sds聚丙烯酰胺凝胶电泳跑不到胶下部
溴酚蓝指示剂跑进去没有，有没有在合适的位置？
染料配制的有无问题，最好找别的胶试一试。另外脱色液也很重要，加热（55度）脱色。
可以同时上一个预染Marker看一看。
如果配胶和电泳试剂没问题的话，估计是样品处理的问题。
样品是否残留强极性强电离的有机酸或离液剂，比如TCA或盐酸胍，以前遇到过。溴酚蓝跑着跑着就变黄了。
你的问题叙述的不是很明确,蛋白多大,用的什么MARKER,跑胶时间,电压,胶浓度是多少都没有交代,而且也没有胶图,仅提几点建议:
1.看你的问题,应该是胶浓度太低了,所以是高分子量蛋白分出来,低分子量还没来得及分开胶就已经跑到头,跑出去了.去查查多少浓度的胶适合分多少KD的蛋白,把胶的浓度调高点,比如说15%或者12%
2.介于你说你有一次跑出来了?你没有上图,我不能肯定你的试验结果,如果你确定浓度真的没问题,怀疑一下你的试剂是否出问题了.有可能是试剂有问题造成的交联不上,导致胶孔过稀,本质上和浓度太低一个道理.当然也有可能是电泳缓冲液的问题.(另外楼主你不会是漏液所以不往下跑吧~?呵呵)
3.看楼主应该是个新手(随便猜的咯:)),说一些配胶的经验吧.
第一.AP的质量要好,我们对比过一些国产的AP和进口的AP效果,明显进口的好用,胶凝的快,质量也高.
第二,胶凝了后不要急着用,也不要急着放四度,给他充分的时间交联,大约4-6个小时吧.就放室温,不要放37度.
第三,有些新手为了省时间,往往过量的加AP,这样交联效果会下降.
第四,浓缩胶一定要足够,跑出来的条带才好看
第五,液一定要混匀再倒胶
不知道楼主是自配的液体还是买的现成的试剂盒?如果是前者,其实这东西很基础,也不贵,还是买试剂盒的吧,质量有保证的.有一些国内的公司就很不错.
跑胶时曹内有冒泡么？ 溴酚蓝指示剂跑进去没有，有没有在合适的位置？染料配制的有无问题，最好找别的胶试一试。另外脱色液也很重要，加热（55度
调整胶浓度，和跑胶时间
上个图看看！~~大家也好给分析一下
可能是你的胶不均匀，有没有这种可能，你把浓缩胶和分离胶灌反了？
请教各位大虾:PHB(聚羟基丁酸酯)的物理化学性质?
性质：由Alcaligenes eutrophus等微生物产生的一种可生物降解的聚合物。熔点175℃，结晶度70％。硬而脆，具热塑性，生物相容性，生物降解性耐紫外光辐射。可用来制造外科缝合线等能自行降解的材料。http:\/\/www.chemyq.com\/xz\/xz3\/23720jompt.htm ...
核酸具有哪些物理化学特性、光谱学和热力学特性?
①热变性：dsDNA与RNA的热力学表现不同，随着温度的升高RNA中双链部分的碱基堆积会逐渐地减少，其吸光性值也逐渐地，不规则地增大。较短的碱基配对区域具有更高的热力学活性，因而与较长的区域相比变性快。而dsDNA热变性是一个协同过程。分子末端以及内部更为活跃的富含A-T的区域的变性将会使其赴京...
非对称引物的应用?
1.片段大小在80-100bp时,可采用3%NuSieve1%普通琼脂糖或用聚丙烯酰胺胶来分离。 2.从胶上切下含所南非PCR片段的薄片。 3.加入50∽100μlTE浸泡胶片,可反复冻融或放置几个小时使DNA从胶中扩散出来。 4.取少量(1-5%)进行第二次扩增,为得到纯净单一的产物,用于第二次PCR扩增 的凝胶抽提物的量必须少于1ng。
莲藕条斑病毒病病原有怎样的特性?
