对于高效液相色谱法测定中使用标准曲线法的优缺点?
优点:分离效率高,选择性好,检测灵敏度高,操作自动化,应用范围广;
与气相色谱法相比具有的优点:不受试样的挥发性和热稳定性限制,应用范围广;流动相种类多,可通过流动相的优化达到高的分离效率;一般在啊室温下分析即可,不需高柱温。
缺点:分析成本高,液相色谱仪价格及日常维护费用贵,分析时间一般比气相长。
标准曲线法的优点是:绘制好标准工作曲线后测定工作就变得相当简单,可直接从标准工作曲线上读出含量,因此特别适合于大量样品的分析。
标准曲线法的缺点是:每次样品分析的色谱条件(检测器的响应性能,柱温,流动相流速及组成,进样量,柱效等)很难完全相同,因此容易出现较大误差。此外,标准工作曲线绘制时,一般使用欲测组分的标准样品(或已知准确含量的样品),而实际样品的组成却千差万别,因此必将给测量带来一定的误差。
标准曲线法也称外标法或直接比较法,是一种简便、快速的定量方法。与分光光度分析中的标准曲线法相似,首先用欲测组分的标准样品绘制标准曲线。具体方法是:用标准样品配制成不同浓度的标准系列,在与待测组分相同的色谱条件下,等体积准确进样,测量各峰的峰面积或峰高,用峰面积或峰高对样品浓度绘制标准曲线,此标准曲线应是通过原点的直线。若标准曲线不通过原点,则说明存在系统误差。标准曲线的斜率即为绝对校正因子。
在测定样品中的组分含量时,要用与绘制标准曲线完全相同的色谱条件作出色谱图,测量色谱峰面积或峰高,然后根据峰面积和峰高在标准曲线上直接查出注入色谱柱中样品组分的浓度。
缺点:耗费时间很长。
头孢克洛干混悬剂的含量如何用高效液相色谱法测定?
1. 乙腈2. 磷酸二氢钾溶液1.1 高效液相色谱仪1.2 色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶,理论塔板数≥15001.3 紫外吸收检测器试样制备<\/ 1. 磷酸二氢钾溶液:6.8g溶于1000mL水中,pH调整至3.42. 对照品溶液:精确称取头孢克洛20mg,溶解稀释至100mL,制成对照品溶液3. 供试品溶液:取适量(约100...
高效液相色谱法( HPLC- UV)如何测定化合物含量?
1. 在使用高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)测定化合物含量时,化合物的化学稳定性是基本要求,确保在色谱分析过程中不会发生降解或反应,从而保证分析结果的准确性。2. 化合物的分子结构应当具有一定的对称性,这有助于提高色谱柱中化合物的扩散系数,使得分离更为均匀,便于准确测定含量。3. 化合物...
高效液相色谱法能准确测定环丙沙星原料药的含量吗?
方法原理:供试品首先用7%的磷酸溶液溶解,随后加入流动相进行稀释,送入高效液相色谱仪进行分离,紫外吸收检测器在277nm波长下检测环丙沙星的峰面积,从而计算其含量。所需试剂:1. 乙腈2. 枸橼酸溶液(0.05mol\/L)3. 三乙胺4. 7%的磷酸溶液 仪器设备:1. 高效液相色谱仪(包含色谱柱,十八烷基硅...
用高效液相色谱法做标准曲线,应如何配制样品?
做标准曲线首先有标准物质,然后有一个曲线的浓度范围。比如说,标准物质X,浓度是0.1mg\/ml-2mg\/ml。配制样品的时候,取X适量,配制成浓度为10mg\/ml的母液,然后逐级稀释,配制成浓度为0.1mg\/ml,0.2mg\/m,0.5mg\/ml,1.0mg\/ml,2.0mg\/ml的样品,然后按照浓度由低到高的顺序进样分析。(由...
高效液相色谱法
高效液相色谱法以其显著的优势在分析领域独树一帜。首先,它的突出特点在于高效性(柱效高达30000 n\/m)、高速度(相比传统色谱法)、高灵敏度(如紫外检测器可检测至10-9g,荧光检测器可达10-11g)以及高度自动化。与传统色谱法相比,HPLC(高效液相色谱)的固定相、输液设备和检测手段都有明显改进。H...
格列本脲药物分析
高效液相色谱法测定格列本脲含量应用范围:该方法专门用于格列本脲的高效液相色谱测定,以确保其精确度。方法原理:本法依赖于高效液相色谱技术,通过对格列本脲的分析,确定其含量。试剂及仪器:1. 甲醇2. 磷酸二氢铵溶液:1.725g磷酸二氢铵溶于300mL水中,用磷酸调节pH值至3.5±0.05。仪器设备包括...
