touch down PCR的程序是怎么样的？
Touchdown PCR有使用说明书的吧，你按照说明书来操作肯定可以
Touch down(TD)PCR是一种特殊技术。采用它我们可以不需做预实验来进行条件选择，只需要做一次正式实验，就可能保证此次扩增试验在即使不是最佳也是在比较理想的条件下进行的，绝大多数情况下都可以获得理想的扩增效果。
其基本操作是：根据对引物Tm值的计算，确定一个退火温度的大范围（不是一个点，而是一个可以跨越10～20度的范围），计算的Tm值应落在这个范围中间。在做扩增周期程序设定时，让退火温度从选定范围的最高温度开始逐步降低温度，每次降低一度，最后结束在选定范围的最低温度处。在每一个停留温度上循环两次。这样，引物在某一较高温度下与模板复性并引发延伸合成产物，通常是特异性扩增产物，因为它是在最早也即Tm值较高的条件下引发合成的，在随后退火温度继续下降的过程中，上述的延伸合成会继续进行。可以想象，在退火温度下降过程中，很有可能引物还会在模板上找到第二个复性并引发延伸的部位，但是由于该位点是在更低的Tm值下与引物复性的，故通常是“假阳性扩增”。这两个产物在含量上有极大区别。如果特异性扩增带与假阳性带之间的Tm值相差3度，由于在每个温度上进行两次循环，故特异性较高的合成产物经过了6次循环后假阳性产物才开始合成，故特异性产物的量大于假阳性产物的64倍（26），两者在量上是不难区别的。
touch down pcr就是降落pcr，可以选定一个温度范围，如50——35，每个温度2循环，然后在50度15循环。其原理是，随着退火温度的降低，特异性逐步降低，但特异性条带在温度较高时已经扩增出来，其浓度远远超过非特异性条带，随着退火温度的降低，特异性条带优先被扩增。这种方法的退火温度范围较大，在不知道最佳退火温度时比较适用。
降落PCR通过在PCR的前几个循环使用严谨的退火条件提高特异性，循环在比估算的Tm高大约5度的退火温度下开始，然后每循环降低1度到2度，直到退火温度低于Tm5度。只有同源性高的目的摸板会被继续扩增 ，这些产物在随后的循环中继续扩增，并会将扩增的非特异性产物排挤出去。降落PCR对于那些不了解引物和目的摸板同源性程度的方法较为有用，如AFLP DNA指纹分析。
这是标准的touchdown PCR
充柴活血： Touch down(TD)PCR是一种特殊技术.采用它我们可以不需做预实验来进行条件选择,只需要做一次正式实验,就可能保证此次扩增试验在即使不是最佳也是在比较理想的条件下进行的,绝大多数情况下都可以获得理想的扩增效果. 其基本操...
万全县13973036500： pcr提高退火温度,增加产物特异性 - ？
充柴活血： 是的,你这个如果退火温度提高效果还是不好,建议采用touch down方法,具体程序是你原来是55摄氏度退火,现在61摄氏度第一次退火,每次循环减少1摄氏度,直到53摄氏度,之后用53摄氏度并完成所有反应
万全县13973036500： touch down pcr优点?应用? - ？
充柴活血： 优点:可以富集引物与模板正确配对的产物,在起初的几个循环中,特异性扩增序列可以相对非特异性序列多扩增若干倍 用途:获得低拷贝的目标序列,用oligo-dT引物做RT-PCR,在引物和模板特性未知的情况下做PCR
万全县13973036500： PCR扩出来的条带亮度很弱是什么原因 - ？
充柴活血： 1. 模板的用量在你这种情况下应该和目的条带浓度关系不大——记得realtimePCR的原理图么,循环数够多时,目的片段的终浓度在不同模板量条件下相差不大; 2.首先考虑扩增效率问题,可用touch down PCR,除开头几个循环外,后面的退火...
万全县13973036500： 怎么在代码中为一个button添加touch down的处理函数呢?？
充柴活血： [mw_shl_code=c,true][btn addTarget:self action:@selector(buttonAction) forControlEvents:UIControlEventTouchDown];[/mw_shl_code]
万全县13973036500： 优化PCR技术应先考虑哪些因素 - ？
充柴活血： 退火温度是优化首要考虑的 如果这个不行,按我的经验直接换引物.其它那些优化条件,或者什么touch down PCR之类的都治标不治本.
万全县13973036500： C#WPF怎样判断当前操作时鼠标点击还是触屏操作 - ？
充柴活血： wpf提供了Mouse事件(Down Up Drag),和Touch事件(Down Up Drag).讲道理的话,鼠标点,触发MouseDown,按触摸屏,触发TouchDown.但是实际上在windows平板或者二合一电脑里,触摸屏幕也是会触发(MouseDown)事件的,...
万全县13973036500： 在Windows XP 的附件中不包括的应用程序是 - ----. A 记事本 B Word C 写字板 D 画图 - ？
充柴活血： 在Windows XP的附件中不包括的应用程序是Word. Word是Office套件的核心程序. 作为文字处理器应用程序,Word最初是由Richard Brodie为了运行DOS的IBM计算机而在1983年编写的.随后的版本可运行于Apple Macintosh、SCO UNIX和...
万全县13973036500： onTouch和onTouchEvent的区别 - ？
充柴活血： 区别:1.onTouch方法:onTouch方法是View的 OnTouchListener借口中定义的方法.当一个View绑定了OnTouchLister后,当有touch事件触发时,就会调用onTouch方法.(当把手放到View上后,onTouch方法被一遍一遍地被调用)2....
万全县13973036500： 如何用C/C++实现让自己编译的程序开机自启动?自己的代码写在哪里? - ？
充柴活血： 1.自己在注册表的Run项中添加调用你的程序的注册信息.2.自己写程序,操作注册表,同13.把自己的程序写成服务形式,加在系统服务之中.4.在开始->所有程序>启动(是叫这个名字吧,我是英文系统,中Startup)中添加你的程序的调用.