芋花叶病毒Dasheen.mosaic.virus（DsMV）。分类地位：马铃薯Y病毒属Potyvirus，马铃薯Y病毒科Potyviridae。在国际病毒分类委员会（ICTV）中的编码为00.057.0.01.023。病毒提纯：病组织按1\/2（W\/V）加0.1mol\/L，pH8.2冷TAC缓冲液（由0.1mol\/L.Tris，0.5mol\/L柠檬酸，0.8%聚乙烯吡咯烷酮...
固定化微生物技术应用于饮用水处理有哪些优点
载体包括２大类：无机载体如多孔玻璃、硅藻土、活性炭、石英砂等；有机载体如琼脂、聚乙烯醇凝胶（ＰＶＡ）、角叉莱胶、海藻酸钠、聚丙烯酰胺（ＡＣＡＭ）凝胶等。无机载体常用于吸附法，高质量无机载体的指标之一是有较大的表面积。无机载体常与包埋载体结合，以提高包埋载体的强度，扩大孔径，提高包埋...
PAGE胶是什么
凝胶。溶胶或溶液中的胶体粒子或高分子在一定条件下互相连接，形成空间网状结构，结构空隙中充满了作为分散介质的液体（在干凝胶中也可以是气体，干凝胶也称为气凝胶），这样一种特殊的分散体系称作凝胶。没有流动性。内部常含有大量液体。例如血凝胶、琼脂的含水量都可达99%以上。可分为弹性凝胶和脆性凝胶...
跪求实验方案急。关于植物小分子多肽的提取分离和分析 最好用到高效...
SDS-PAGE在分离、鉴定和纯化蛋白质方面有着广泛应用,其有效分离范围取决于聚丙烯酰胺的浓度和交联度,其孔径随着双丙烯酰胺与丙烯酰胺比率的增加而减小,比率接近于1:20时,孔径达到最小值。分子量低于10kD的小分子肽类,即使用较高浓度的聚丙烯酰胺凝胶的SDS-PAGE也不能完全分离,或是显不出色,或是显带较弱,带型...
急!!有谁知道聚酯的溶解度参数是多少吗?
聚丙烯酰胺（cpolyacrylamids）简称PAM，是一种线型高分子聚合物，是水溶性高分子化合物中应用最为广泛的品种之一，聚丙烯酰胺和它的衍生物可以用作有效的絮凝剂，增稠剂，纸张增强剂，以及液体的减阻剂等，广泛应用于水处理、造纸、石油、煤炭、矿冶、地质、轻纺、建筑等工业部门。|PAM是一种线型高分子...
聚丙烯酰胺水解问题
聚丙烯酰胺（cpolyacrylamids）简称PAM，是一种线型高分子聚合物，是水溶性高分子化合物中应用最为广泛的品种之一，聚丙烯酰胺和它的衍生物可以用作有效的絮凝剂，增稠剂，纸张增强剂，以及液体的减阻剂等，广泛应用于水处理、造纸、石油、煤炭、矿冶、地质、轻纺、建筑等工业部门。|PAM是一种线型高分子...
纵费健胃： 溴酚蓝指示剂跑进去没有,有没有在合适的位置? 染料配制的有无问题,最好找别的胶试一试.另外脱色液也很重要,加热(55度)脱色. 可以同时上一个预染Marker看一看.
鹤壁市13384209021： 聚丙烯酰胺电泳跑DNA,带跑不下去 - ？
纵费健胃： 1. 装板子的时候液体是不是漏了,跑电泳的时候,两块板子内部的液体要高于较低的那块玻璃板,否则电泳就无法形成一个回路,样品就跑不下去了. 2. 跑电泳的时候电压过高或者温度过高,或者胶太稀了,条带就跑得不太稳. 3. 做胶的时候一定要混匀,要凝结充分,水压的时候要轻缓.而且要防止漏胶. 你再认真仔细地做一遍.注意以上的几个点.
