钙离子荧光探针的应用详解
有钙离子敏感的荧光探针，随着钙离子浓度的变化，荧光强度也变化。不过这种方法一般都是用来检测钙离子浓度的变化，而不是检测浓度的。
有钙离子敏感的荧光探针，随着钙离子浓度的变化，荧光强度也变化。不过这种方法一般都是用来检测钙离子浓度的变化，而不是检测浓度的。
吸收波长/发射波长：506nm /526nm(低/高钙)
保存与使用：粉状的FLUO-3AM应保存于-20度以上。建议使用DMSO作为溶媒。在溶解前，FLUO-3AM和DMSO均须放置至室温。溶解过程可能会比较慢。用无水的DMSO溶解的FLUO-3AM长期保存，应严格密封，并保存于-20度。使用前，将保存液放置至室温后再打开。可避免AM探针在长期的保存过程中水解。 1、过程概述
用于细胞内钙离子检测时，Fluo-3 AM的常用浓度为5μM。通常用含有5μM的Fluo-3 AM的适当溶液和细胞一起在37℃孵育30-60分钟进行荧光探针装载，随后适当洗涤，洗涤后可以考虑适当再孵育20-30分钟以确保Fluo-3 AM在细胞内完全转变成Fluo-3。然后在流式细胞仪上进行检测。
2、Fluo-3AM使用液的配置
100ug的Fluo-3AM，分子量是1219.9。按实际需要的摩尔浓度折算，无水DMSO溶解。一般配置成1~5mM的DMSO储存液。如出现难溶现象，可以用20%的F127的DMSO溶液助溶。
四、注意事项：
1、荧光染料有淬灭问题，应尽量避光保存；
2、实验时注意个人防护，戴手套、口罩；
五、应用举例
2、贮存液的配制（5000μM/L）
按照说明书，计算0.1mg 的摩尔数为0.089μM ，则需加DMSO18uL，微量加样器反复吹打混匀后分装，按说明书要求避光-20度冰冻保存。
（二）应用
每毫升细胞悬液中加入1 uL，则Fluo-3AM的使用终浓度为5μM/L
Hoechst 33258染色
固定液 50 ml
Hoechst 33258染色液 50 ml
抗荧光淬灭封片液 5 ml
说明书 1 份
保存条件：
4℃保存，Hoechst 33258染色液需4℃避光保存。本试剂盒自订购之日起六个月内有效。
注意事项：
Ø 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
Ø 需PBS或0.9%NaCl溶液。
Ø 需盖玻片与载玻片。
Ø 荧光物质均易发生淬灭，染色后的样品宜避光保存。
Ø 在使用抗淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光。
so2荧光探针的识别基团有哪些
高氯酸根离子、邻氨基苯硫醚等。根据查询so2荧光探针分析结果得知，其识别基团有高氯酸根离子、邻氨基苯硫醚等，荧光基团是香豆素。荧光探针是具有吸收特定波长的光并发射不同波长的光的小分子。
水溶性荧光探针磺酸基\/季铵盐\/羧基\/聚乙二醇修饰BODIPY化合物_百度...
含双荧光核三枝BODIPY染料 Meso-COOH取代BODIPY 芳环并氟硼二吡咯衍生物 近红外Ⅰ区喹啉-氟硼二吡咯荧光染料 BODIPY-茚酮类荧光染料 BODIPY荧光染料的锌离子Zn2+荧光探针 钯催化偶联BODIPY荧光染料 2-位取代的BODIPY类荧光染料 BODIPY染料pH和金属离子荧光探针 pH和金属离子BODIPY荧光探针 多溴代氟硼二...
荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别
一、原理不同 1、荧光显微镜：是以紫外线为光源， 用以照射被检物体， 使之发出荧光， 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。2、激光共聚焦显微镜：在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置，使用紫外光或可见光激发荧光探针。二、特点不同 1、荧光显微镜：用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学...
检测不同离子的荧光探针会相互影响吗
检测不同离子的荧光探针不相互影响。对靶分子进行检测的分子，要求相互作用后对被探测对象不产生或仅产生可忽略的干扰。
钙离子荧光探针的复染方法
染色步骤：培养细胞Dulbecco’s PBS缓冲液漂洗2～3次(缓冲液预热至室温或37℃)Rhodamine 123(5ug\/ml) 37℃孵育1小时Dulbecco’s PBS缓冲液漂洗2～3次加0.5ml Dulbecco’s PBS，上机测量Fluo-3-AM 染色 (测细胞内游离钙离子浓度)染液配制：Fluo-3-AM 50ug溶于45ul DMSO(Fluo-3-AM浓度 1mM)，...
细胞内钙离子流式检测结果图怎么分析
一般都是钙敏感的荧光探针，比较荧光强度的变化，以代表细胞内部钙离子浓度的变化
用于基因分型的荧光探针PCR原理是什么
PCR的原理及荧光探针我都明白,但是用于基因分型的实时PCR的原理是什么呢?探针是如何设计的,怎么就能分型呢?我说的是TaqMan-MGB探针合成,不是普通的PCR... PCR的原理及荧光探针我都明白,但是用于基因分型的实时PCR的原理是什么呢?探针是如何设计的,怎么就能分型呢?我说的是TaqMan-MGB探针合成,不是普通的PCR 展...
