高效液相色谱仪原理及操作步骤

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~ 1. 高效液相色谱仪原理
高效液相色谱法(HPLC)是一种广泛应用于分离、分析和纯化有机化合物(包括能通过化学反应转变为有机化合物的无机物)的有效方法。在已知的有机化合物中,约有80%能用高效液相色谱法分离、分析。由于此法条件温和,不破坏样品,因此特别适合高沸点、难气化挥发、热稳定性差的有机化合物和生命物质。HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部位。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、与柱或保护柱、柱温控制器等,现代HPLC仪还有微机控制系统,进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还备有自动馏分收集装置。目前常见的HPLC仪生产厂家国外有Waters公司、Agilent公司(原HP公司)、岛津公司等,国内有上海伍丰科学仪器有限公司,上海禾工科学仪器有限公司,大连依利特公司、北京创新通恒、北京温分等。
2. 高效液相色谱仪操作步骤
高效液相色谱仪的操作步骤主要包括以下几个方面:
(1)准备样品:将需要分析的样品进行适当的预处理,如提取、纯化等,以满足分析要求。
(2)配置流动相:根据样品性质和分析需求,选择合适的流动相,并配置成所需的浓度。
(3)安装色谱柱:将色谱柱安装在仪器系统中,并确保其与进样器、检测器等部件连接紧密。
(4)进样:将准备好的样品通过进样器送入色谱柱,进行分离分析。
(5)检测与记录:通过检测器对色谱柱流出物进行检测,将检测信号转换为电信号,并记录在数据记录仪上。
(6)数据处理:对记录的数据进行处理和分析,得到所需的分离结果。
(7)清洗与维护:分析结束后,对仪器进行清洗和维护,以保证其正常运行。
3. 高效液相色谱仪的优点
高效液相色谱仪具有以下优点:
(1)高效:由于采用高压输送流动相,使样品在色谱柱中的移动速度增加,提高了分离效率。
(2)快速:分析时间较经典液相色谱法大大缩短,一般少于1小时。
(3)高灵敏度:采用高灵敏度的检测器,提高了检测限,可检测到微量的样品成分。
(4)高分辨率:通过选择合适的固定相和流动相,可实现高分辨率的分离。
(5)宽适用范围:适用于分析高沸点、难挥发、热稳定性差的有机化合物,以及离子型化合物和高聚物等。
(6)重复性好:高效液相色谱仪具有较好的重复性,有利于进行定量分析。
(7)易回收:样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或进行制备。
综上所述,高效液相色谱仪具有高效、快速、高灵敏度、高分辨率、宽适用范围、重复性好和易回收等优点,已成为现代分析技术的主要手段之一。


高效液相色谱仪是用来检测分析什么的呀?
在众多领域,包括生物化学、食品分析、医药研究、环境分析以及无机分析等,HPLC技术的应用已经变得非常普遍。此外,将高效液相色谱与结构分析仪器相结合,已成为一个重要的发展趋势。例如,液相色谱与质谱的联用技术得到了广泛的应用,特别是在分析氨基甲酸酯农药和多核芳烃等方面。同时,液相色谱与红外光谱的...

高效液相色谱法测定苯甲酸
以毛细管为分离通道,以高压支流电场为驱动力,通常使用内径为25,000~100,000nm弹性涂层熔融石英管。该毛细管特点是容积小、侧截比大,可用自由溶液或凝胶等为支持介质,在溶液介质下能产生平面状电流场。该法具有高效、快速、样品量少、测定成本低等优点。高效液相色谱仪原理:在条件(流动相、固定相...

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高效液相色谱仪的基本工作原理 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过...

高效液相色谱分离效果好的一个主要原因是
吸附剂的颗粒小。高效液相色谱分离效果好的一个主要原因是吸附剂的颗粒小。因为高效液相色谱仪的分析原理主要是基于色谱分离的原理。它利用固定相和流动相之间的物理化学性质差异,使不同物质在两相之间进行相对运动,从而实现各组分的分离。吸附剂的颗粒小可以增大比表面积,增加接触几率,使空间填充率更高...

高效液相色谱的使用等各种仪器的使用
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高效液相质谱联用仪的工作原理,可以告诉我吗?
固定相)内。由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式输出检测结果。

高效液相色谱仪的价格大概是多少?
截止至2020年2月,为5——20万元。高效液相色谱仪为应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相被流动相载...

