底灭菌，火焰灭菌通常用于无菌操作中，将试管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反复通过火焰数次，利用火焰对管口等进行灭菌，阻止管口污染，作为无菌操作过程中的辅助灭菌手段。
4干烤灭菌：利用热辐射及干热空气进行灭菌。一般将待检灭菌的物品如金属、玻璃、陶瓷制品包装后，均可在烤箱内干热灭菌。通常加热至160℃，保温2h可完全灭菌。但不宜超过170℃，玻璃量具易变形。降温过速，骤冷易引起玻璃器皿炸裂。干热灭菌时装入干烤箱内的物品切勿紧密，应有空隙，利于热空气流动，过密，致使温度不均，部分物品灭菌不彻底

常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类，即：物理方法如干热（烘烧和灼烧）、湿热（常压或高压蒸煮）、射线处理（紫外线、超声波、微波）、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施；化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选用。

实验中所用到的玻璃仪器用干热灭菌（165℃干热2小时）；常用的镊子、接种铲等可以用75%乙醇清洗后在火焰上灼烧灭菌；植物组织表面用70%或75%乙醇、次氯酸钠依次灭菌；其它接触到的都可以用紫外和75%乙醇来灭菌。希望能帮到你。

对培养基：高压蒸汽灭菌法；对外植体：70%酒精或 次氯酸钠溶液

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龙沙区15859315741： 植物组织培养中 灭菌的方法主要有哪些 - ？
宁齿小儿： 1.湿热灭菌法 通过加压提高蒸汽温度,用高压蒸汽灭菌,穿透力强,温度高,灭菌效果最好. 注意事项:1.完全排除高压灭菌器内的冷空气.有冷空气存在时,在同一表压下所达到的温度值要低,而冷空气排出越少,温度就低得越多.在高压蒸...

龙沙区15859315741： 植物组织培养中的杀菌方法有哪些?如何做到各个环节上的无菌? - ？
宁齿小儿：[答案] 对人的手臂消毒:70%的酒精 对培养皿消毒:高温高压蒸汽灭菌 对外植体消毒:9%~10%的次氯酸钙溶液处理5~30分钟 对空气消毒:打开的超净工作台上接种或在酒精灯火焰附近接种

龙沙区15859315741： 花卉组织培养灭菌方法有哪些 - ？
宁齿小儿： 培养室、无菌室、接种箱等主要用紫外线或薰蒸灭菌.紫外线灯只需开灯20分钟即可达到灭菌效果;薰蒸常将甲醛和高锰酸钾混合,产生大量蒸气灭菌.器具灭菌可用灭菌锅高温高压灭菌或烘箱高温灭菌,也可以用化学药剂,如70%—75%.酒精、5%—10%漂白粉等.对于液体与流动的空气一般用过滤方法除菌,亦即用孔径小于0.45um的微孔滤器装置,如培养液、酶液等就用此除菌.培养基灭菌一般用高压锅,原材料消毒则多用化学药剂.洗涤器皿可以用碱性洗涤剂,如肥皂、洗衣粉等,洗刷干净后倒置晾干即可;如果器皿较脏,可先配制洗液(一般用重铬酸钾50g加水1000ml,待冷却后缓缓加入工业硫酸90ml),用来浸泡酸洗.

龙沙区15859315741： 1组织培养常用的灭菌方法各有哪些优缺点 - ？
宁齿小儿： 1、比如能发生质壁分离及复原 2、培养基用湿热灭菌,原理是在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加.在0.1mpa的压力下,锅内温度达121℃.在此蒸汽温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢. 采用干热灭菌,由于在干热条件下,细菌的营养细胞的抗热性大为提高,接近芽孢的抗热水平,通常采用170℃持续90分钟来灭菌. 不耐热的物质采用过滤灭菌,一些化学成分在高温高压下回发生降解而失去效能或降低效能. 植物材料表面用消毒剂灭菌

龙沙区15859315741： 植物组织培养无菌操作技术包括哪些? - ？
宁齿小儿： 1外植体消毒 2培养基高压灭菌 3无菌接种技术 4培养室环境消毒技术

龙沙区15859315741： 植物组织培养过程中具体消毒操作过程和技术? ？
宁齿小儿： 组培过程消毒一般就分材料去清洗、酒精处理、升汞处理(或是次氯酸钠处理)主要看你的材料,材料很嫩很嫩的,且木质化程度低的话一般酒精处理阶段会省去.清洗一般就洗洁精洗净表层灰尘,清水冲洗个把小时之后就是在操作台上操作了,酒精处理阶段看材料木质化程度确定时间,一般就10-60S,处理好后及时用无菌水清洗,3-5次,升汞处理的话一般是6-15m,也是看材料啦,比较干净的材料相对时间短一点,期间要一直震荡,处理好后无菌水清洗5-6次,OK了!酒精浓度75%,升汞0.1%,次氯酸钠一般5%和10%都可以.

龙沙区15859315741： 植物组织培养常用哪些消毒剂? - ？
宁齿小儿： 植物组织培养第一步是外植体消毒灭菌诱导愈伤组织,用的消毒剂有酒精,次氯酸钠,升汞等,如果在培养过程中发现细菌,可加入一定量的医用青霉素或链霉素,抑制细菌繁殖基数,使植物体得到正常生长.

龙沙区15859315741： 我是高中生要进行研究性学习.课题为“植物组织培养”该如何研究,先谢谢各位好心人啊 - ？
宁齿小儿： 1 植物组织培养的基本概念、原理和试验步骤1.1概念植物组织培养是在无菌条件下,将离体的植物器官(根尖、茎尖等)、组织(形成层、花药组织等)、细胞(体细胞、生殖细胞等)、胚胎(成熟或未成熟的胚)、原生质体等在人工配制的...