GFP应用研究
例如，Ehrdardt的研究揭示了FtsZ蛋白在细胞分裂中的定位，利用GFP融合蛋白，我们得以了解蛋白质聚合顺序及定位特征。在药物筛选领域，GFP被用于活体细胞荧光分析。根据荧光变化、能量转移或荧光探针分布，可以研究受体、离子通道或酶的状态变化。GFP因其小分子量、低毒性且在细胞内可溶，常作为荧光探针。利用...
影响荧光探针法测cmc的因素
影响荧光探针法测cmc的因素：1、表面活性结构的影响 1）疏水基相同，离子型表面活性剂的cmc比非离子型表面活性剂大，大约两个数量级 2）同系物中，疏水链长增加，cmc下降 3）碳氟链表面活性剂的临界胶团浓度显著低 4）表面活性剂化学结构的影响 a：疏水基有分枝，cmc上升 b：亲水基位于疏水链中，cmc...
为什么荧光探针在pbs里不反应
在相同条件下，用PBS刺激细胞(不含钾离子)。红色通道中的荧光强度几乎没有变化。荧光探针在PBS缓冲溶液中呈现明亮的绿色荧光，但当与次氯酸盐作用后，荧光猝灭。荧光探针在PBS缓冲溶液中与次氯酸盐作用后，几秒钟内反应剧烈。
郗奇复方： 细胞可以用一些钙离子浓度敏感的荧光染料染色.然后可以比较不同组或者同一样本在不同时间的荧光变化,从而得到相对钙离子浓度的变化.
舞阳县19273438919： 免疫荧光标记和离子荧光标记探针有什么用? ？
郗奇复方： 同时,利用免疫荧光标记和离子荧光标记探针,该技术不仅可观察固定的细胞、组织切片,还可以对活细胞的结构、分子、离子及生命活动进行实时动态观察和检测,在亚细胞水平上观察诸如Ca2+,pH值,膜电位等生理信号及细胞形态的变化,成为形态学、分子细胞生物学、神经科学、药理学、遗传学等领域中新一代强有力的研究工具,极大地丰富了人们对细胞生命现象的认识
舞阳县19273438919： 荧光探针一般都应用在哪? ？
郗奇复方： 荧光探针除应用于核酸和蛋白质的定量分析外,在核酸染色、DNA电泳、核酸分子杂交、定量PCR技术以及DNA测序上都有着广泛的应用
舞阳县19273438919： 离子通道的主要功能及研究方法是怎样的? ？
郗奇复方： 离子通道的主要功能有:(1)提高细胞内钙浓度,从而触发肌肉收缩、细胞兴奋、腺体分泌、Ca2+依赖性离子通道开放和关闭、蛋白激酶的激活和基因表达的调节等一系...
舞阳县19273438919： 荧光探针的分类检测 - ？
郗奇复方： 目前常用的荧光探针有荧光素类探针、无机离子荧光探针、荧光量子点、分子信标等.荧光探针除应用于核酸和蛋白质的定量分析外,在核酸染色、DNA电泳、核酸分子杂交、定量PCR技术以及DNA测序上都有着广泛的应用. 目前,检测荧光...
舞阳县19273438919： 测定Ca2+,Mg2+,K+分布的荧光探针 - ？
郗奇复方： Ca2+荧光探针:钙黄绿素(Calcein),Fluo-3,Fura-2/AM Mg2+荧光探针:Mag-Fura-2,[Dy-Mn]聚合物 K+荧光探针很少见,建议查专业的资料.有一本叫《荧光探针技术》的书,内容很全.
舞阳县19273438919： 免疫荧光红色荧光探针常用的有哪些 - ？
郗奇复方： 最常用于荧光免疫法中标记抗原或抗体,亦可用于微环境,如表面活性剂胶束、双分子膜、蛋白质活性位点等处微观特性的探测.通常要求探针的摩尔吸光系数大,荧光量子产率高;荧光发射波长处于长波且有较大的斯托克斯位移;用于免疫分析时
舞阳县19273438919： 紫外分析仪分为几种 - ？
郗奇复方： 紫外分析仪分为很多系列,有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列,不同的紫外分析仪有不同的用途.图片仅介绍了三用紫外分析仪的外形.紫外分析仪是荧光技术的应用,荧光技术是什么呢?首先了解一...
舞阳县19273438919： 荧光染料的科研应用 - ？
郗奇复方： 荧光染料,由于灵敏度高,操作方便,逐渐取代了放射性同位素作为检测标记,其广泛应用于荧光免疫,荧光探针,细胞染色等.包括特异性的DNA染色,用于染色体分析、细胞周期、细胞凋亡等相关研究.另有很多核酸染料在多色染色系统中是非常有用的复染剂,可作为背景对照,标记细胞核使细胞内结构的空间关系一目了然. 核酸荧光染料对细胞核染色后定量测量细胞所发出的荧光强度,就可以确定细胞核中DNA、RNA的含量,并可以对细胞周期和细胞的增殖状况进行分析.有多种荧光染料可以对细胞中的DNA或RNA染色,常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst 33342等,RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等.
舞阳县19273438919： PCR仪的PCR仪的分类 - ？
郗奇复方： 在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,就成了荧光定量PCR仪.其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板...
