目前制备单克隆抗体的技术主要为 A瘤细胞培养技术 脾细胞培养技术 C杂交瘤技术 D质粒转染 E流式

作者&投稿:黎油 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
单克隆抗体制备的主要技术A刺激细胞产生并从血清获得B基因工程表达技术C原代细胞培养技术D杂交瘤技术~

D 好像是细胞工程学过。。。
1、免疫动物 免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性Balb/c小鼠,按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官,刺激相应B淋巴细胞克隆,使其活化、增殖,并分化成为致敏B淋巴细胞。
2、细胞融合 采用眼球摘除放血法处死小鼠,无菌操作取出脾脏,在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液。 将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合,并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞。
3、选择性培养 选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培养基。在HAT培养基中,未融合的骨髓瘤细胞因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,不能利用补救途径合成DNA而死亡。 未融合的淋巴细胞虽具有次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。 只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶,并具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,因此能在HAT培养基中存活和增殖。
4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存。
5、单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。
(1)体内诱生法 取Balb/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液体石腊或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周,可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。
(2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。近年来,各种新型培养技术和装置不断出现,大大提高了抗体的生产量。

不对,交瘤细胞有癌细胞的特性,不会贴壁生长和接触抑制,是分散在培养液中生长的,不需要使用胰蛋白酶处理细胞

C杂交瘤技术。


单克隆抗体的制备技术路线和关键点
(2)体内接种杂交瘤细胞,制备腹水或血清。 ①实体瘤法:对数生长期的杂交瘤细胞按1~3×107\/ml接种于小鼠背部皮下,每处注射0.2ml,共2~4点。待肿瘤达到一定大小后(一般10~20天)则可采血,从血清中获得单克隆 抗体的含量可达到1~10mg\/ml。但采血量有限。 ②腹水的制备:常规是先腹腔注射0.5ml Pristane (降植...

大量单克隆抗体的制备方法?
背景 BACKGROUND 困惑 PUZZLED 体外培养法有哪几种培养方式?何谓无血清培养?探索 在体外培养法中,目前各个实验室普遍采用细胞单层法,就是将杂交瘤细胞加入培养瓶中,用完全培养基培养,细胞浓度以1.0X100~2.0X106个\/mL为宜,然后收集培养上清液。如果希望在体外高效率地大量制备单克隆抗体,就必须高...

单克隆抗体的制备方法
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单克隆抗体的B淋巴细胞和浆细胞(效应B细胞)
B淋巴细胞是没经识别反应的,经抗原注入小鼠体内,B淋巴细胞经识别反应形成了效应B细胞就是浆细胞,而制备单克隆抗体的是需要效应B细胞,形成了抗体就说明形成了产生抗体的浆细胞,就是产生抗体后的脾脏的效应B细胞(它最后句的B细胞其实意思是浆细胞)...

简述单克隆抗体的制备过程
5.对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选,就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞;6.最后,将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,或注射到小鼠腹腔内增殖,这样,从细胞培养液或小鼠腹水中,就可以提取出大量的单克隆抗体了!

单克隆抗体的制备过程
采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存。5、单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。

制备单克隆抗体时PEG的分子量为
【答案】:A 分子量越大,融合率越高,但对细胞毒性也越大。一般选择分子量为1000~2000。

制备单克隆抗体过程中要用到那些技术
制备单克隆抗体主要是要得到杂交瘤细胞,杂交瘤细胞是免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞杂交得到的,所以这里利用了动物细胞培养、动物细胞融合,然后就是对杂交瘤细胞的筛选,这里就没有什么技术了!

抗体的制备有哪些?
抗体可以通过多种方法制备,其中最常见的包括多克隆抗体制备、杂交瘤技术制备单克隆抗体以及基因工程抗体技术。多克隆抗体制备是最早使用的抗体制备方法。它利用抗原刺激机体,使机体产生免疫反应并生成多种抗体。这种方法相对简单,成本较低,但需要从免疫动物(如兔、羊等)的血清中提取抗体,因此抗体的特异...

制备单克隆抗体的B淋巴细胞一般在哪里采集?为什么? 谢谢!
小鼠的B淋巴细胞一般在小鼠的脾脏里采集,不需要分离出B细胞,把脾细胞制成单细胞悬液就可以了,这个途径简单,可以获得100万个以上的细胞(包括B细胞,T细胞。人的B细胞可以在外周血中采集。

柘城县19384643439: 单克隆抗体制备的主要技术 -
扶马胆康:[选项] A. 刺激细胞产生并从血清获得 B. 基因工程表达技术 C. 原代细胞培养技术 D. 杂交瘤技术

柘城县19384643439: 制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括() ①细胞培养 ②细胞融合 ③胚胎移植 ④细胞核移植. -
扶马胆康:[选项] A. ①② B. ①③ C. ②③ D. ③④

柘城县19384643439: 目前制备单克隆抗体的技术主要为 A瘤细胞培养技术 脾细胞培养技术 C杂交瘤技术 D质粒转染 E流式 -
扶马胆康: C杂交瘤技术.

柘城县19384643439: 下列属于生产单克隆抗体的主要技术是
扶马胆康: 答案D 制备单克隆抗体是先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞,但这种B淋巴细胞不能在体外生长.而实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖,应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一.故细胞融合属于生产单克隆抗体的主要技术.故本题选D.

柘城县19384643439: 英国克隆羊“多利”的产生,番茄 - 马铃薯的创造,单克隆抗体的制备,依次所属的生物工程技术为() -
扶马胆康:[选项] A. 基因工程、细胞工程、基因工程 B. 细胞工程、细胞工程、细胞工程 C. 基因工程、细胞工程、细胞工程 D. 细胞工程、基因工程、基因工程

柘城县19384643439: 制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括()①细胞培养 ②细胞融合 ③胚胎移植 &nb... -
扶马胆康: A、单克隆抗体主要涉及的细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合技术,A正确; B、单克隆抗体主要涉及的细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合技术,无胚胎移植,B错误; C、单克隆抗体主要涉及的细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合技术,无胚胎移植,C错误; D、单克隆抗体主要涉及的细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合技术,无胚胎移植,细胞核移植,D错误. 故选:A.

柘城县19384643439: 培育英国克隆羊“多利”、培育番茄 - 马铃薯、制备单克隆抗体所用的生物工程技术依次为() -
扶马胆康:[选项] A. 基因工程、细胞工程、基因工程 B. 细胞工程、细胞工程、细胞工程 C. 基因工程、细胞工程、细胞工程 D. 细胞工程、基因工程、基因工程

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