为什么镁离子浓度过高会引起PCR非特异性扩增
镁离子浓度一般用量1.5-2.0 mmol/L，Taq DNA聚合酶活性需要Mg 2+。Mg 2+浓度过低，会显著降低酶活性。Mg 2+浓度过高又使酶催化非特异性扩增增强。Mg 2+浓度还会影响引物的退火、模板与PCR产物的解链温度，从而影响扩增片段的产率。 Takara的mg离子的浓度一般是25mM的，20ul体系我们一般加1.2ul的MgCl2，效果挺好的
因为PCR是一种体外DNA扩增技术，会使引物发生现非特异性扩增；在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下，依赖于DNA聚合酶的酶促合反应；
将待扩增的DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物经“高温变性——低温退火——引物延伸”三步反应的多次循环，使DNA片段在数量上呈指数增加，从而在短时间内获得我们所需的大量的特定基因片段。
扩展资料：
PCR技术的相关介绍：
DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链，重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。
每完成一个循环需 2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。到达平台期所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。PCR的反应动力学 PCR的三个反应步骤反复进行，使DNA扩增量呈指数上升。
反应最终的DNA 扩增量可用Y=(1+X)n计算。Y代表DNA片段扩增后的拷贝数，X表示平(Y)均每次的扩增效率，n代表循环次数。平均扩增效率的理论值为100%， 但在实际反应中平均效率达不到理论值。
反应初期，靶序列DNA片段的增加呈指数形式，随着PCR产物的逐渐积累，被扩增的DNA片段不再呈指数增加，而进 入线性增长期或静止期，即出现“停滞效应”，这种效应称平台期数、PCR扩增效率及DNA聚合酶PCR的种类和活性及非特异性产物的竞争等因素。大多数情况下，平台期的到来是不可避免的。
参考资料来源：百度百科-PCR扩增
参考资料来源：百度百科-PCR技术
小白鼠腹腔注射硫酸镁死亡的原因
硫酸镁的镁离子在腹腔浓度过高则出现中枢抑制。镁离子对周围血管有舒张作用，血镁过高可引起血压下降及呼吸停止以至死亡。摘自《常用药物手册第三版》
井水中的钙镁离子高对人有什么影响
井水中的钙镁离子高，说明井水硬度太高，水的硬度过高，会影响人体健康，比如说得结石病。
体内镁高怎么办
多喝水吧，镁离子主要通过肾脏排泄。镁离子(Mg2+ )是维持神经、肌肉和心脏应激性的重要离子之一。镁离子对中枢神经系统有抑制作用，镁离子浓度过高可引起中枢呼吸麻痹。镁离子可抑制神经系统肌肉接头处释放乙酰胆碱，阻止神经系统肌肉接头处冲动传导，具有镇静作用。镁对心肌应激性具有抑制作用，血镁过高可使...
废水中钙镁离子浓度太高,用离子交换树脂处理,我担心离子交换树脂的再生...
首先需要确认你的废水种类，一般高浓度盐水去除二价钙镁离子选择螯合树脂D851即可，如果是中水回用的零排放项目，一般选用钠床＋弱酸阳床即可，至于你担心树脂频繁再生的问题，离子交换树脂都是有交换当量的，你可以根据原水离子浓度计算得出单台设备的周期处理量，从而得出再生周期。如果原水中钙镁离子过高，...
水的总硬度是否与水中的镁离子有关?
以下是一些相关的分析：1、钙和镁离子的来源 钙和镁离子主要来源于地下水和地表水中与矿物质接触的过程。当水穿过含有钙和镁的土壤和岩石时，会溶解这些矿物质，从而使水中的钙和镁离子浓度增加。2、钙与镁的比例 水中的钙和镁离子通常以不同的比例存在。在一般情况下，镁离子的浓度要低于钙离子的...
PCR mg离子一般是什么浓度
镁离子的量和dNTP的量相关，过量的dNTP会和镁离子结合，降低能有酶结合的游离镁离子的浓度。当dNTP的量正常时，一般镁离子的终浓度再1mM~3.5mM之间吧。如果你的重点是产物量就调高点，要是对特异性更在意就调低点
硫酸镁注射液的副作用是什么?
1. 硫酸镁注射液的副作用主要与其药理作用相关。镁离子如果在中枢神经系统中的浓度过高，可能会导致中枢抑制现象。2. 镁离子对血管有舒张效果，血镁浓度增高可能会引起血压下降，甚至引发呼吸停止，这在极端情况下可能导致死亡。3. 硫酸镁能够抑制中枢神经系统，放松肌肉，具有镇静、抗痉挛效果，并能降低颅...