鹤壁市13384209021： 聚丙烯酰胺凝胶电泳,但是样品只停留在浓缩胶和分离胶之间???我延长了时间但是没用.分离胶4%浓缩胶7% - ？
纵费健胃： 这种情况一般是分离胶太浓了,或者说蛋白比胶孔大,进不去.你是说分离胶7%,浓缩胶4%吧?已经挺稀了,可能是蛋白沉淀了,凝聚成大块,所以进不去.这一般是样品太浓,变性时易沉淀.可以先稀释样品.也可能是配胶时有错误,比如缓冲液pH不对,储液挥发浓缩等等.如果Marker也进不去,就是胶的问题;如果marker正常,就是样品问题.
鹤壁市13384209021： SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳不出带的原因 - ？
纵费健胃： 如果Marker也没有出带,说明电泳及染色有问题,如电泳缓冲液的配制,胶的制备,染色方法等. 如果Marker出带而目的片段没有,说明没有目的片段,应该是前期实验的原因.或跑出胶外,说明片段太小,或电泳时间太长. ------中国西部生命科学论坛
鹤壁市13384209021： 为甚sds page电泳的条带都跑下面去了,没有跑开呢?(图1)是胶出了什么问题还是加样少了呢? - ？
纵费健胃： 跑的时间太长了,到最后跑到一起了,最好在指示剂到下沿时就停止电泳,或者电压太高,换小点的试试
鹤壁市13384209021： SDS PAGE 电泳为什么会跑歪? - ？
纵费健胃： 你好, 有可能是分离胶没有摇匀,导致密度不均;也有可能是两侧上样量有差别导致压力不对称;或是胶没有配齐...希望能帮到您,望采纳
鹤壁市13384209021： SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳不出带的原因 - ？
纵费健胃：[答案] 如果Marker也没有出带,说明电泳及染色有问题,如电泳缓冲液的配制,胶的制备,染色方法等. 如果Marker出带而目的片段没有,说明没有目的片段,应该是前期实验的原因.或跑出胶外,说明片段太小,或电泳时间太长. ------中国西部生命科学论坛
鹤壁市13384209021： sds - page电泳为什么跑不出蛋白条带?连marker的也没有.请高手指教,详细一点. - ？
纵费健胃： 上样缓冲液混合后进行变性,温度必须要超过95°,时间5—10min,如果没把握,可以处理10min.也有可能是漏胶,制胶时封胶要严,操作不熟练时可以多加一点,待聚合后用去离子水加入电泳槽内,看看是否会漏,如果不会把水倒掉,滤纸吸干后再加入凝胶.加样的问题,加样时注意不要刺破凝胶,以避免样品直接漏出.
鹤壁市13384209021： 双向电泳第二步SDS - PAGE跑胶的问题 - ？
纵费健胃： 1, 提取蛋白的时候要充分超声粉碎,然后高速离心.吸取上清的时候不要触到沉淀.污染不一定是RNA和DNA,还有可能是胶里面有杂质.2. 遇热膨胀过度,你可以在电泳槽里面安放冰槽,电泳液预先降温,同时降低电泳时的电流.还有配琼脂也要用缓冲液,而不是水,不然不导电. 接触不好也会引起条带变形
鹤壁市13384209021： 聚丙烯酰胺凝胶电泳 跑不好,跟胶板有关系吗? - ？
纵费健胃： 您好!聚丙烯酰胺凝胶电泳的分离效率影响因素较多,与胶板的直接关系不大. ① 堆积胶和分离胶的高度,这个基本上都是固定的,堆积胶大概2cm,剩下的都是分离胶. ② 聚丙烯酰胺的交联:保证丙烯酰胺的充分聚合,尤其是AP等不能失效.聚丙烯酰胺是热聚合,稍微注意下天气温度等. ③ 缓冲液:能用新鲜的缓冲液尽量用新鲜的. ④ 胶板一定要洗干净,如果有残留的碎胶,会影响分离效果. 这个最好有图贴上来,能根据实际情况看一下. 百度教育团队【海纳百川团】为您解答.感谢您的采纳,O(∩_∩)O 如有疑问,欢迎追问.