丙酸睾酮注射液丙酸睾酮注射液-丙酸睾酮-高效液相色谱法
本方法旨在利用高效液相色谱法测定丙酸睾酮注射液中的丙酸睾酮含量,适用于丙酸睾酮注射液的常规分析。其工作原理如下:首先,取适量的供试品用乙醚稀释,待乙醚挥发后,采用甲醇进行提取。接着,对提取液进行定量稀释,并添加内标物。然后,这些样品被送入高效液相色谱仪进行色谱分离,通过紫外吸收检测器在...
气相色谱法与高效液相色谱法相同点和不同点
一、不同点 (一)应用范围不同 1、气相色谱法 分离能力好、灵敏度高、分析速度快、操作方便等。受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析,一般对500℃以下不易挥发或受热易分解的物质部分可采用衍生化法或裂解法。2、液相色谱法 高效液相色谱法,只要求试样...
高效液相色谱法含量计算公式(%)=(A样×C对×V)\/(A对×m样)×100%,m...
A样:对照品的质量 C对:对照品的含量 V:样品的稀释倍数 A对:对照品的稀释倍数 高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而...
高效液相色谱方法学验证如何进行?
高效液相色谱方法学验证如下:1、专属性:查看被测物质与被测结果间是否正确且唯一对应。考察方法:将处被测成分外的其他物质均做空白干扰对照,包括流动相、辅料空白、溶剂空白、其他成分(多组分产品)空白、如果方法有衍生还应包括衍生空白等等。2、精密度:查看方法多次测定是否能够得到相同的结果。考察...
桓冰舒肝:[答案] 优点:线性稳定、良好、准确. 缺点:耗费时间很长.
湖北省19288233018: 高效液相色谱标准曲线的浓度范围?要用液相色谱做间甲酚的标准曲线,却不知道高效液相色谱的标准曲线有没有浓度限制,是不是标准曲线的浓度越高越不... - ?
桓冰舒肝:[答案] 液相的浓度要求不高,我们1000mg/L都可以检测出来,主要看你用什么流动相柱子,最主要是要知道柱温,波长,流速,流量,这些控制好就OK了!气相的话浓度有要求的,不用很高,因为很灵敏!
湖北省19288233018: 饮料中咖啡因的高效液相色谱分析用标准曲线法定量的标准是什么? - ?
桓冰舒肝: 就是配置不同浓度的咖啡 因标准系列,进样后得出系列浓度对应的峰面积,制作标准曲线,以此作为定量标准.一般有外标法和内标法两种.
湖北省19288233018: 高效液相色谱法测药品含量精密度实验是按照做得标准曲线来测得吗 - ?
桓冰舒肝: 不是,精密度和标准曲线是两个指标,要分别测
湖北省19288233018: 高效液相色谱仪标准曲线怎么做 - ?
桓冰舒肝: 在色谱中,峰面积和浓度是成正比的.标准曲线就是一条横轴是浓度,纵轴是峰面积的曲线.做标准曲线首先你的有标准物质,然后有一个曲线的浓度范围. 比如说,标准物质X,浓度是0.1mg/ml-2mg/ml.配制样品的时候,取X适量,配制成...
湖北省19288233018: 高效液相色谱法进行定量分析时应注意什么 - ?
桓冰舒肝: 定性依据的是保留时间. 定量依据的是与对照品的比对. HPLC中常用的定量方法(主要以峰面积为基础),有:外标一点法,外标两点法,外标标准曲线,内标一点法,内标两点法,内标标准曲线;归一化法在一定的条件下也可以用作定量.
湖北省19288233018: 高效液相色谱法测茶叶和咖啡中的咖啡因,若标准曲线用咖啡因浓度对峰高作图能给出准确结果吗 - ?
桓冰舒肝: 楼主也知道一般是用浓度对峰面积;用峰高对峰面积也是可以的,但对峰的对称性要求比较高,药典要求应该是对称因子得是0.95 ~ 1.05之间,色谱条件要求比较高,如果能达到要求也是可以的.
湖北省19288233018: 求助:关于高效液相色谱法含量计算公式的理解 - ?
桓冰舒肝: 关于高效液相色谱法含量计算公式的理解 含量方法学认证主要考察以下几个性质: 1专属性:查看被测物质与被测结果间是否正确且唯一对应. 考察方法:将处被测成分外的其他物质均做空白干扰对照,包括流动相、辅料空白、溶剂空白、...
湖北省19288233018: waters 2695 - 2489高效液相色谱的日常操作方法及故障维修处理 - ?
桓冰舒肝: 8 仪器设备的维护和保养 8.1 色谱柱日常维护 8.1.1 长期不使用HPLCا应该将色谱柱从系统拆除ا拆除前应该充分平衡色谱柱ا一般为用甲醇或乙腈冲洗色谱柱40分钟以上. 8.1.2 每次开机时ا流速和柱压要逐渐加强ا突增压会使柱庆受到冲击引起...