镁离子在PCR中的作用
镁离子在PCR中的作用是与dNTP、核酸骨架相互作用，影响Polymerase的活性。镁离子浓度对PCR扩增效率影响很大，浓度过高可降低PCR扩增的特异性，浓度过低则影响PCR扩增产量，甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带；一般镁离子的浓度在0.5毫摩尔每升到5毫摩尔每升之间，调整dNTP的浓度后要相应的调整镁离子的浓度。
吸收塔浆液镁离子含量标准
吸收塔是一种用于净化废气的设备，常用于烟气脱硫和脱硝等工艺中。在吸收塔中，浆液通常包含多种成分，其中镁离子是一个重要的参数。根据国家标准《GB 50050-2013 工业企业设计规范》，对于石灰-石膏法、海水法和铵盐法等湿式烟气脱硫工艺来说，在吸收塔出口处排放的废气中，镁离子（Mg2+）的质量浓度应...
荧光定量pcr结果出现的峰有很多个,不止一个,而且内参的峰也是很多个,内...
溶解曲线不止一个主峰1、引物设计不佳：避免二聚体和发夹结构的出现；2、引物浓度不佳：适当调整引物浓度；3、退火温度低：提高退火温度；4、镁离子浓度过高：适当降低镁离子浓度；5、模板中有基因组的污染：通过引物设计避免非特异扩增。
卞诞水王： 首先要明白GC之间是三个氢键连接,而AT之间是两个氢键连接.导致结果便是高GC含量的片段解链需要的能量高,TM值高.其次,退火时相对于正常引物而言,高GC含量引物更容易与互补序列配对,但是,与相近序列配对的可能性也比正常引物高,导致易出现非特异性条带.为防止特异性条带产生,最主要的就是引物的设计,如果无法避免高GC含量,可以通过优化反应条件以及反应体系来减少非特异性扩增.
张家港市15897305032： Mg2+离子浓度影响PCR扩增效率的机制? - ？
卞诞水王： 因为Mg2+是DNA聚合酶(Taq聚合酶)的必需激活剂! Mg2+浓度越高,聚合酶活性越强,过强就会出现非特异性扩增! Mg2+浓度越低,聚合酶活性越低,扩增效率也就越低,产物就越少! ================== 所以PCR扩增实验,需要根据实际情况,摸索适宜的Mg2+浓度!
张家港市15897305032： 基因的PCR扩增出现非特异扩增产物,何故? - ？
卞诞水王： 非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、 或引物聚合形成二聚体.二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数 过多有关.其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶 则不出现,酶量过多有时也会出现非特异性扩增.其对策有:①必要时重新设计引 物.②减低酶量或调换另一来源的酶.③降低引物量,适当增加模板量,减少循环次 数.④适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性,65℃左右退火与延伸).
张家港市15897305032： 镁离子在PCR中的作用镁离子对PCR产物的影响 - ？
卞诞水王：[答案] Mg离子的作用主要是 dNTP-Mg 与核酸骨架相互作用 并能影响Polymerase的活性,一般的情况下 Mg的浓度在0.5-5mM之间调整,同样要记住的是在调整了dNTPs的浓度后要相应的调整Mg离子的浓度 Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大,浓度过...
张家港市15897305032： 氯化镁在PCR中的作用？
卞诞水王： 实际上是镁离子的作用.镁离子是Polymerase的激活剂.浓度过高可降低PCR扩增的特异性,浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带.
张家港市15897305032： 在进行PCR时,模板浓度会导致反应的非特异性增加,怎么理解 - ？
卞诞水王： 由于模板浓度过高时,PCR体系内DNA与DNA之间,DNA与引物之间分子碰撞几率增大,所以可能会出现非特异性扩增,也会出现发卡结构
张家港市15897305032： PCR反应中的镁离子浓度是可以调节的吗? - ？
卞诞水王： 可以.一般来讲,适当调高镁离子浓度有助于提高Taq酶活性,也就是提高PCR效率,但会降低PCR特异性,也就是说可能会有更多杂带.适当降低镁离子浓度则可提高特异性.所以,在实...
张家港市15897305032： PCR mg离子一般是什么浓度 - ？
卞诞水王： 镁离子的量和dNTP的量相关,过量的dNTP会和镁离子结合,降低能有酶结合的游离镁离子的浓度.当dNTP的量正常时,一般镁离子的终浓度再1mM~3.5mM之间吧.如果你的重点是产物量就调高点,要是对特异性更在意就调低点
张家港市15897305032： 模板DNA过高是否会导致PCR产物减少 - ？
卞诞水王： 博凌科为-为你解答:会的.1.模板浓度过高,引物就更多的与模板结合而与PCR产物结合的少,是的前几个循环的扩增数较少;2. 过高的模板会螯合Mg离子,降低Taq酶的活性3..会产生非特异性扩增