气相色谱仪和液相色谱仪区别
气相色谱仪和液相色谱仪的主要区别在于它们的应用场景,以及分离物质的原理不同,气相色谱仪是通过将样品放入离子化坩埚中,将混合物离子化为带有正负电荷的离子,然后将其运行在电场中,由于不同离子散射率的不同,混合物分离出来。 气相色谱仪和液相色谱仪区别 一、概念不同 1.气相色谱仪: 气相色谱是一种物理的分离方...

高效液相色谱仪的工作原理图是怎样的
1,输送系统:就是指输液泵。2,分离系统:就是指色谱柱。3,检测系统:就是指紫外检测器等。4,工作站 样品进入进样阀混匀后进入输液泵,然后流出来再进入色谱柱进行分离,最好进入检测器进行检测,检测后的得到的数字信号会传递到工作站上,也就是你的电脑上面。

气相色谱仪和液相色谱仪的功能主要有什么区别?
一、分析对象差别:1、气相色谱仪的分析对象:(1)能气化、热稳定性好和沸点较低的样品。(2)高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及高聚物样品不能检测。(3)仅占有机物的15%~20%左右。2、高效液相色谱仪的分析对象:(1)溶解后能制成溶液的样品。(2)不受样品挥发性和热稳定性的限制。(3)...

凭祥市19518874230: 高效液相色谱仪(临床检验器械) - 搜狗百科
蓝珊尤尼: 一.开机程序1.打开氮气总阀,拧紧分压阀.2.打开稳压电源和色谱仪开关.3.启动计算机,运行软件,调用预先编辑好的控制方法,下载到色谱仪.4.待柱箱温度达到控制方法设定的初始值后,测量柱流量:在皂膜流量计里加入几滴检漏液...

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凭祥市19518874230: 如何操作高效液相色谱仪 -
蓝珊尤尼: 这个没办法具体回答.因为不同的仪器品牌,不同的工作站操作方法都是不同的.简单地说,液相分为几个部件,这张图是安捷伦的液相,从上到下的顺序就是:流动相→泵→进样系统→色谱柱→检测器→废液1.操作的时候,就是把仪器打开,电脑打开,并且在电脑上打开工作站.工作站就相当于一个软件,它会自动和仪器连接.2.然后在工作站里面设置程序,比如,流动相比例啊,流速啊,检测波长了.然后运行仪器.3.仪器稳定之后,配样,同样设置程序,进样量,进样瓶等等,然后进样分析.4.这个时候仪器会采集信号,自动出图.5.结束之后就可以停止仪器,然后关机了.

凭祥市19518874230: 高效液相色谱仪器原理是什么? -
蓝珊尤尼: 高效液相色谱仪主要的组成部件为高压输液泵、进样装置、色谱柱、检测器和色谱数据处理装置.1.高压输液泵由于高效液相色谱所使用的色谱柱一般装填小于10μm的固定相颗粒,故对流动相有较大的阻力,所以对于泵的耐压有一定的要求....

凭祥市19518874230: 高效液相色谱仪的使用和原理分析 -
蓝珊尤尼:[答案] 高效液相色谱法(HPLC)是目前应用广泛的分离、分析、纯化有机化合物(包括能通过化学反应转变为有机化合物的无机... 在已知的有机化合物中,约有80%能用高效液相色谱法分离、分析,而且由于此法条件温和,...

凭祥市19518874230: 高效液相色谱仪如何操作 -
蓝珊尤尼:[答案] 准备好流动相(比如甲醇和水),开机(开泵,检测器,有柱温箱和自动进样器的也一同打开),开工作站,设定流动相比例和流量,设定检测波长,然后启动泵,等基线平稳后即可进样了. 老弟你好相一点不懂呀,最好找一个明白人现场给你操作...

凭祥市19518874230: 高效液相色谱仪如何操作 -
蓝珊尤尼: 准备好流动相(比如甲醇和水),开机(开泵,检测器,有柱温箱和自动进样器的也一同打开),开工作站,设定流动相比例和流量,设定检测波长,然后启动泵,等基线平稳后即可进样了.老弟你好相一点不懂呀,最好找一个明白人现场给你操作一次,和你讲一讲,免得把仪器弄坏.我是济南的.

凭祥市19518874230: 什么是高效液相色谱及其操作方法?
蓝珊尤尼: 高效液相色谱(high performance liquid chromatography, HPLC)也叫高压液相色谱(high pressure liquid chromatography)、高速液相色谱(high speed liquid chromatography)、高分离度液相色谱(high resolution liquid chromatography)等....

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